论文目录 | |
中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-11页 |
符号说明 | 第11-12页 |
绪论 | 第12-15页 |
第一部分 YB-1 异常表达与肝内胆管癌患者临床病理参数及其预后的关系 | 第15-43页 |
概述 | 第15-17页 |
1 材料和方法 | 第17-23页 |
1.1 病例来源及特点 | 第17页 |
1.2 实验试剂及仪器 | 第17-18页 |
1.2.1 主要试剂 | 第17-18页 |
1.2.2 主要仪器 | 第18页 |
1.3 实验方法 | 第18-23页 |
1.3.1 免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)实验 | 第18-20页 |
1.3.2 Western免疫印迹(Western Blot,WB) | 第20-23页 |
1.3.2.1 组织蛋白裂解 | 第20页 |
1.3.2.2 蛋白浓度测定(Lowry法) | 第20-21页 |
1.3.2.3 SDS-PAGE变性凝胶电泳 | 第21-22页 |
1.3.2.4 Western blot | 第22-23页 |
1.4 统计学处理 | 第23页 |
2 结果 | 第23-33页 |
2.1 肝内胆管癌一般临床病理学资料 | 第23页 |
2.2 肝内胆管癌组织中YB-1 蛋白的异常表达 | 第23-25页 |
2.3 YB-1 异常表达与临床病理参数间的关系 | 第25-27页 |
2.4 YB-1 异常表达与肝内胆管癌患者生存期之间的关系 | 第27-30页 |
2.5 YB-1 蛋白不同表达模式与术后辅助化疗患者预后的关系 | 第30-33页 |
3 讨论 | 第33-43页 |
第二部分 下调YB-1 对肝内胆管癌细胞增殖的调节及其机制研究 | 第43-65页 |
概述 | 第43-46页 |
1 材料和方法 | 第46-55页 |
1.1 实验试剂及仪器 | 第46-47页 |
1.1.1 细胞株和培养方法 | 第46页 |
1.1.2 主要试剂 | 第46-47页 |
1.1.3 主要仪器 | 第47页 |
1.2 实验方法 | 第47-55页 |
1.2.1 siRNA转染实验 | 第47-48页 |
1.2.2 质粒转染实验 | 第48页 |
1.2.3 甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测细胞增殖 | 第48-49页 |
1.2.3.1 MTT法检测下调YB-1 对胆管癌细胞株增殖的影响 | 第48-49页 |
1.2.3.2 MTT法检测上调YB-1 对胆管癌细胞株增殖的影响 | 第49页 |
1.2.4 细胞周期检测 | 第49-50页 |
1.2.5 Real-time PCR检测YB-1对PCNA、p21、cyclin D1的影响 | 第50-53页 |
1.2.6 Western blot检测YB-1 siRNA对PCNA、p21和cyclin D1的影响 | 第53-55页 |
1.3 统计分析 | 第55页 |
2 结果 | 第55-61页 |
2.1 下调及上调YB-1对HCCC-9810和TKF-1细胞增殖的影响 | 第55-57页 |
2.2 下调YB-1对胆管癌细胞株细胞周期的影响 | 第57-58页 |
2.3 YB-1通过p21蛋白调节HCCC-9810和TKF-1细胞增殖 | 第58-61页 |
3 讨论 | 第61-65页 |
第三部分 YB-1 过表达对肝内胆管癌细胞多药耐受性的影响及其机制研究 | 第65-76页 |
概述 | 第65-66页 |
1. 材料和方法 | 第66-71页 |
1.1 实验试剂及仪器 | 第66-67页 |
1.1.1 细胞株和培养方法 | 第66页 |
1.1.2 主要试剂 | 第66页 |
1.1.3 主要仪器 | 第66-67页 |
1.2 实验方法 | 第67-71页 |
1.2.1 质粒转染实验 | 第67页 |
1.2.2 过表达YB-1 对肝内胆管癌细胞吉西他滨敏感性的影响 | 第67-68页 |
1.2.3 Real-time PCR检测YB-1 对MDR1、MRP1和BCRP的影响 | 第68-71页 |
1.3 统计分析 | 第71页 |
2 结果 | 第71-73页 |
2.1 过表达YB-1 增加HCCC-9810对吉西他滨耐受性 | 第71-72页 |
2.2 YB-1 通过上调多药耐受相关基因增加HCCC-9810多药耐受性 | 第72-73页 |
3 讨论 | 第73-76页 |
结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
学术论文和科研成果目录 | 第97页 |