论文目录 | |
| 博士生自认为的论文创新点 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-41页 |
| 1.1 褐飞虱及其危害 | 第16-17页 |
| 1.2 植物的免疫系统 | 第17-20页 |
| 1.3 植物与昆虫互作研究进展 | 第20-24页 |
| 1.3.1 植物对昆虫的组成型防御 | 第20-21页 |
| 1.3.2 植物对昆虫的诱导型防御 | 第21-24页 |
| 1.4 水稻抗褐飞虱机理研究进展 | 第24-26页 |
| 1.5 植物启动子定义和结构 | 第26-27页 |
| 1.6 植物启动子的分类及应用 | 第27-30页 |
| 1.6.1 组成型表达启动子 | 第27页 |
| 1.6.2 组织特异型表达启动子 | 第27-29页 |
| 1.6.3 诱导型表达启动子 | 第29-30页 |
| 1.7 水稻启动子分析主要数据库 | 第30-31页 |
| 1.7.1 NEWPLACE | 第30页 |
| 1.7.2 PlantCare | 第30页 |
| 1.7.3 EPD | 第30页 |
| 1.7.4 Softberry | 第30-31页 |
| 1.7.5 KOME | 第31页 |
| 1.8 OsCEBiP基因生物学功能研究进展 | 第31-38页 |
| 1.8.1 OsCEBiP基因结构特征 | 第31-32页 |
| 1.8.2 OsCEBiP的同源基因研究 | 第32-34页 |
| 1.8.3 OsCEBiP基因介导的信号通路研究 | 第34-37页 |
| 1.8.4 效应子能抑制几丁质触发的免疫反应 | 第37-38页 |
| 1.9 水稻OsSerpin研究进展 | 第38-40页 |
| 1.10 本研究的目的与意义 | 第40-41页 |
| 第二章 水稻OsCEBiP基因启动子的克隆及其功能分析 | 第41-69页 |
| 引言 | 第41页 |
| 2.1 材料与方法 | 第41-55页 |
| 2.1.1 材料 | 第41-42页 |
| 2.1.2 设计引物扩增不同长度启动子片段 | 第42-43页 |
| 2.1.3 PCR扩增、酶切、连接和转化 | 第43-44页 |
| 2.1.4 质粒提取、阳性克隆的鉴定和测序 | 第44-45页 |
| 2.1.5 农杆菌介导法对粳稻品种H1493的转化 | 第45-48页 |
| 2.1.6 转基因植株的PCR鉴定 | 第48页 |
| 2.1.7 转基因植株的Southern blot鉴定 | 第48-52页 |
| 2.1.8 Western Blot杂交 | 第52-54页 |
| 2.1.9 Gus染色及石蜡切片 | 第54-55页 |
| 2.2 结果与分析 | 第55-66页 |
| 2.2.1 启动子生物信息学分析 | 第55-58页 |
| 2.2.2 启动子的克隆和载体构建 | 第58-59页 |
| 2.2.3 各启动子转基因植株的获得 | 第59-61页 |
| 2.2.4 Southern blot检测 | 第61页 |
| 2.2.5 各启动子转基因材料的GUS染色分析 | 第61-63页 |
| 2.2.6 各启动子转基因材料的石蜡切片分析 | 第63-65页 |
| 2.2.7 各启动子表达量的WB分析 | 第65-66页 |
| 2.2.8 OsCEBiP基因的组织表达模式 | 第66页 |
| 2.3 讨论 | 第66-69页 |
| 第三章 水稻OsCEBiP突变体的鉴定、表达分析及转基因 | 第69-91页 |
| 引言 | 第69-71页 |
| 3.1 材料和方法 | 第71-82页 |
| 3.1.1 材料 | 第71页 |
| 3.1.2 突变体插入位点和纯杂合的鉴定 | 第71页 |
| 3.1.3 Genome walker鉴定突变体插入位点 | 第71-73页 |
| 3.1.4 RACE扩增 | 第73-77页 |
| 3.1.5 植物总RNA的抽提 | 第77-78页 |
| 3.1.6 反转录即cDNA第一链的合成 | 第78-79页 |
| 3.1.7 半定量RT-PCR | 第79页 |
| 3.1.8 实时荧光定量PCR(qPCR) | 第79-80页 |
