论文目录 | |
中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-14页 |
英文缩略词 | 第14-15页 |
第1章 绪论 | 第15-41页 |
1.1 IFN 的分类 | 第15-16页 |
1.1.1 Ⅰ型 IFN | 第15-16页 |
1.1.2 Ⅱ型 IFN | 第16页 |
1.1.3 Ⅲ型 IFN | 第16页 |
1.2 IFN 的生物活性 | 第16-19页 |
1.2.1 抗病毒作用 | 第17-18页 |
1.2.2 抗增生作用 | 第18页 |
1.2.3 促进细胞凋亡 | 第18页 |
1.2.4 免疫调节作用 | 第18-19页 |
1.3 IFN 的抗肿瘤机制 | 第19-22页 |
1.3.1 抑制肿瘤细胞增殖 | 第19页 |
1.3.2 阻断肿瘤细胞周期 | 第19-20页 |
1.3.3 促进肿瘤细胞凋亡 | 第20-21页 |
1.3.4 抑制肿瘤血管生成 | 第21页 |
1.3.5 抑制肿瘤端粒酶活性 | 第21页 |
1.3.6 免疫调节作用 | 第21-22页 |
1.4 干扰素在肿瘤治疗中的应用及其研究进展 | 第22-30页 |
1.4.1 Ⅰ型干扰素在治疗肿瘤中的临床应用 | 第22-24页 |
1.4.2 Ⅰ型干扰素联合其他方案 | 第24-26页 |
1.4.3 INF-γ的表达机制 | 第26-27页 |
1.4.4 INF-γ在肿瘤治疗中的临床应用 | 第27-28页 |
1.4.5 INF-γ联合用药对肿瘤的作用 | 第28-29页 |
1.4.6 Ⅲ型干扰素抗肿瘤的研究 | 第29-30页 |
1.5 乳腺癌 | 第30-37页 |
1.5.1 手术治疗 | 第30-32页 |
1.5.2 内分泌治疗 | 第32-34页 |
1.5.3 靶向治疗 | 第34-36页 |
1.5.4 INF-γ在乳腺癌治疗中的应用 | 第36-37页 |
1.6 基因工程常用的表达系统 | 第37-41页 |
1.6.1 大肠杆菌 | 第37页 |
1.6.2 酿酒酵母 | 第37-38页 |
1.6.3 毕赤酵母 | 第38-41页 |
第2章 毕赤酵母表达的 rhIFN-γ的表达、纯化及鉴定 | 第41-63页 |
2.1 材料 | 第42-46页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第42-43页 |
2.1.2 主要试剂和配制 | 第43-46页 |
2.2 方法 | 第46-54页 |
2.2.1 hIFN-γ-pPICZ 表达工程菌的构建及高表达菌株的筛选 | 第46-51页 |
2.2.2 毕赤酵母分泌表达 rhIFN-γ条件的优化 | 第51-52页 |
2.2.3 利用 5 L 摇瓶发酵表达 rhIFN-γ | 第52页 |
2.2.4 rhIFN-γ的纯化 | 第52-54页 |
2.3 结果 | 第54-60页 |
2.3.1 pPICZ -hIFN-γ表达工程菌的构建及高表达菌株的筛选 | 第54-60页 |
2.4 讨论 | 第60-63页 |
第3章 rhIFN-γ的对人乳腺癌 MDA-MB-231 细胞的体外抑制作用研究 | 第63-85页 |
3.1 材料 | 第64-66页 |
3.1.1 实验试剂 | 第64-65页 |
3.1.2 实验仪器 | 第65-66页 |
3.2 方法 | 第66-73页 |
3.2.1 细胞培养 | 第66页 |
3.2.2 MTT 实验 | 第66-67页 |
3.2.3 凋亡指数检测 | 第67页 |
3.2.4 细胞凋亡率检测 | 第67-68页 |
3.2.5 细胞周期检测 | 第68页 |
3.2.6 全蛋白提取 | 第68-69页 |
3.2.7 采用 BCA 法测定各处理组的蛋白浓度 | 第69页 |
3.2.8 免疫印迹 | 第69-71页 |
3.2.9 蛋白质的电转移 | 第71页 |
3.2.10 条带显影与分析 | 第71-72页 |
3.2.11 ROS 荧光检测 | 第72页 |
3.2.12 统计学处理 | 第72-73页 |
3.3 结果 | 第73-79页 |
3.3.1 不同浓度 rhIFN-γ处理对乳腺癌细胞增殖的影响 | 第73-74页 |
3.3.2 不同浓度 rhIFN-γ处理对细胞凋亡指数的影响 | 第74-75页 |
3.3.3 不同浓度 rhIFN-γ处理对细胞凋亡率的影响 | 第75-76页 |
3.3.4 不同浓度 rhIFN-γ处理对细胞周期的影响 | 第76-77页 |
3.3.5 不同浓度 rhIFN-γ处理对细胞活性氧自由基水平的影响 | 第77页 |
3.3.6 不同浓度 rhIFN-γ处理对凋亡相关基因表达的影响 | 第77-78页 |
3.3.7 不同浓度 IFN-γ处理对 PI3K/Akt 信号通路的影响 | 第78-79页 |
3.4 讨论 | 第79-85页 |
第4章 rhIFN-γ的对人乳腺癌移植瘤模型的体内抑制作用研究 | 第85-105页 |
4.1 材料 | 第85-87页 |
4.1.1 实验动物 | 第85页 |
4.1.2 实验试剂 | 第85-86页 |
4.1.3 实验仪器 | 第86-87页 |
4.2 方法 | 第87-95页 |
4.2.1 乳腺癌皮下移植瘤模型的建立 | 第87-88页 |
4.2.2 动物分组及给药方法 | 第88页 |
4.2.3 观察指标 | 第88页 |
4.2.4 抑瘤效果评价 | 第88页 |
4.2.5 ELISA 法 | 第88-89页 |
4.2.6 免疫组化 | 第89-91页 |
4.2.7 肿瘤组织中全蛋白提取 | 第91-92页 |
4.2.8 免疫印迹 | 第92-93页 |
4.2.9 蛋白质的电转移 | 第93-94页 |
4.2.10 条带显影与分析 | 第94页 |
4.2.11 统计学处理 | 第94-95页 |
4.3 结果 | 第95-100页 |
4.3.1 不同浓度 rhIFN-γ处理对肿瘤体积的影响 | 第95-97页 |
4.3.2 不同浓度 rhIFN-γ处理对肿瘤 MMP-2 表达的影响 | 第97页 |
4.3.3 不同浓度 rhIFN-γ处理对肿瘤 MMP-9 表达的影响 | 第97-98页 |
4.3.4 不同浓度 rhIFN-γ处理对 VEGF 水平的影响 | 第98-99页 |
4.3.5 不同浓度 rhIFN-γ处理对肿瘤 PI3K/Akt 信号通路的影响 | 第99-100页 |
4.4 讨论 | 第100-105页 |
第5章 研究总结 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-119页 |
致谢 | 第119页 |