论文目录 | |
| 致谢 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-15页 |
| Abstract | 第15-27页 |
| 绪论 | 第27-30页 |
| 1 第一部分 ROS调控AKT蛋白分子内二硫键形成及其在4-HPR诱导白血病细胞凋亡中的作用研究 | 第30-61页 |
| 1.1 引言 | 第30-32页 |
| 1.2 实验材料与仪器 | 第32-36页 |
| 1.2.1 细胞株与实验动物 | 第32页 |
| 1.2.2 药物与主要试剂 | 第32-34页 |
| 1.2.3 主要仪器 | 第34-36页 |
| 1.3 实验方法 | 第36-41页 |
| 1.3.1 细胞培养 | 第36页 |
| 1.3.2 流式细胞术测定细胞凋亡 | 第36页 |
| 1.3.3 JC-1染色测定线粒体膜电位变化 | 第36页 |
| 1.3.4 Western-blot法检测蛋白含量变化 | 第36-38页 |
| 1.3.5 免疫沉淀检测蛋白相互作用 | 第38页 |
| 1.3.6 流式细胞术测定细胞相内活性氧变化 | 第38页 |
| 1.3.7 免疫荧光法观察Akt和HSP90或PP2Ac在细胞内的共定位情况 | 第38-39页 |
| 1.3.8 Akt1蛋白活性测定 | 第39页 |
| 1.3.9 蛋白氧化还原态测定 | 第39页 |
| 1.3.10 细胞内蛋白二硫键含量测定 | 第39-40页 |
| 1.3.11 动物体内血糖测定 | 第40页 |
| 1.3.12 数据分析 | 第40-41页 |
| 1.4 实验结果 | 第41-59页 |
| 1.4.1 Akt蛋白的去磷酸化参与4-HPR诱导的白血病细胞凋亡 | 第41-46页 |
| 1.4.2 4-HPR诱导的ROS调控Akt蛋白磷酸化及其在细胞凋亡中的作用 | 第46-51页 |
| 1.4.3 4-HPR诱导产生的ROS调控Akt蛋白形成分子内二硫键 | 第51-55页 |
| 1.4.4 4-HPR调控的Akt蛋白分子内二硫键形成与Akt蛋白去磷酸化的关系 | 第55-59页 |
| 1.5 讨论 | 第59-61页 |
| 2 第二部分 ROS调控DJ-1蛋白氧化态在4-HPR诱导肿瘤细胞自噬/凋亡间转化中的作用研究 | 第61-109页 |
| 2.1 引言 | 第61-63页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第63-65页 |
| 2.2.1 细胞株、质粒、SiRNA与实验动物 | 第63页 |
| 2.2.2 药物与主要试剂 | 第63-64页 |
| 2.2.3 仪器 | 第64-65页 |
| 2.3 实验方法 | 第65-71页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第65页 |
| 2.3.2 流式细胞术测定细胞凋亡 | 第65页 |
| 2.3.3 JC-1染色测定线粒体膜电位变化 | 第65页 |
| 2.3.4 Western-blot法检测蛋白含量变化 | 第65页 |
| 2.3.5 免疫沉淀检测蛋白相互作用 | 第65页 |
| 2.3.6 流式细胞术测定细胞相内活性氧变化 | 第65页 |
| 2.3.7 免疫荧光法观察DJ-1和ASK-1在细胞内的共定位情况 | 第65-66页 |
| 2.3.8 质粒转染及siRNA干扰技术 | 第66页 |
| 2.3.9 慢病毒颗粒细胞转染 | 第66-67页 |
| 2.3.10 RT-PCR测定相关基因转录水平变化 | 第67-68页 |
| 2.3.11 稳定敲除DJ-1人官颈癌细胞Hela裸小鼠移植瘤模型的建立及实验治疗作用 | 第68-69页 |
| 2.3.12 电子显微镜观察细胞自噬与凋亡 | 第69页 |
| 2.3.13 细胞内谷胱甘肽及蛋白质中自由巯基含量测定 | 第69页 |
| 2.3.14 二维电泳及质谱鉴定 | 第69-70页 |
| 2.3.15 TUNEL法检测细胞凋亡 | 第70页 |
| 2.3.16 数据分析 | 第70-71页 |
| 2.4 实验结果 | 第71-105页 |
| 2.4.1 4-HPR诱导的ROS介导肿瘤细胞自噬/凋亡转化 | 第71-83页 |
| 2.4.2 JNK1和p38信号通路分别介导ROS诱发的细胞自噬和凋亡 | 第83-87页 |
| 2.4.3 4-HPR诱导的ROS可影响DJ-1/ASK1蛋白复合物稳定性 | 第87-91页 |
| 2.4.4 ROS调控的DJ-1蛋白氧化态在肿瘤细胞自噬/凋亡转化中的作用 | 第91-96页 |
| 2.4.5 DJ-1蛋白的表达在肿瘤细胞对4-HPR敏感性中的作用 | 第96-102页 |
| 2.4.6 内质网应激在4-HPR诱导的ROS诱发细胞自噬中的作用 | 第102-105页 |
| 2.5 讨论 | 第105-109页 |
| 参考文献 | 第109-118页 |
| 综述 | 第118-127页 |
| 参考文献 | 第124-127页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第127-131页 |
