论文目录 | |
中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
缩略语/符号说明 | 第11-12页 |
前言 | 第12-16页 |
研究现状、成果 | 第12-14页 |
研究目的、方法 | 第14-16页 |
一、常染色体隐性遗传性多囊肾小鼠模型的鉴定 | 第16-26页 |
1.1 对象和方法 | 第18-22页 |
1.1.1 实验材料 | 第18-19页 |
1.1.2 主要试剂 | 第19-22页 |
1.2 结果 | 第22-24页 |
1.2.1 野生型小鼠PCR结果测序 | 第22页 |
1.2.2 常染色体隐性遗传性多囊肾小鼠模型的鉴定 | 第22-24页 |
1.3 讨论 | 第24-26页 |
二、pFlag-CMV-TMEM67载体的构建 | 第26-56页 |
2.1 对象和方法 | 第26-36页 |
2.1.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.2 实验仪器 | 第27页 |
2.1.3 实验试剂及配制 | 第27-28页 |
2.1.4 实验方法和步骤 | 第28-36页 |
2.2 结果 | 第36-54页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第36页 |
2.2.2 PCR cDNA第一条链的合成 | 第36页 |
2.2.3 TMEM67全长的cDNA的克隆 | 第36页 |
2.2.4 PCR纯化试剂盒纯化cDNA的PCR产物 | 第36页 |
2.2.5 酶切cDNA得到TMEM67全长DNA片段 | 第36-37页 |
2.2.6 酶切质粒PFlag-CMV-ErbB4,得到空载体 | 第37页 |
2.2.7 将TMEM67FL连接到空载体pFlag-CMV | 第37页 |
2.2.8 将TMEM67FL-pFlag-CMV转化至感受态细胞中 | 第37页 |
2.2.9 挑40个单菌落 | 第37页 |
2.2.10 酶切40管质粒 | 第37-38页 |
2.2.11 选取其中4个质粒做转化 | 第38页 |
2.2.12 挑单菌落 | 第38页 |
2.2.13 粗提质粒 | 第38-39页 |
2.2.14 双酶切并测序 | 第39-54页 |
2.3 讨论 | 第54-56页 |
三、TMEM67蛋白在信号通路中研究 | 第56-80页 |
3.1 对象和方法 | 第56-66页 |
3.1.1 细胞系 | 第56页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第56-57页 |
3.1.3 实验试剂及配制 | 第57-60页 |
3.1.4 实验方法和步骤 | 第60-66页 |
3.2 实验结果 | 第66-73页 |
3.3 讨论 | 第73-80页 |
四、组织芯片筛查常染色体隐性多囊肾的差异基因 | 第80-106页 |
4.1 对象和方法 | 第80-87页 |
4.1.1 组织来源 | 第80页 |
4.1.2 实验仪器 | 第80-81页 |
4.1.3 实验试剂 | 第81-82页 |
4.1.4 实验耗材 | 第82页 |
4.1.5 实验方法和步骤 | 第82-86页 |
4.1.6 Real time PCR检测Affymetrix 430 2.0数据的准确性 | 第86-87页 |
4.2 实验结果 | 第87-102页 |
4.3 讨论 | 第102-106页 |
全文结论 | 第106-108页 |
论文创新点 | 第108-109页 |
参考文献 | 第109-117页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第117-118页 |
综述 多囊肾病的研究进展 | 第118-132页 |
综述参考文献 | 第126-132页 |
致谢 | 第132页 |