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脂肪间充质干细胞修复放射性肠损伤的实验研究

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脂肪间充质干细胞修复放射性肠损伤的实验研究
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前言第1-7页
中文摘要第7-10页
Abstract第10-23页
第1章 绪论第23-25页
第2章 综述第25-47页
  2.1 放射性肠损伤疾病介绍第25-26页
    2.1.1 放射性肠损伤的病因及发病率第25页
    2.1.2 放射性肠损伤的疾病分型第25页
    2.1.3 放射性肠损伤的临床/病理表现第25-26页
  2.2 放射性肠损伤的发病机制第26-28页
    2.2.1 肠干细胞与放射性肠损伤第26-27页
    2.2.2 血管内皮细胞与放射性肠损伤第27-28页
    2.2.3 炎症细胞攻击与放射性肠损伤第28页
  2.3 放射性肠损伤疾病的治疗现状第28-29页
  2.4 放射性肠损伤疾病治疗的研究现状第29-31页
  2.5 间充质干细胞介绍第31-34页
    2.5.1 间充质干细胞来源第31-32页
    2.5.2 间充质干细胞的形态学特点第32页
    2.5.3 间充质干细胞的功能特点第32-33页
    2.5.4 间充质干细胞的趋化作用第33-34页
  2.6 间充质干细胞在疾病治疗中的应用第34-40页
    2.6.1 间充质干细胞与心血管系统疾病第34-36页
    2.6.2 间充质干细胞与神经系统疾病第36-37页
    2.6.3 间充质干细胞与呼吸系统疾病第37-38页
    2.6.4 间充质干细胞与消化系统疾病第38-39页
    2.6.5 间充质干细胞与免疫系统疾病第39-40页
  2.7 应用间充质干细胞治疗放射性肠损伤的研究进展第40-41页
  2.8 脂肪来源间充质干细胞的优势分析第41-42页
  2.9 间充质干细胞修复放射性肠损伤的机制分析第42-45页
    2.9.1 间充质干细胞向肠上皮细胞分化的作用第42-43页
    2.9.2 间充质干细胞向血管内皮细胞分化的作用第43页
    2.9.3 间充质干细胞调节免疫细胞功能的作用第43-44页
    2.9.4 间充质干细胞自分泌/旁分泌的作用第44-45页
  2.10 本研究的技术路线第45-47页
第3章 放射性肠损伤的辐射剂量依赖性研究第47-61页
  3.1 引言第47-48页
  3.2 材料和方法第48-54页
    3.2.1 实验动物第48页
    3.2.2 试剂第48-49页
    3.2.3 主要溶液配置第49-50页
    3.2.4 主要仪器设备第50页
    3.2.5 放射性肠损伤动物模型的建立第50-51页
    3.2.6 实验动物分组第51页
    3.2.7 实验动物生存状态分析第51-52页
    3.2.8 实验动物处死与标本获取第52页
    3.2.9 肠组织标本 H&E 染色第52-53页
    3.2.10 统计学方法第53-54页
  3.3 结果第54-58页
    3.3.1 一般状态分析第54页
    3.3.2 生存状态分析第54-56页
    3.3.3 H&E 染色第56-58页
  3.4 讨论第58-60页
  3.5 小结第60-61页
第4章 脂肪间充质干细胞促进受照肠上皮再生的作用研究第61-85页
  4.1 引言第61-63页
  4.2 材料和方法第63-73页
    4.2.1 实验动物第63页
    4.2.2 试剂第63-65页
    4.2.3 主要溶液配置第65-66页
    4.2.4 主要仪器设备第66-67页
    4.2.5 放射性肠损伤动物模型建立第67页
    4.2.6 实验动物分组第67页
    4.2.7 实验动物生存状态分析第67页
    4.2.8 实验动物处死与标本获取第67-68页
    4.2.9 脂肪间充质干细胞分离培养第68页
    4.2.10 脂肪间充质干细胞体外诱导分化第68-69页
    4.2.11 脂肪间充质干细胞细胞表型分析第69页
    4.2.12 脂肪间充质干细胞体内示踪第69-70页
    4.2.13 肠组织标本 H&E 染色第70页
    4.2.14 肠组织标本免疫组化染色第70页
    4.2.15 肠组织标本 TUNEL 原位细胞凋亡检测第70-71页
    4.2.16 肠组织标本实时荧光定量 PCR 基因表达检测第71-72页
    4.2.17 Image-Pro Plus 6.0 软件图片分析第72页
    4.2.18 统计学方法第72-73页
  4.3 结果第73-82页
