论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 缩略语/符号说明 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 研究现状、成果 | 第13-16页 |
| 研究目的、方法 | 第16-17页 |
| 一、KIF22在乳腺癌细胞增殖中的作用及机制 | 第17-36页 |
| 1.1 对象和方法 | 第17-22页 |
| 1.1.1 细胞培养 | 第17页 |
| 1.1.2 质粒构建、siRNA和细胞转染 | 第17页 |
| 1.1.3 细胞同步化 | 第17-18页 |
| 1.1.3.1 S期细胞同步化 | 第17-18页 |
| 1.1.3.2 M期细胞同步化 | 第18页 |
| 1.1.4 逆转录实时定量PCR(RT-QPCR) | 第18-19页 |
| 1.1.4.1 细胞总RNA提取 | 第18页 |
| 1.1.4.2 cDNA的合成 | 第18页 |
| 1.1.4.3 荧光定量PCR反应 | 第18-19页 |
| 1.1.5 Immunoblt | 第19页 |
| 1.1.6 细胞免疫荧光染色 | 第19-20页 |
| 1.1.7 流式细胞术 | 第20页 |
| 1.1.8 染色质免疫沉淀 | 第20-21页 |
| 1.1.8.1 细胞的甲醛固定 | 第20页 |
| 1.1.8.2 染色体DNA的超声破碎及鉴定 | 第20页 |
| 1.1.8.3 特异抗体与染色质复合物的结合 | 第20页 |
| 1.1.8.4 抗体与染色质复合物的分离 | 第20-21页 |
| 1.1.8.5 染色质复合物的解交联与DNA片段的纯化 | 第21页 |
| 1.1.8.6 PCR反应 | 第21页 |
| 1.1.9 MTT | 第21页 |
| 1.1.10 双荧光素酶报告系统检测启动子活性 | 第21-22页 |
| 1.1.11 统计学分析 | 第22页 |
| 1.2 结果 | 第22-34页 |
| 1.2.1 沉默KIF22表达抑制乳腺癌细胞增殖 | 第22-24页 |
| 1.2.2 沉默KIF22表达抑制有丝分裂退出 | 第24-29页 |
| 1.2.3 KIF22通过Thr463位点磷酸化转录抑制CDC25表达 | 第29-32页 |
| 1.2.5 沉默KIF22通过上调CDC25C表达激活CDK1活性 | 第32-34页 |
| 1.3 讨论 | 第34-35页 |
| 1.4 小结 | 第35-36页 |
| 二、KIF22在乳腺癌细胞转移中的作用及机制 | 第36-42页 |
| 2.1 对象和方法 | 第36-37页 |
| 2.1.1 细胞培养 | 第36页 |
| 2.1.2 Transwell | 第36页 |
| 2.1.3 Immunoblot | 第36页 |
| 2.1.4 TGF-β信号通路活性检测 | 第36-37页 |
| 2.1.5 RT-QPCR、MTT、IFC | 第37页 |
| 2.1.6 统计学分析 | 第37页 |
| 2.2 结果 | 第37-40页 |
| 2.2.1 沉默KIF22表达增强乳腺癌细胞迁移和侵袭能力 | 第37页 |
| 2.2.2 沉默KIF22表达诱导乳腺癌细胞EMT表型 | 第37-39页 |
| 2.2.3 沉默KIF22表达激活TGF-β信号通路 | 第39-40页 |
| 2.3 讨论 | 第40-41页 |
| 2.4 小结 | 第41-42页 |
| 全文结论 | 第42-43页 |
| 论文创新点 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第49-50页 |
| 综述 | 第50-71页 |
| 综述参考文献 | 第62-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
