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桑树中一种新病毒和一种小分子环状RNA的研究

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桑树中一种新病毒和一种小分子环状RNA的研究
论文目录
 
摘要第1-10页
Abstract第10-13页
1 前言第13-38页
  · 桑花叶卷叶病的历史记载第13-14页
  · 桑花叶卷叶病的症状及发生情况第14-15页
  · 桑花叶卷叶病的病原的研究现状第15-16页
  · 桑树病毒的研究进展第16-17页
  · 线虫传多面体病毒属病毒的研究第17-26页
    · 线虫传多面体病毒属病毒的分类地位及分类依据第17-19页
    · 线虫传多面体病毒的基因组结构特征与功能第19-23页
    · 线虫传多面体病毒的传播途径第23页
    · 线虫传多面体病毒的检测第23-26页
  · 植物病毒卫星RNA的研究第26-29页
    · 植物病毒卫星RNA的分类第26-27页
    · 环状单链卫星RNA的二级结构第27页
    · 环状单链卫星RNA的复制第27-29页
  · 类病毒的研究第29-35页
    · 类病毒的分类、结构第30-31页
    · 类病毒的复制、移动和传播第31-32页
    · 类病毒的检测第32-35页
  · 环状单链卫星RNA与类病毒的区别第35-36页
  · 小分子环状RNA侵染性克隆第36页
  · 本研究的目的和意义第36-38页
2 桑花叶卷叶病叶中一种新发现的病毒的研究第38-77页
  · 材料和方法第39-54页
    · 样品的采集第39页
    · 试剂和菌株第39页
    · 桑叶总RNA提取第39-40页
    · 病毒dsRNA的提取第40-41页
    · 粗提纯病毒样品的制备及电子显微镜观察第41页
    · 病毒RNA的提取第41页
    · 引物合成第41-42页
    · 随机锚定引物RT-PCR扩增病毒基因组第42-43页
    · 5',3'-RACE第43-46页
    · 序列分析第46-48页
    · RT-PCR检测第48-49页
    · 琼脂糖凝胶电泳分析第49页
    · Western blot第49-50页
    · MMLRaV抗血清的制备第50-53页
    · 生物接种实验第53-54页
  · 结果第54-72页
    · 粗提纯病毒样品的电子显微镜观察第54-55页
    · 桑叶总RNA的质量检测第55页
    · cDNA合成和锚定随机引物的扩增第55-56页
    · 5',3'-RACE第56-58页
    · 病毒基因组序列分析第58-63页
    · 运动蛋白和外壳蛋白之间的切割位点第63-65页
    · MMLRaV基因组RNA1和RNA2的3'-UTR核苷酸序列分析第65页
    · 生物接种实验第65-66页
    · 大田中MMLRaV的RT-PCR检测第66-67页
    · MMLRaV抗血清的制备第67-72页
  · 讨论第72-77页
3 桑花叶卷叶病叶中一种小分子环状RNA的研究第77-108页
  · 材料和方法第77-90页
    · 实验材料第77-78页
    · 主要试剂第78页
    · 桑树中小分子RNA的提取第78-79页
    · 5%往返聚丙烯酰胺凝胶电泳第79页
    · 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳第79页
    · mscRNA的纯化第79页
    · mscRNA的分子量大小评估第79-80页
    · 引物的合成第80页
    · mscRNA的cDNA合成、克隆和测序第80-83页
    · 两步法RT-PCR第83-84页
    · 单管一步RT-PCR第84-85页
    · PCR产物纯化、重组质粒的构建、重组质粒的提取第85页
    · DIG标记的RNA探针的制备第85页
    · Dot blot和Northern blot杂交第85-86页
    · mscRNA二级结构及锤头型核酶结构预测第86页
    · mscRNA侵染性克隆的构建第86-89页
    · mscRNA的接种第89-90页
  · 结果与分析第90-104页
    · mscRNA的2D-PAGE分析及纯化第90页
    · mscRNA的分子量大小评估第90-91页
    · mscRNA分子的cDNA合成、克隆及测序第91-93页
    · mscRNA链极性的确定以及二级结构预测第93-94页
    · mscRNA正链上的锤头型核酶第94-97页
    · mscRNA序列多样性分析第97-98页
    · mscRNA侵染性克隆的构建第98页
    · mscRNA的生物学鉴定第98页
    · 单管一步RT-PCR检测体系的建立第98-100页
    · 单管一步RT-PCR、Dot blot和Northern blot在mscRNA检测中的应用第100-104页
  · 讨论第104-108页
全文总结第108-111页
  1 桑花叶卷叶病叶中一种新病毒的研究第108-109页
  2 桑小分子环状RNA的研究第109页
  3 今后研究的重点及展望第109-111页
参考文献第111-124页
附录1 缩略词第124-125页
附录2 MMLRaV RNA1和RNA2的序列第125-131页
附录3 分子生物学试剂购置及通用试剂的配制第131-136页
致谢第136页

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