论文目录 | |
摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-41页 |
1.1 叶黄素的研究进展 | 第19-29页 |
1.1.1 叶黄素的理化特性 | 第19页 |
1.1.2 叶黄素的生理功效 | 第19-20页 |
1.1.3 叶黄素的分布和来源 | 第20-21页 |
1.1.4 叶黄素的提取和分离 | 第21-22页 |
1.1.5 利用基因工程技术高效生产叶黄素 | 第22-29页 |
1.2 小球藻的研究进展 | 第29-39页 |
1.2.1 小球藻的生物特征 | 第29-30页 |
1.2.2 小球藻的研究历史 | 第30页 |
1.2.3 小球藻的培养 | 第30-31页 |
1.2.4 小球藻分子生物学研究进展 | 第31-37页 |
1.2.5 利用小球藻生产叶黄素 | 第37-39页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第39-41页 |
第二章 八氢番茄红素合成酶基因的克隆与功能分析 | 第41-106页 |
2.1 材料 | 第41-45页 |
2.1.1 植物 | 第41-44页 |
2.1.2 菌种及表达载体 | 第44页 |
2.1.3 常用试剂 | 第44-45页 |
2.2 方法 | 第45-72页 |
2.2.1 原壳小球藻psy基因的克隆 | 第45-54页 |
2.2.2 原壳小球藻psy基因生物信息学分析 | 第54-55页 |
2.2.3 原壳小球藻psy基因原核表达分析 | 第55-59页 |
2.2.4 原壳小球藻psy基因启动子的克隆与分析 | 第59-65页 |
2.2.5 原壳小球藻psy基因转化生菜的研究 | 第65-70页 |
2.2.6 原壳小球藻psy基因转化衣藻的研究 | 第70-72页 |
2.3 结果与讨论 | 第72-104页 |
2.3.1 原壳小球藻psy基因的克隆 | 第72-77页 |
2.3.2 原壳小球藻psy基因的生物信息学分析 | 第77-84页 |
2.3.3 原壳小球藻psy基因的原核表达分析 | 第84-88页 |
2.3.4 原壳小球藻psy基因启动子的克隆 | 第88-97页 |
2.3.5 原壳小球藻psy基因转化生菜的研究 | 第97-102页 |
2.3.6 原壳小球藻psy基因转化衣藻的研究 | 第102-104页 |
2.4 小结 | 第104-106页 |
第三章 八氢番茄红素脱氢酶基因的功能分析 | 第106-121页 |
3.1 材料 | 第106-107页 |
3.1.1 菌株及表达载体 | 第106页 |
3.1.2 常用试剂 | 第106-107页 |
3.2 方法 | 第107-110页 |
3.2.1 引物设计 | 第107页 |
3.2.2 原壳小球藻pds基因原核表达载体的构建 | 第107页 |
3.2.3 原壳小球藻PDS酶活检测 | 第107-108页 |
3.2.4 原壳小球藻pds基因的随机突变和定点突变分析 | 第108页 |
3.2.5 原壳小球藻pds基因生物信息学分析 | 第108-109页 |
3.2.6 原壳小球藻pds基因启动子的克隆和序列分析 | 第109页 |
3.2.7 MeJA对原壳小球藻pds基因表达的影响 | 第109-110页 |
3.3 结果及讨论 | 第110-119页 |
3.3.1 原壳小球藻pds基因表达载体的构建 | 第110-111页 |
3.3.2 原壳小球藻PDS酶活检测 | 第111-113页 |
3.3.3 原壳小球藻pds基因的随机突变和定点突变分析 | 第113-116页 |
3.3.4 原壳小球藻pds基因启动子的克隆和序列分析 | 第116-119页 |
3.3.5 MeJA对原壳小球藻pds基因表达的影响 | 第119页 |
3.4 小结 | 第119-121页 |
第四章 环境因子对叶黄素合成关键基因表达的影响 | 第121-141页 |
4.1 材料 | 第121-122页 |
4.1.1 试剂 | 第121-122页 |
4.1.2 实验仪器 | 第122页 |
4.2 方法 | 第122-126页 |
4.2.1 原壳小球藻的培养方法 | 第122页 |
4.2.2 分析方法 | 第122-123页 |
4.2.3 氯化钠(NaCl)处理 | 第123-124页 |
4.2.4 ABA处理 | 第124-125页 |
4.2.5 光照处理 | 第125页 |
4.2.6 荧光定量PCR检测相关基因的表达情况 | 第125-126页 |
4.3 结果与讨论 | 第126-139页 |
4.3.1 NaCl处理 | 第126-133页 |
4.3.2 ABA处理 | 第133-136页 |
4.3.3 光照处理 | 第136-139页 |
4.4 小结 | 第139-141页 |
第五章 小球藻叶绿体转化体系的建立 | 第141-159页 |
5.1 材料 | 第141-142页 |
5.1.1 藻株 | 第141-142页 |
5.1.2 菌株和载体 | 第142页 |
5.1.3 试剂 | 第142页 |
5.2 方法 | 第142-149页 |
5.2.1 小球藻藻株的生长曲线 | 第142-143页 |
5.2.2 小球藻藻株对抗生素的敏感性测定 | 第143页 |
5.2.3 普通小球藻叶绿体转化载体的构建 | 第143-145页 |
5.2.4 FUDR处理条件的优化 | 第145-146页 |
5.2.5 叶绿体转化方法 | 第146-147页 |
5.2.6 转基因藻株的分子鉴定 | 第147页 |
5.2.7 原壳小球藻细胞核转化载体的构建 | 第147-149页 |
5.3 结果与讨论 | 第149-158页 |
5.3.1 小球藻生长曲线的绘制 | 第149页 |
5.3.2 小球藻对链霉素和壮观霉素的敏感性测定 | 第149-150页 |
5.3.3 FUDR处理条件的优化 | 第150-152页 |
5.3.4 普通小球藻叶绿体转化载体的构建 | 第152-153页 |
5.3.5 小球藻的叶绿体转化 | 第153-154页 |
5.3.6 转化藻株的检测 | 第154-155页 |
5.3.7 原壳小球藻表达载体的构建 | 第155-158页 |
5.4 小结 | 第158-159页 |
第六章 总结与展望 | 第159-162页 |
6.1 主要结论 | 第159-160页 |
6.2 创新性分析 | 第160页 |
6.3 研究展望 | 第160-162页 |
参考文献 | 第162-179页 |
附录一 缩写词表 | 第179-180页 |
附录二 仪器设备 | 第180-181页 |
致谢 | 第181-184页 |
攻读学位期间已发表和准备中的学术论文 | 第184页 |