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促胚胎干细胞生长的中草药提取物高通量筛选方法的构建及初步应用研究

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促胚胎干细胞生长的中草药提取物高通量筛选方法的构建及初步应用研究
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-9页
主要英文缩略词表第9-15页
第一章 绪论第15-36页
  1.1 ESC 体外大规模扩增与 TCHM 的潜在作用第15-17页
    1.1.1 细胞治疗对 ESC 的需求第16页
    1.1.2 TCHM 对促进细胞生长的潜在作用第16-17页
  1.2 体外 ESC 的培养体系第17-19页
    1.2.1 饲养层细胞培养体系第17-18页
    1.2.2 条件培养基无饲养层体系第18页
    1.2.3 确定成分培养基体系第18-19页
  1.3 体外 ESC 的培养方式第19-21页
    1.3.1 ECM 涂层第19-20页
    1.3.2 微载体培养第20页
    1.3.3 悬浮培养第20-21页
  1.4 支架材料与生物反应器第21-25页
    1.4.1 支架材料的选择第21-23页
    1.4.2 生物反应器大规模培养第23-24页
    1.4.3 剪切力对反应器中细胞的影响第24-25页
  1.5 新的 ESC 生长促进因子第25-26页
    1.5.1 药物筛选方法的选择第25-26页
    1.5.2 TCHM 的特点第26页
  1.6 CBDS 方法第26-31页
    1.6.1 CBDS 的特点第26-27页
    1.6.2 实现 HTS 的常用 CBDS 方法第27页
    1.6.3 电化学检测法第27-28页
    1.6.4 光学检测法第28-31页
  1.7 TCHM 和药用天然产物筛选方法第31-33页
    1.7.1 TCHM 筛选模型第31页
    1.7.2 整体动物模型用于 TCHM 筛选第31-32页
    1.7.3 分子水平高通量 TCHM 筛选第32页
    1.7.4 细胞水平高通量 TCHM 筛选第32-33页
  1.8 以 GFP 为基础的细胞水平 HTS 在 TCHM 评估中的应用第33-34页
  1.9 本研究的意义及技术路线第34-36页
第二章 用于 TCHM 筛选的 CBDS 平台建立第36-51页
  2.1 实验材料第36-38页
    2.1.1 细胞系与材料第36-37页
    2.1.2 药品与试剂第37页
    2.1.3 仪器与设备第37-38页
    2.1.4 候选 TCHM第38页
  2.2 实验方法第38-42页
    2.2.1 TCHM 提取物制备第38页
    2.2.2 GFP 细胞系建立与细胞培养第38-40页
    2.2.3 3D 荧光 HTS 体系第40页
    2.2.4 扫描电镜观察材料中细胞形态第40-41页
    2.2.5 数据分析方法第41-42页
  2.3 结果与讨论第42-50页
    2.3.1 CBDS 方法检测 DCA 对细胞生长的影响第42-44页
    2.3.2 Gls 对细胞生长的作用第44-45页
    2.3.3 Gb 对细胞生长的作用第45-46页
    2.3.4 Eb 对细胞生长的作用第46-48页
    2.3.5 CBDS 方法的筛选结果与优势分析第48-49页
    2.3.6 CDBS 平台可靠性分析第49-50页
  2.4 本章小结第50-51页
第三章 GLS 对细胞生长的影响第51-62页
  3.1 实验材料第51-52页
    3.1.1 细胞系第51页
    3.1.2 药品与试剂第51-52页
    3.1.3 仪器与设备第52页
  3.2 实验方法第52-54页
    3.2.1 细胞 2D 环境下生长检测第52-53页
    3.2.2 3D 静态和动态 mESC 扩增第53页
    3.2.3 Gls 有效成分提取第53页
    3.2.4 数据分析第53-54页
    3.2.5 细胞周期检测第54页
    3.2.6 FACS 对 mESC 表面标记检测第54页
  3.3 结果与讨论第54-60页
    3.3.1 Gls 对 2D 培养细胞的影响第54-56页
    3.3.2 Gls 在 mESC 扩增中的作用第56-57页
    3.3.3 PSS 和 TTS 对 mESC 的影响第57-59页
    3.3.4 Gls 对细胞周期的影响第59-60页
  3.4 本章小结第60-62页
第四章 CBDS 平台筛选促 MESC 增殖的 TCHM第62-81页
  4.1 实验材料第62-63页
    4.1.1 细胞系第62页
    4.1.2 药品与试剂第62-63页
    4.1.3 仪器与设备第63页
  4.2 实验方法第63-66页
    4.2.1 TCHM 提取物制备第63-64页
    4.2.2 细胞培养方法第64页
    4.2.3 3D 培养筛选 TCHM第64页
    4.2.4 旋转瓶扩增培养第64-65页
    4.2.5 FACS 对 mESC 表面标记检测第65页
    4.2.6 检测与分析方法第65-66页
  4.3 结果与讨论第66-79页
    4.3.1 3D 荧光 CBDS 体系对 TCHM 筛选结果第66-71页
    4.3.2 组合 TCHM 对 mESC 生长的影响第71-77页
    4.3.3 Pn/Gls 对 mESC 细胞 3D 培养的影响第77-79页
  4.4 本章小结第79-81页
第五章 TCHM 组合 PN/GLS 对 MESC 生长的影响第81-95页
  5.1 实验材料第81-82页
    5.1.1 细胞系第81页
    5.1.2 药品与试剂第81-82页
    5.1.3 仪器与设备第82页
  5.2 实验方法第82-84页
    5.2.1 旋转瓶扩增 mESC第82-83页
    5.2.2 细胞核型分析第83页
    5.2.3 免疫荧光染色第83页
    5.2.4 细胞周期检测第83-84页
    5.2.5 快速 MTT 法检测细胞增殖第84页
    5.2.6 HPLC 检测活性成分第84页
  5.3 结果与讨论第84-93页
    5.3.1 旋转瓶中 mESC 扩增第84-86页
    5.3.2 药物 Pn/Gls 对 mESC 的影响第86-88页
    5.3.3 血清饥饿胁迫下 Pn/Gls 对 mESC 抗凋亡的影响第88-91页
    5.3.4 人参皂苷 Rg1 对 mESC 增殖的影响第91-93页
  5.4 本章小结第93-95页
第六章 结论与展望第95-97页
  6.1 结论第95-96页
  6.2 展望第96-97页
参考文献第97-111页
附录第111-112页
攻读博士学位期间取得的研究成果第112-113页
致谢第113-114页
附件第114页

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