论文目录 | |
中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
英文缩写词 | 第14-15页 |
第1章 绪论 | 第15-17页 |
第2章 综述 | 第17-29页 |
2.1 氯离子通道研究现状 | 第17-23页 |
2.1.1 氯离子通道的分类及组织分布 | 第17-19页 |
2.1.2 氯离子通道的生物学特性 | 第19-23页 |
2.2 CLC-2 的研究进展 | 第23-29页 |
2.2.1 ClC-2 的分子结构 | 第23-24页 |
2.2.2 ClC-2 的分布 | 第24-25页 |
2.2.3 ClC-2 的调节 | 第25-26页 |
2.2.4 ClC-2 相关疾病 | 第26-29页 |
第3章 CLC-2 氯离子通道在 RGC-5 细胞的表达 | 第29-37页 |
3.1 实验材料 | 第29-30页 |
3.1.1 细胞株 | 第29页 |
3.1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第30页 |
3.2 实验方法 | 第30-34页 |
3.2.1 RGC-5 细胞培养 | 第30-31页 |
3.2.2 细胞传代 | 第31页 |
3.2.3 细胞冻存 | 第31页 |
3.2.4 细胞计数 | 第31页 |
3.2.5 RT-PCR 方法检测 ClC-2 mRNA 在 RGC-5 细胞上的表达 | 第31-33页 |
3.2.6 细胞免疫荧光法检测 ClC-2 蛋白在 RGC-5 细胞上的表达 | 第33-34页 |
3.3 实验结果 | 第34-35页 |
3.3.1 RT-PCR 法检测 ClC-2 mRNA 在 RGC-5 细胞上的表达 | 第34页 |
3.3.2 细胞免疫荧光法检测 ClC-2 蛋白在 RGC-5 细胞上的表达 | 第34-35页 |
3.4 小结 | 第35-37页 |
第4章 谷氨酸诱导 RGC-5 细胞的凋亡 | 第37-43页 |
4.1 实验材料 | 第37-38页 |
4.1.1 主要试剂 | 第37页 |
4.1.2 主要仪器设备 | 第37-38页 |
4.1.3 实验分组 | 第38页 |
4.2 实验方法 | 第38-40页 |
4.2.1 谷氨酸诱导的 RGC-5 细胞调亡 | 第38页 |
4.2.2 MTT 法检测谷氨酸对 RGC-5 细胞存活率的影响 | 第38页 |
4.2.3 流式细胞仪检测谷氨酸对 RGC-5 细胞凋亡的影响 | 第38-39页 |
4.2.4 流式细胞仪检测谷氨酸对 RGC-5 细胞周期的影响 | 第39页 |
4.2.5 统计学处理 | 第39-40页 |
4.3 实验结果 | 第40-42页 |
4.3.1 MTT 法检测谷氨酸对 RGC-5 细胞存活率的影响 | 第40页 |
4.3.2 流式细胞仪检测谷氨酸对 RGC-5 细胞凋亡的影响 | 第40-41页 |
4.3.3 流式细胞仪检测谷氨酸对 RGC-5 细胞周期的影响 | 第41-42页 |
4.4 小结 | 第42-43页 |
第5章 CLC-2 的过表达对 RGC-5 细胞凋亡的影响 | 第43-55页 |
5.1 实验材料 | 第43-44页 |
5.1.1 主要试剂 | 第43-44页 |
5.1.2 主要仪器设备 | 第44页 |
5.1.3 实验分组 | 第44页 |
5.2 实验方法 | 第44-48页 |
5.2.1 cDNA 转染 | 第44-45页 |
5.2.2 RT-PCR 方法检测各组细胞 ClC-2 mRNA 的表达 | 第45页 |
5.2.3 Western blot 方法检测各组细胞 ClC-2 蛋白的表达 | 第45-47页 |
5.2.4 MTT 法检测各组细胞的存活率 | 第47页 |
5.2.5 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率 | 第47页 |
5.2.6 流式细胞仪检测各组细胞周期 | 第47页 |
5.2.7 统计学处理 | 第47-48页 |
5.3 实验结果 | 第48-53页 |
5.3.1 RT-PCR 方法检测各组细胞 ClC-2 mRNA 的表达 | 第48页 |
5.3.2 Western blot 方法检测各组细胞 ClC-2 蛋白的表达 | 第48-49页 |
5.3.3 MTT 法检测各组细胞的存活率 | 第49-50页 |
5.3.4 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率 | 第50-51页 |
5.3.5 流式细胞仪检测各组细胞周期 | 第51-53页 |
5.4 小结 | 第53-55页 |
第6章 抑制 CLC-2 的表达对 RGC-5 凋亡的影响 | 第55-63页 |
6.1 实验材料 | 第55-56页 |
6.1.1 主要试剂 | 第55-56页 |
6.1.2 主要仪器设备 | 第56页 |
6.1.3 实验分组 | 第56页 |
6.2 实验方法 | 第56-57页 |
6.2.1 RNAi 抑制 RGC-5 内 ClC-2 的表达 | 第56-57页 |
6.2.2 RT-PCR 方法检测各组细胞 ClC-2mRNA 的表达 | 第57页 |
6.2.3 Western blot 方法检测各组细胞 ClC-2 蛋白的表达 | 第57页 |
6.2.4 MTT 法检测各组细胞的存活率 | 第57页 |
6.2.5 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率 | 第57页 |
6.2.6 流式细胞仪检测各组细胞周期 | 第57页 |
6.2.7 统计学处理 | 第57页 |
6.3 实验结果 | 第57-62页 |
6.3.1 RT-PCR 方法检测各组细胞 ClC-2 mRNA 表达 | 第57-58页 |
6.3.2 Western blot 方法检测各组细胞 ClC-2 蛋白的表达 | 第58-59页 |
6.3.3 MTT 法检测各组细胞的存活率 | 第59-60页 |
6.3.4 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率 | 第60-61页 |
6.3.5 流式细胞仪检测各组细胞周期 | 第61-62页 |
6.4 小结 | 第62-63页 |
第7章 CLC-2 对谷氨酸诱导 RGC-5 细胞凋亡的分子机制研究 | 第63-71页 |
7.1 实验材料 | 第63-64页 |
7.1.1 主要试剂 | 第63-64页 |
7.1.2 主要仪器设备 | 第64页 |
7.1.3 实验分组 | 第64页 |
7.2 实验方法 | 第64-66页 |
7.2.1 Western blot 方法检测各组细胞 Bcl-2 蛋白的表达 | 第64页 |
7.2.2 Western blot 方法检测各组细胞 Bax 蛋白的表达 | 第64-65页 |
7.2.3 分光光度法检测各组细胞 caspase-3、caspase-9 酶活性 | 第65-66页 |
7.3 统计学处理 | 第66页 |
7.4 实验结果 | 第66-69页 |
7.4.1 Western blot 方法检测各组细胞 Bcl-2 蛋白的表达 | 第66-67页 |
7.4.2 Western blot 方法检测各组细胞 Bax 蛋白的表达 | 第67-68页 |
7.4.3 分光光度法检测各组细胞 caspase-3、caspase-9 酶活性 | 第68-69页 |
7.5 小结 | 第69-71页 |
第8章 讨论 | 第71-81页 |
第9章 结论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-97页 |
附录 | 第97-101页 |
作者简介及攻读学位期间发表的学术论文 | 第101-102页 |
致谢 | 第102页 |