论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 中英文对照表 | 第14-16页 |
| 第一部分 绪论 | 第16-20页 |
| 第二部分 Hiwi 基因在乳腺癌组织与细胞株中的表达研究 | 第20-32页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第20-21页 |
| 1.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 1.2 实验仪器 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.1 临床样本 | 第21页 |
| 2.2 细胞株培养 | 第21-22页 |
| 2.3 组织与细胞 RNA 提取 | 第22-23页 |
| 2.4 逆转录 | 第23页 |
| 2.5 Hiwi 基因表达检测引物设计与合成 | 第23-24页 |
| 2.6 实时荧光定量 PCR 反应 | 第24页 |
| 2.7 运用 Western blot 检测乳腺癌细胞中 Hiwi 蛋白表达 | 第24-25页 |
| 2.8 统计学分析 | 第25-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-31页 |
| 3.1 Hiwi 基因在乳腺癌组织表达的荧光定量 PCR 检测结果 | 第26-27页 |
| 3.2 Hiwi 基因 mRNA 表达与临床病理学相关性 | 第27-28页 |
| 3.3 Hiwi 基因蛋白在乳腺癌组织内表达 | 第28-29页 |
| 3.4 Hiwi 基因 mRNA 以及蛋白在乳腺癌细胞系表达 | 第29-31页 |
| 实验小结 | 第31-32页 |
| 第三部分 Hiwi 基因在乳腺癌中过表达对乳腺癌细胞株生长影响 | 第32-44页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第32-33页 |
| 1.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 1.2 实验仪器 | 第33页 |
| 2 实验方法 | 第33-39页 |
| 2.1 质粒提取 | 第33-34页 |
| 2.2 脂质体介导的质粒载体的细胞转染 | 第34-35页 |
| 2.3 荧光定量 PCR 检测细胞内 Hiwi 基因表达 | 第35-38页 |
| 2.4 运用 Western blot 检测乳腺癌细胞中 Hiwi 蛋白表达 | 第38-39页 |
| 2.5 细胞增殖检测 | 第39页 |
| 2.6 细胞克隆 | 第39页 |
| 2.7 统计数分析 | 第39页 |
| 3 实验结果 | 第39-43页 |
| 3.1 Hiwi 基因载体稳定转染 MCF-7 细胞 | 第39-40页 |
| 3.2 基因载体稳定转染 MCF-7 细胞后 Hiwi 表达检测结果 | 第40-42页 |
| 3.3 Hiwi 基因载体稳定转染 MCF-7 细胞后的生长分析结果 | 第42页 |
| 3.4 Hiwi 基因载体稳定转染 MCF-7 细胞的克隆形成情况 | 第42-43页 |
| 实验小结 | 第43-44页 |
| 第四部分 siRNA 抑制 Hiwi 基因在乳腺癌过表达对乳腺癌细胞株生长影响 | 第44-54页 |
| 1 实验材料与仪器 | 第44-45页 |
| 1.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 1.2 实验仪器 | 第45页 |
| 2 实验方法 | 第45-49页 |
| 2.1 靶向 Hiwi 基因的 siRNA 设计与合成 | 第45-46页 |
| 2.2 Hiwi siRNA 对稳定转染 Hiwi 基因 MCF-7 细胞内 Hiwi 基因表达影响 | 第46-47页 |
| 2.3 Hiwi siRNA 对稳定转染 Hiwi 基因 MCF-7 细胞增殖的影响 | 第47-48页 |
| 2.4 Hiwi siRNA 对稳定转染 Hiwi 基因 MCF-7 细胞克隆形成的影响 | 第48-49页 |
| 2.5 统计数分析 | 第49页 |
| 3 实验结果 | 第49-52页 |
| 3.1 靶向 Hiwi 基因 siRNA 转染乳腺癌细胞后，细胞内 Hiwi基因表达 | 第49-50页 |
| 3.2 靶向 Hiwi 基因 siRNA 转染乳腺癌细胞后，对细胞生长影响 | 第50-51页 |
| 3.3 靶向 Hiwi 基因 siRNA 转染乳腺癌细胞后，对细胞克隆形成影响 | 第51-52页 |
| 实验小结 | 第52-54页 |
| 第五部分 讨论 | 第54-58页 |
| 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 文献综述 | 第70-90页 |
| 参考文献 | 第84-90页 |
| 作者简介及攻读博士期间所取得的科研成果 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
