论文目录 | |
| 序 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-10页 |
| Abstract | 第10-18页 |
| 英文缩略词表 | 第18-20页 |
| 第1章 引言 | 第20-36页 |
| 1.1 文献综述 | 第20-34页 |
| 1.1.1 骨髓间充质干细胞的体外分离及多向分化 | 第20-22页 |
| 1.1.1.1 骨髓间充质干细胞的体外分离方法 | 第20-21页 |
| 1.1.1.2 骨髓间充质干细胞的体外诱导分化 | 第21-22页 |
| 1.1.2 骨髓间充质干细胞免疫学特性 | 第22-23页 |
| 1.1.2.1 MSCs 具有低免疫原性及可移植性 | 第23页 |
| 1.1.2.2 MSCs 还具有免疫调节性 | 第23页 |
| 1.1.2.3 MSCs 在宿主体内可诱导免疫耐受 | 第23页 |
| 1.1.3 骨髓间充质干细胞表面标记物及鉴定 | 第23-24页 |
| 1.1.3.1 骨髓间充质干细胞表面标记物 | 第23-24页 |
| 1.1.3.2 骨髓间充质干细胞的鉴定 | 第24页 |
| 1.1.4 BMSCs 的临床研究进展 | 第24-34页 |
| 1.1.4.1 BMSCs 与心血管疾病 | 第24-26页 |
| 1.1.4.2 BMSCs 与神经系统疾病 | 第26-28页 |
| 1.1.4.3 BMSCs 与运动系统疾病 | 第28-30页 |
| 1.1.4.4 BMSCS 与消化系统 | 第30-31页 |
| 1.1.4.5 BMSCs 与自身免疫病 | 第31-32页 |
| 1.1.4.6 BMSCs 与糖尿病 | 第32-33页 |
| 1.1.4.7 BMSCs 与眼科疾病 | 第33-34页 |
| 1.2 论文工作设想 | 第34-36页 |
| 第2章 实验研究 | 第36-80页 |
| 2.1 hBMSCs 的分离培养及鉴定 | 第36-49页 |
| 2.1.1 材料 | 第36-37页 |
| 2.1.1.1 hBMSCs 及 ODN 来源 | 第36页 |
| 2.1.1.2 hBMSCs 分离培养的主要试剂 | 第36页 |
| 2.1.1.3 hBMSCs 多向诱导分化试剂（重新排序） | 第36-37页 |
| 2.1.1.4 多向分化诱导染色鉴定试剂 | 第37页 |
| 2.1.1.5 流式细胞术表面分子检测试剂 CD73、 CD90 、CD105、CD34、CD45、CD116 HLA-DR 染色剂 | 第37页 |
| 2.1.1.6 实验仪器及耗材 | 第37页 |
| 2.1.2 方法 | 第37-42页 |
| 2.1.2.1 密度梯度离心分离人原代 BMSCs | 第38页 |
| 2.1.2.2 人骨髓间充质干细胞冻存 | 第38-39页 |
| 2.1.2.3 人骨髓间充质干细胞的成骨分化诱导 | 第39页 |
| 2.1.2.4 人骨髓间充质干细胞的成脂分化诱导 | 第39-40页 |
| 2.1.2.5 人骨髓间充质干细胞的成软骨分化诱导 | 第40-41页 |
| 2.1.2.6 流式细胞仪检测 hBMSCs 表面标志物 | 第41-42页 |
| 2.1.3 数据整理和分析 | 第42页 |
| 2.1.4 结果 | 第42-47页 |
| 2.1.4.1 人骨髓间充质干细胞的分离及形态学观察 | 第42-43页 |
| 2.1.4.2 人骨髓间充质干细胞的成骨、成脂和成软骨诱导后染色 | 第43-45页 |
| 2.1.4.3 人骨髓间充质干细胞特定表面分子的流式细胞仪鉴定 | 第45-47页 |
| 2.1.5 讨论 | 第47-49页 |
| 2.1.6 小结 | 第49页 |
| 2.2 hBMSCs 最佳铺板密度的确定 | 第49-54页 |
| 2.2.1 材料 | 第49-50页 |
| 2.2.1.1 hBMSCs 来源 | 第49页 |