    4.3.1 脂肪间充质干细胞分化能力鉴定第73-74页
    4.3.2 脂肪间充质干细胞表型鉴定第74-75页
    4.3.3 脂肪间充质干细胞趋化能力鉴定第75-76页
    4.3.4 实验动物生存状态分析第76-77页
    4.3.5 H&E 染色第77-79页
    4.3.6 隐窝 Ki67 阳性增殖细胞分析第79-80页
    4.3.7 肠上皮细胞的凋亡第80页
    4.3.8 隐窝 Bmi1 阳性肠干细胞数量分析第80-81页
    4.3.9 肠组织标本增殖/凋亡基因表达水平第81-82页
  4.4 讨论第82-84页
  4.5 小结第84-85页
第5章 脂肪间充质干细胞修复辐射诱导肠血管损伤的作用研究第85-111页
  5.1 引言第85-86页
  5.2 材料和方法第86-94页
    5.2.1 实验动物第86页
    5.2.2 试剂第86-88页
    5.2.3 主要溶液配置第88-89页
    5.2.4 主要仪器设备第89-90页
    5.2.5 放射性肠损伤动物模型建立第90页
    5.2.6 实验动物分组第90页
    5.2.7 实验动物生存状态分析第90页
    5.2.8 实验动物处死与标本获取第90页
    5.2.9 脂肪间充质干细胞的分离、培养及鉴定第90页
    5.2.10 肠组织标本血管内皮细胞免疫荧光染色第90-91页
    5.2.11 肠组织标本血管完整性免疫组化染色第91页
    5.2.12 肠组织标本血管密度 Isolectin-B4 染色第91-92页
    5.2.13 肠组织 CD31 阳性细胞流式细胞分析第92页
    5.2.14 肠组织标本新生血管内皮细胞免疫荧光染色第92页
    5.2.15 肠组织标本新生内皮细胞来源免疫荧光染色第92-93页
    5.2.16 肠组织标本实时荧光定量 PCR 基因表达检测第93页
    5.2.17 Image-Pro Plus 6.0 软件图片分析第93页
    5.2.18 统计学方法第93-94页
  5.3 结果第94-106页
    5.3.1 脂肪间充质干细胞鉴定第94-95页
    5.3.2 实验动物生存状态分析第95页
    5.3.3 肠绒毛内血管内皮细胞染色第95-96页
    5.3.4 肠绒毛内新生血管内皮细胞染色第96-97页
    5.3.5 肠绒毛血管的完整性分析第97页
    5.3.6 肠组织 CD31 阳性细胞计数第97-101页
    5.3.7 损伤处血管内皮细胞染色第101-102页
    5.3.8 损伤处的血管密度第102-104页
    5.3.9 损伤处新生内皮细胞的来源第104页
    5.3.10 肠组织内促血管生成因子的表达水平第104-106页
  5.4 讨论第106-109页
  5.5 小结第109-111页
第6章 脂肪间充质干细胞的抗炎作用研究第111-127页
  6.1 引言第111-112页
  6.2 材料和方法第112-119页
    6.2.1 实验动物第112页
    6.2.2 试剂第112-113页
    6.2.3 主要溶液配置第113-115页
    6.2.4 主要仪器设备第115页
    6.2.5 放射性肠损伤动物模型建立第115页
    6.2.6 实验动物分组第115-116页
    6.2.7 实验动物处死及标本获取第116页
    6.2.8 脂肪间充质干细胞的复苏与培养第116页
    6.2.9 肠组织标本 H&E 染色第116页
    6.2.10 肠组织标本 Masson 染色第116-117页
    6.2.11 肠组织标本炎症细胞免疫组化染色第117页
    6.2.12 流式细胞分析第117-118页
    6.2.13 外周血 IL-10 ELISA 检测第118页
    6.2.14 统计学分析第118-119页
  6.3 结果第119-124页
    6.3.1 肠组织标本 H&E 染色第119页
    6.3.2 肠组织标本 Masson 染色第119-120页
    6.3.3 炎症细胞 MPO 免疫组化染色第120-121页
    6.3.4 外周血、胸腺 CD4/CD25/Foxp(3)调节性 T 细胞含量第121-122页
    6.3.5 外周血 IL-10 水平第122-123页
    6.3.6 胸腺 CD4/CD8 阳性 T 细胞流式细胞分析第123-124页
  6.4 讨论第124-126页
  6.5 小结第126-127页
第7章 结论第127-129页
参考文献第129-153页
攻读博士学位期间的主要科研成果第153-155页
致谢第155-156页

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