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胍丁胺通过抑制NMDA受体活性及其信号通路对糖尿病大鼠视网膜Müller细胞保护作用的研究

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胍丁胺通过抑制NMDA受体活性及其信号通路对糖尿病大鼠视网膜Müller细胞保护作用的研究
论文目录
 
提要第1-5页
中文摘要第5-9页
Abstract第9-19页
英文缩略词表第19-20页
第1章 绪论第20-42页
  1.1 糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)第20-27页
    1.1.1 糖尿病视网膜病变概述第20页
    1.1.2 糖尿病视网膜病变的病理基础第20-23页
    1.1.3 糖尿病视网膜病变的发病机制第23-26页
    1.1.4 糖尿病视网膜病变的神经保护治疗第26-27页
  1.2 Müller 细胞第27-33页
    1.2.1 Müller 细胞概述第28-31页
    1.2.2 Müller 细胞与视网膜疾病第31-33页
  1.3 NMDA 受体第33-36页
    1.3.1 NMDA 受体的结构特征第34页
    1.3.2 NMDA 受体参与神经细胞损伤及凋亡第34-35页
    1.3.3 NMDA 受体与 DM 相关疾病第35-36页
    1.3.4 NMDA 受体与信号传导途径第36页
  1.4 胍丁胺第36-42页
    1.4.1 胍丁胺的生物合成与分布第37页
    1.4.2 胍丁胺的生物学功能及应用第37-39页
    1.4.3 胍丁胺与 NMDA 受体系统第39-42页
第2章 胍丁胺对高糖诱导的MüLLER 细胞生长及凋亡的影响第42-56页
前言第42页
  2.1 实验材料第42-44页
    2.1.1 主要仪器及设备第42-43页
    2.1.2 实验试剂第43-44页
    2.1.3 主要配制试剂及其配制方法第44页
    2.1.4 实验动物第44页
  2.2 实验方法第44-47页
    2.2.1 大鼠视网膜 Müller 细胞的分离及培养第44-45页
    2.2.2 免疫荧光检测细胞中 GS 和 NMDAR1 的表达情况第45-46页
    2.2.3 高糖诱导 Müller 细胞模型的建立及胍丁胺药物干预第46-47页
    2.2.4 CCK-8 法检测上述各组细胞的生长情况第47页
    2.2.5 Hochest 染色检测细胞凋亡第47页
    2.2.6 Annexin V/PI 流式细胞术检测细胞凋亡第47页
    2.2.7 数据分析第47页
  2.3 实验结果第47-52页
    2.3.1 SD 大鼠视网膜 Müller 细胞生长情况观察第47-48页
    2.3.2 免疫荧光鉴定 Müller 细胞中 GS 和 NMDAR1 的表达情况第48-49页
    2.3.3 胍丁胺药物作用浓度筛选第49-50页
    2.3.4 胍丁胺对高糖诱导下 Müller 细胞生长的影响第50-51页
    2.3.5 Hochest 染色检测细胞凋亡情况第51-52页
    2.3.6 Annexin V/PI 流式细胞术检测细胞凋亡第52页
  2.4 讨论第52-56页
第3章 胍丁胺对高糖培养下 MüLLER 细胞炎性因子释放的影响第56-66页
前言第56页
  3.1 实验材料第56-58页
    3.1.1 主要仪器及设备第56-57页
    3.1.2 实验试剂第57-58页
    3.1.3 细胞来源第58页
  3.2 实验方法第58-62页
    3.2.1 高糖诱导 Müller 细胞模型的建立及实验分组第58页
    3.2.2 ELISA 检测各组细胞上清液中 TNF-α的含量第58-59页
    3.2.3 Real-time PCR 检测各组细胞 TNF-α mRNA 表达水平第59-62页
    3.2.4 数据分析第62页
  3.3 实验结果第62-64页
    3.3.1 ELISA 检测胍丁胺对各组细胞上清液中 TNF-α分泌的影响第62-63页
    3.3.2 Real-time PCR 检测胍丁胺对各组细胞 TNF-α mRNA 表达水平的影响第63-64页
  3.4 讨论第64-66页
第4章 胍丁胺对糖尿病大鼠视网膜病变的影响第66-76页
前言第66页
  4.1 实验材料第66-68页
    4.1.1 主要仪器及设备第66页
    4.1.2 实验试剂第66-67页
    4.1.3 主要配制试剂及其配制方法第67页
    4.1.4 实验动物第67-68页
  4.2 实验方法第68-70页
    4.2.1 糖尿病视大鼠模型建立及药物干预第68页
    4.2.2 TUNEL 检测大鼠视网膜神经节细胞凋亡第68-70页
    4.2.3 透射电镜观察大鼠视网膜病变情况第70页
  4.3 实验结果第70-72页
    4.3.1 TUNEL 检测大鼠视网膜神经节细胞凋亡第70-71页
    4.3.2 透射电镜观察大鼠视网膜病变情况第71-72页
  4.4 讨论第72-76页
第5章 胍丁胺对高糖培养下 MüLLER 细胞保护作用的机制研究第76-90页
前言第76页
  5.1 实验材料第76-78页
    5.1.1 主要仪器及设备第76-77页
    5.1.2 实验试剂第77-78页
    5.1.3 细胞来源第78页
  5.2 实验方法第78-84页
    5.2.1 高糖诱导 Müller 细胞模型的建立及实验分组第78页
    5.2.2 LDH 试剂盒检测细胞活性第78-79页
    5.2.3 各组细胞中游离钙离子浓度检测第79-80页
    5.2.4 Western blot 检测上述各组细胞中凋亡相关蛋白及 MAPK 信号通路激活第80-83页
    5.2.5 数据分析第83-84页
  5.3 实验结果第84-87页
    5.3.1 LDH 试剂盒检测细胞活性第84-85页
    5.3.2 各组细胞中游离钙离子浓度检测第85页
    5.3.3 Western blot 检测各组细胞中凋亡相关蛋白表达情况第85-86页
    5.3.4 Western blot 检测各组细胞中 MAPK 信号通路激活情况第86-87页
  5.4 讨论第87-90页
第6章 结论第90-92页
参考文献第92-116页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第116-118页
致谢第118页

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