论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一篇 EYA-1 在应激反应中的作用机制 | 第14-72页 |
| 第一章 引言 | 第14-36页 |
| 1.1 EYA 蛋白，一类重要的蛋白质酪氨酸磷酸酶 | 第15-24页 |
| 1.1.1 EYA 蛋白的发现 | 第15-18页 |
| 1.1.2 EYA-1 | 第18页 |
| 1.1.3 EYA-2 | 第18页 |
| 1.1.4 EYA-3 | 第18页 |
| 1.1.5 EYA-4 | 第18-19页 |
| 1.1.6 EYA-1 与 Branchio-oto-renal（BOR）综合症 | 第19-20页 |
| 1.1.7 EYA-2 与生殖系统肿瘤 | 第20页 |
| 1.1.8 EYA-4 与迟发性进行性听力丧失（DNFA10） | 第20-21页 |
| 1.1.9 线虫 EYA-1 基因的研究现状 | 第21-24页 |
| 1.2 热应激 | 第24-25页 |
| 1.3 氧化应激 | 第25-27页 |
| 1.3.1 氧化应激机制 | 第25-26页 |
| 1.3.2 氧化应激与老年痴呆症 | 第26-27页 |
| 1.4 线虫—生命科学研究的优秀模式生物 | 第27-31页 |
| 1.4.1 秀丽新杆线虫简介 | 第27-31页 |
| 1.5 RNA 干扰—一种征服人类疾病的武器 | 第31-33页 |
| 1.5.1 RNAi 在线虫中的实现方法 | 第31-33页 |
| 1.6 课题研究思路 | 第33-36页 |
| 第二章 EYA-1 基因的克隆表达 | 第36-44页 |
| 2.1 实验用品 | 第36-37页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第36页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第36页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-41页 |
| 2.2.1 基本分子生物学实验方法 | 第37页 |
| 2.2.2 引物设计 | 第37页 |
| 2.2.3 目的片段的扩增 | 第37-38页 |
| 2.2.4 克隆载体的构建和测定 | 第38-39页 |
| 2.2.5 表达载体的构建和诱导表达 | 第39-41页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第41-43页 |
| 2.3.1 目的片段的扩增 | 第41页 |
| 2.3.2 克隆载体的构建 | 第41-42页 |
| 2.3.3 表达载体的构建 | 第42页 |
| 2.3.4 目的蛋白的可溶性表达 | 第42-43页 |
| 2.4 本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 EYA-1 生物学功能的研究 | 第44-72页 |
| 3.1 实验用品 | 第44-46页 |
| 3.1.1 质粒、菌株、抗体和线虫 | 第44页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第44-46页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-57页 |
| 3.2.1 表达 EYA-1 dsRNA 菌株的构建 | 第46-47页 |
| 3.2.2 对照组菌株的构建 | 第47-48页 |
| 3.2.3 线虫的一般培养 | 第48-50页 |
| 3.2.4 对线虫 EYA-1 的干扰 | 第50-52页 |
| 3.2.5 线虫 EYA-1 基因表达位点的研究 | 第52-53页 |
| 3.2.6 干扰后对线虫表型的观测 | 第53-57页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第57-69页 |
| 3.3.1 dsRNA 表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 3.3.2 对照组细菌构建 | 第58-59页 |
| 3.3.3 Western Blot 检测干扰效果 | 第59页 |
| 3.3.4 免疫组织化学染色 | 第59-60页 |
| 3.3.5 干扰 EYA-1 的表达对线虫热应激抵抗能力的影响 | 第60-61页 |
| 3.3.6 干扰 EYA-1 的表达对线虫氧化应激抵抗力的影响 | 第61-64页 |
| 3.3.7 干扰 EYA-1 的表达对蛋白质毒性诱导的瘫痪表型的影响 | 第64-65页 |
| 3.3.8 干扰 EYA-1 的表达降低线虫应激抵抗力与 daf-16 的关系 | 第65-67页 |
| 3.3.9 干扰 EYA-1 的表达对 hsp-12.3 和 sod-3 mRNA 的影响 | 第67-69页 |
| 3.4 本章小结 | 第69-72页 |
| 第二篇 以线虫为模型研究复方左卡尼汀的药理和毒理作用 | 第72-104页 |
| 第一章 引言 | 第72-80页 |
| 1.1 左卡尼汀 | 第72-74页 |
| 1.1.1 左卡尼汀的作用机理和应用 | 第72页 |
| 1.1.2 左卡尼汀的临床应用 | 第72-74页 |
| 1.2 曲美他嗪 | 第74-77页 |
| 1.2.1 曲美他嗪的作用机理 | 第74-75页 |
| 1.2.2 曲美他嗪的临床应用 | 第75-77页 |
| 1.3 复方左卡尼汀 | 第77-80页 |
| 1.3.1 左卡尼汀和曲美他嗪的联合应用 | 第77页 |
| 1.3.2 复方左卡尼汀注射液的由来 | 第77-80页 |
| 第二章 复方左卡尼汀对于线虫寿命及生殖能力的影响 | 第80-98页 |
| 2.1 实验用品 | 第80-83页 |
| 2.1.1 线虫株及大肠杆菌菌株 | 第80页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第80页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第80页 |
| 2.1.4 实验分组 | 第80页 |
| 2.1.5 药物浓度的确定 | 第80-81页 |
| 2.1.6 主要溶液的配置 | 第81-83页 |
| 2.2 实验方法 | 第83-84页 |
| 2.2.1 线虫的同期化培养 | 第83页 |
| 2.2.2 给药后线虫寿命的观测 | 第83页 |
| 2.2.3 给药后线虫产卵数目的观测 | 第83-84页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第84-96页 |
| 2.3.1 药物对亲代线虫寿命的影响 | 第84-86页 |
| 2.3.2 药物对 F1 代线虫寿命的影响 | 第86-88页 |
| 2.3.3 药物对 F2 代线虫寿命的影响 | 第88-90页 |
| 2.3.4 不同浓度的左卡尼汀、曲美他嗪以及不同配比的复方左卡尼汀对于线虫寿命的影响 | 第90-93页 |
| 2.3.5 药物对亲代线虫产卵数量的影响 | 第93-94页 |
| 2.3.6 药物对于 F1 代线虫产卵数目的影响 | 第94-95页 |
| 2.3.7 药物对于 F2 代线虫产卵数目的影响 | 第95-96页 |
| 2.4 本章小结 | 第96-98页 |
| 第三章 复方左卡尼汀对于线虫脂肪代谢的影响 | 第98-104页 |
| 3.1 实验用品 | 第98-99页 |
| 3.1.1 线虫株及大肠杆菌菌株 | 第98页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第98页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第98页 |
| 3.1.4 药物浓度的确定 | 第98-99页 |
| 3.1.5 主要溶液的配置 | 第99页 |
| 3.2 实验方法 | 第99-100页 |
| 3.2.1 线虫的固定及染色 | 第99页 |
| 3.2.2 气相色谱检测脂肪酸法 | 第99-100页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第100-102页 |
| 3.3.1 脂肪染色结果 | 第100-101页 |
| 3.3.2 脂肪酸含量的气相色谱分析结果 | 第101-102页 |
| 3.4 本章小结 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-116页 |
| 攻读博士期间发表的论文科研成果 | 第116-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