| 2.2.1.2 hBMSCs 复苏及传代培养的主要试剂 | 第49页 |
| 2.2.1.3 实验仪器及耗材 | 第49-50页 |
| 2.2.2 方法 | 第50-52页 |
| 2.2.2.1 人骨髓间充质干细胞复苏 | 第50页 |
| 2.2.2.2 细胞培养传代 | 第50-51页 |
| 2.2.2.3 人骨髓间充质干细胞接种于 96 孔板 | 第51-52页 |
| 2.2.2.4 检测方法 | 第52页 |
| 2.2.3 数据整理和分析 | 第52页 |
| 2.2.4 结果 | 第52-53页 |
| 2.2.5 讨论 | 第53-54页 |
| 2.2.6 小结 | 第54页 |
| 2.3 ODN 对 hBMSCs 增殖的影响 | 第54-62页 |
| 2.3.1 材料 | 第54-55页 |
| 2.3.1.1 hBMSCs 及 ODN 来源 | 第54-55页 |
| 2.3.1.2 hBMSCs 复苏及传代培养的主要试剂 | 第55页 |
| 2.3.1.3 实验仪器及耗材 | 第55页 |
| 2.3.2 方法 | 第55-58页 |
| 2.3.2.1 人骨髓间充质干细胞复苏 | 第56页 |
| 2.3.2.2 细胞培养传代 | 第56页 |
| 2.3.2.3 ODN 对人骨髓间充质干细胞增殖的影响 | 第56-57页 |
| 2.3.2.4 检测方法 | 第57-58页 |
| 2.3.3 数据整理和统计学分析 | 第58页 |
| 2.3.4 结果 | 第58-61页 |
| 2.3.5 讨论 | 第61页 |
| 2.3.6 小结 | 第61-62页 |
| 2.4 ODN MT01 对 hBMSCs 细胞周期的影响 | 第62-68页 |
| 2.4.1 材料 | 第62-63页 |
| 2.4.1.1 hBMSCs 及 ODN 来源 | 第62页 |
| 2.4.1.2 hBMSCs 复苏及传代培养的主要试剂 | 第62页 |
| 2.4.1.3 实验仪器及耗材 | 第62-63页 |
| 2.4.2 方法 | 第63-65页 |
| 2.4.2.1 人骨髓间充质干细胞复苏 | 第63页 |
| 2.4.2.2 细胞培养传代 | 第63-64页 |
| 2.4.2.3 ODN 对人骨髓间充质干细胞周期的影响 | 第64页 |
| 2.4.2.4 细胞周期检测方法 | 第64-65页 |
| 2.4.3 数据整理和统计学分析 | 第65页 |
| 2.4.4 结果 | 第65-66页 |
| 2.4.5 讨论 | 第66-67页 |
| 2.4.6 小结 | 第67-68页 |
| 2.5 ODN MT01 对 hBMSCs 细胞周期影响的机制 | 第68-80页 |
| 2.5.1 材料 | 第68-69页 |
| 2.5.1.1 hBMSCs 、ODN 及实时荧光定量 PCR 引物来源 | 第68页 |
| 2.5.1.2 hBMSCs 复苏、传代培养及逆转录 PCR 及实时荧光定量 PCR 主要试剂 | 第68-69页 |
| 2.5.1.3 实验仪器及耗材 | 第69页 |
| 2.5.2 方法 | 第69-72页 |
| 2.5.2.1 人骨髓间充质干细胞复苏 | 第69-70页 |
| 2.5.2.3 ODN MT01 对人骨髓间充质干细胞周期影响的机制 | 第70-71页 |
| 2.5.2.4 样本总 RNA 的提取 | 第71页 |
| 2.5.2.5 逆转录 PCR 合成 cDNA (20 μL 体系) | 第71-72页 |
| 2.5.2.6 实时荧光定量 PCR (Real-time PCR) | 第72页 |
| 2.5.3 数据整理和统计学分析 | 第72页 |
| 2.5.4 结果 | 第72-78页 |
| 2.5.5 讨论 | 第78页 |
| 2.5.6 小结 | 第78-80页 |
| 第3章 结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-94页 |
