论文目录 | |
| 本论文的创新点 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-41页 |
| 第一节 植物种子的形成及特点 | 第16-19页 |
| 1.1.1 被子植物的结构及特点 | 第16页 |
| 1.1.2 水稻种子的结构及特点 | 第16-17页 |
| 1.1.3 胚乳细胞的发育特点 | 第17-18页 |
| 1.1.4 水稻胚乳结构及储藏蛋白介绍 | 第18-19页 |
| 第二节 植物生物反应器的优点及发展现状 | 第19-22页 |
| 1.2.1 植物生物反应器研究进展 | 第19-20页 |
| 1.2.2 谷类作物种子生物反应器的优点 | 第20-21页 |
| 1.2.3 水稻胚乳表达重组蛋白的研究现状 | 第21-22页 |
| 第三节 抗胰蛋白酶的性质功能及相关疾病 | 第22-23页 |
| 1.3.1 抗胰蛋白酶的性质和功能 | 第22页 |
| 1.3.2 抗胰蛋白酶缺乏相关的疾病 | 第22-23页 |
| 第四节 重组胰蛋白酶的研究现状 | 第23-30页 |
| 1.4.1 大肠杆菌表达重组抗胰蛋白酶 | 第24页 |
| 1.4.2 酵母表达重组抗胰蛋白酶 | 第24-25页 |
| 1.4.3 丝状真菌表达重组抗胰蛋白酶 | 第25页 |
| 1.4.4 昆虫细胞表达重组抗胰蛋白酶 | 第25-26页 |
| 1.4.5 转基因植物表达重组抗胰蛋白酶 | 第26-27页 |
| 1.4.6 哺乳动物细胞表达重组抗胰蛋白酶 | 第27-28页 |
| 1.4.7 转基因动物表达重组抗胰蛋白酶 | 第28-30页 |
| 第五节 内质网胁迫信号调节通路 | 第30-32页 |
| 第六节 细胞凋亡的基因调控机制 | 第32-33页 |
| 第七节 细胞程序性死亡在植物中的研究现状 | 第33-37页 |
| 1.7.1 大孢子细胞程序死亡 | 第33-34页 |
| 1.7.2 珠心细胞程序死亡 | 第34页 |
| 1.7.3 在胚囊成熟时反足细胞程序性死亡 | 第34-35页 |
| 1.7.4 绒毡层细胞的程序性死亡 | 第35页 |
| 1.7.5 花粉-雌蕊相互作用不兼容的花粉细胞程序性死亡 | 第35页 |
| 1.7.6 受精和种子发育过程中的细胞程序性死亡 | 第35-37页 |
| 第八节 N-连接的糖苷化修饰 | 第37-41页 |
| 1.8.1 植物中糖苷修饰的类型 | 第37-39页 |
| 1.8.2 植物N-连接糖苷修饰结构和动物的差别 | 第39-41页 |
| 第二章 水稻胚乳中表达的重组抗胰蛋白酶的研究 | 第41-62页 |
| 第一节 前言 | 第41页 |
| 第二节 实验材料和方法 | 第41-45页 |
| 2.2.1 质粒的构建和水稻的转化 | 第41-42页 |
| 2.2.2 Southern杂交 | 第42页 |
| 2.2.3 Western杂交 | 第42页 |
| 2.2.4 抗胰蛋白酶的活性检测 | 第42-43页 |
| 2.2.5 免疫电镜 | 第43页 |
| 2.2.6 圆二色光谱学分析 | 第43-44页 |
| 2.2.7 重组抗胰蛋白酶的提取 | 第44页 |
| 2.2.8 重组抗胰蛋白酶的分离与纯化 | 第44页 |
| 2.2.9 糖苷结构分析 | 第44页 |
| 2.2.10 分子量和等电点 | 第44页 |
| 2.2.11 重组抗胰蛋白酶的药代动力学实验 | 第44-45页 |
| 第三节 实验结果 | 第45-59页 |
| 2.3.1 转化并筛选重组抗胰蛋白酶表达量高的转基因植株 | 第45-47页 |
| 2.3.2 重组抗胰蛋白酶的基本生化和物理性质的分析 | 第47-49页 |
| 2.3.3 重组抗胰蛋白酶的糖苷修饰结构分析 | 第49-53页 |
| 2.3.4 重组抗胰蛋白酶生物活性检测 | 第53-54页 |
| 2.3.5 重组抗胰蛋白酶在水稻胚乳中的亚细胞定位 | 第54-56页 |
| 2.3.6 从水稻种子中试生产重组抗胰蛋白酶 | 第56-59页 |
| 第四节 讨论和结论 | 第59-62页 |
| 第三章 在水稻种子高表达重组抗胰蛋白酶对胚乳发育的影响 | 第62-78页 |
| 第一节 前言 | 第62页 |
| 第二节 实验材料和方法 | 第62-65页 |
| 3.2.1 材料准备和转基因品系的表型分析 | 第62-63页 |
| 3.2.2 总RNA的提取与cDNA合成 | 第63页 |
| 3.2.3 实时定量PCR | 第63-64页 |
| 3.2.4 Western blotting | 第64页 |
| 3.2.5 PCR分析 | 第64-65页 |
| 2.2.6 组织固定,脱水,包埋和切片 | 第65页 |
| 3.2.7 TUNEL试验 | 第65页 |
| 3.2.8 图像观察和处理 | 第65页 |
| 第三节 实验结果 | 第65-75页 |
| 3.3.1 在水稻胚乳中高表达重组抗胰蛋白酶导致种子表型发生改变 | 第65-67页 |
| 3.3.2 重组抗胰蛋白酶在水稻胚乳中的积累对储藏蛋白的影响 | 第67-69页 |
| 3.3.3 在水稻胚乳中积累重组抗胰蛋白酶产生了内质网胁迫 | 第69-71页 |
| 3.3.4 高表达重组抗胰蛋白酶扰乱水稻胚乳的发育 | 第71-73页 |
| 3.3.5 内质网胁迫导致水稻胚乳细胞提前程序性死亡 | 第73-75页 |
| 第四节 小结和讨论 | 第75-78页 |
| 第四章 内质网胁迫对重组抗胰蛋白酶和谷蛋白糖苷修饰的影响 | 第78-88页 |
| 第一节 前言 | 第78-79页 |
| 第二节 实验材料和方法 | 第79-80页 |
| 4.2.1 供试材料：品种与品系 | 第79页 |
| 4.2.2 重组抗胰蛋白酶的纯化 | 第79页 |
| 4.2.3 糖苷分析方法 | 第79页 |
| 4.2.4 谷蛋白的提取方法 | 第79-80页 |
| 4.2.5 分析有糖苷修饰的重组抗胰蛋白酶所占比例 | 第80页 |
| 第三节 实验结果 | 第80-86页 |
| 4.3.1 严重的内质网胁迫减少重组抗胰蛋白酶N端序列的加工 | 第80-81页 |
| 4.3.2 内质网胁迫对于重组抗胰蛋白酶糖苷修饰的影响 | 第81-84页 |
| 4.3.3 内质网胁迫对于内源的谷蛋白糖苷化修饰影响 | 第84-86页 |
| 第四节 小结和讨论 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-101页 |
| 在读期间发表的论文 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
