论文目录 | |
| 缩略语表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-14页 |
| Abstract | 第14-21页 |
| 前言 | 第21-22页 |
| 文献回顾 | 第22-29页 |
| 1. 人涎腺黏液表皮样癌现状回顾 | 第22-23页 |
| 2. 黏液表皮样癌化疗与耐药的研究进展 | 第23-24页 |
| 3. MIRNAS对肿瘤耐药的影响 | 第24-26页 |
| 4. 黄芩苷抗肿瘤作用研究 | 第26-29页 |
| 第一部分:黏液表皮样癌耐药细胞系及其裸鼠耐药移植瘤的建立 | 第29-41页 |
| 1 材料 | 第29-31页 |
| 2 方法 | 第31-33页 |
| 2.1 MC3 细胞培养与生长曲线测定 | 第31页 |
| 2.2 耐药诱导过程 | 第31-32页 |
| 2.3 MEC/5FU 细胞药物敏感性及交叉耐药性测定 | 第32页 |
| 2.4 MC3 细胞裸鼠移植瘤模型制备 | 第32-33页 |
| 2.5 MEC/5FU 细胞裸鼠移植瘤模型制备 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-38页 |
| 3.1 耐药 MEC/5FU 细胞的建立 | 第33-34页 |
| 3.2 MC3 细胞裸鼠移植瘤模型的建立 | 第34-36页 |
| 3.3 MEC/5FU 细胞裸鼠耐药移植瘤模型的建立 | 第36页 |
| 3.4 耐药移植瘤原代细胞耐药相关基因的表达情况 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-41页 |
| 第二部分 黄芩苷对 MC3 细胞及其移植瘤的抑制作用研究 | 第41-49页 |
| 1 材料 | 第41-42页 |
| 2 方法 | 第42-43页 |
| 2.1 MTT 比色法测定 MC3 细胞增殖 | 第42页 |
| 2.2 流式细胞术检测 MC3 细胞周期 | 第42页 |
| 2.3 流式细胞术检测 MC3 细胞凋亡 | 第42-43页 |
| 2.4 Hoechst33342 染色观察 MC3 细胞凋亡 | 第43页 |
| 2.5 荷瘤裸鼠模型测定黄芩苷体内抑瘤作用 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-47页 |
| 3.1 黄芩苷对 MC3 细胞增殖的影响 | 第43-44页 |
| 3.2 黄芩苷对 MC3 细胞周期的影响 | 第44-45页 |
| 3.3 黄芩苷诱导 MC3 细胞凋亡 | 第45页 |
| 3.4 黄芩苷对 MC3 细胞裸鼠移植瘤的抑制作用 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 第三部分 黄芩苷对 MEC/5FU 细胞及其移植瘤的抑制作用研究 | 第49-55页 |
| 1 材料 | 第49页 |
| 2 方法 | 第49-50页 |
| 2.1 黄芩苷对 MEC/5FU 细胞增殖、凋亡的影响 | 第49页 |
| 2.2 RTPCR 检测黄芩苷对 MEC/5FU 细胞 MDR1 表达的影响 | 第49页 |
| 2.3 罗丹明 123 染色检测黄芩苷对 MEC/5FU 细胞药泵作用 | 第49-50页 |
| 2.4 裸鼠实验检测黄芩苷对 MEC/5FU 移植瘤的抑制作用 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-53页 |
| 3.1 黄芩苷对 MEC/5FU 细胞的抑瘤作用 | 第50-51页 |
| 3.2 黄芩苷诱导 MEC/5FU 细胞凋亡 | 第51页 |
| 3.3 黄芩苷对 MEC/5FU 细胞耐药基因表达的影响 | 第51页 |
| 3.4 黄芩苷对 MEC/5FU 细胞药泵的影响 | 第51-52页 |
| 3.5 黄芩苷对 MEC/5FU 细胞系移植瘤的抑制作用 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 第四部分 MEC/5FU 耐药细胞系的耐药机制探讨 | 第55-74页 |
| 1 材料 | 第56-57页 |
| 2 方法 | 第57-63页 |
| 2.1 细胞培养: | 第57页 |
| 2.2 总 RNA 提取、纯化和质量检测： | 第57-58页 |
| 2.3 基因芯片检测 MEC/5FU 细胞的基因表达 | 第58-60页 |
| 2.4 RTPCR 验证部分芯片结果 | 第60-61页 |
| 2.5 免疫荧光验证相关耐药基因的表达 | 第61-62页 |
| 2.6 罗丹明 123 蓄积实验检测 MEC/5FU 细胞药泵功能 | 第62页 |
| 2.7 miRNA 芯片检测耐药细胞中差异表达的 miRNAs | 第62页 |
| 2.8 realtimeRTPCR 验证部分差异表达 miRNAs | 第62-63页 |
| 3 结果 | 第63-71页 |
| 3.1 耐药细胞系的基因表达谱 | 第63-65页 |
| 3.2 MEC/5FU 细胞中耐药相关基因表达情况 | 第65页 |
| 3.3 MDR1 在 MEC/5FU 细胞中的表达 | 第65页 |
| 3.4 MRP1 在 MEC/5FU 细胞中特异性核定位 | 第65-66页 |
| 3.5 MEC/5FU 细胞中药泵作用 | 第66-67页 |
| 3.6 MEC/5FU 细胞中 miRNAs 差异表达 | 第67-68页 |
| 3.7 miR202 和 miR125a 在 MEC/5FU 细胞中的表达 | 第68-69页 |
| 3.8 黄芩苷作用后 MEC/5FU 细胞中 miRNAs 差异表达 | 第69页 |
| 3.9 黄芩苷对 MEC/5FU 细胞 miR107 和 miR34a 的影响 | 第69-71页 |
| 4 讨论 | 第71-74页 |
| 小结 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 附录 | 第82-89页 |