| 3.1.9 重叠PCR构建RNAi转基因载体 | 第80-81页 |
| 3.1.10 农杆菌介导法对粳稻品种H1493的转化 | 第81-82页 |
| 3.2 结果与分析 | 第82-89页 |
| 3.2.1 突变体插入位点PCR检测 | 第82-84页 |
| 3.2.2 突变体Southern blot检测 | 第84-85页 |
| 3.2.3 oscebip-1突变体基因组序列和cDNA序列的获得 | 第85-86页 |
| 3.2.4 突变体植株中OsCEBiP基因的表达分析 | 第86-87页 |
| 3.2.5 OsCEBiP转基因研究 | 第87-88页 |
| 3.2.6 OsCEBiP转基因株系的表达分析 | 第88-89页 |
| 3.3 讨论 | 第89-91页 |
| 第四章 OsCEBiP抗褐飞虱的生物学功能研究 | 第91-119页 |
| 引言 | 第91页 |
| 4.1 材料与方法 | 第91-100页 |
| 4.1.1 材料 | 第91-92页 |
| 4.1.2 褐飞虱蜜露量和增重的测定 | 第92-93页 |
| 4.1.3 褐飞虱宿主选择性实验 | 第93页 |
| 4.1.4 白叶枯病原菌接种及抗性检测 | 第93-94页 |
| 4.1.5 愈伤组织的ROS测定 | 第94页 |
| 4.1.6 胼胝质染色 | 第94-95页 |
| 4.1.7 水稻原生质体分离与处理 | 第95页 |
| 4.1.8 基因表达分析 | 第95-96页 |
| 4.1.9 酵母双杂交实验 | 第96-100页 |
| 4.2 结果与分析 | 第100-117页 |
| 4.2.1 OsCEBiP基因对褐飞虱取食作出了响应 | 第100-101页 |
| 4.2.2 OsCEBiP基因的抗病性研究 | 第101-103页 |
| 4.2.3 OsCEBiP基因的抗虫性研究 | 第103-104页 |
| 4.2.4 OsCEBiP基因对褐飞虱取食的抗性应答 | 第104-106页 |
| 4.2.5 褐飞虱虫体沉淀诱导了胼胝质沉积 | 第106-107页 |
| 4.2.6 褐飞虱虫体沉淀诱导了愈伤细胞ROS爆发 | 第107-108页 |
| 4.2.7 褐飞虱提取物沉淀诱导了水稻细胞的防御基因的表达 | 第108-113页 |
| 4.2.8 褐飞虱虫体不同组分诱导水稻不同的应答反应 | 第113-114页 |
| 4.2.9 酵母双杂交筛选褐飞虱互作蛋白 | 第114-115页 |
| 4.2.10 候选酵母互作克隆的初步分析 | 第115-117页 |
| 4.3 讨论 | 第117-119页 |
| 第五章 水稻OsSerpin基因的生物学功能研究 | 第119-137页 |
| 引言 | 第119页 |
| 5.1 材料与方法 | 第119-122页 |
| 5.1.1 材料 | 第119页 |
| 5.1.2 载体构建,农杆菌介导法对水稻遗传转化 | 第119-120页 |
| 5.1.3 原核表达载体构建及蛋白诱导 | 第120-121页 |
| 5.1.4 谷胱甘肽硫转移酶标签GST包涵体的溶解和复性 | 第121页 |
| 5.1.5 GST标签蛋白的亲和纯化 | 第121-122页 |
| 5.2 结果与分析 | 第122-135页 |
| 5.2.1 OsSerpin基因生物信息学分析 | 第122-125页 |
| 5.2.2 OsSerpin基因启动子生物信息学分析 | 第125-128页 |
| 5.2.3 OsSerpin基因和启动子的克隆 | 第128-129页 |
| 5.2.4 OsSerpin及截短启动子转基因植株的获得 | 第129-130页 |
| 5.2.5 转基因植株的Southern blot检测 | 第130页 |
| 5.2.6 各启动子材料GUS染色分析 | 第130-131页 |
| 5.2.7 OsSerpin基因组织表达模式 | 第131-132页 |
| 5.2.8 OsSerpin基因对褐飞虱取食作出了响应 | 第132页 |
| 5.2.9 OsSerpin转基因纯合株系的表达分析 | 第132-133页 |
| 5.2.10 OsSerpin介导了对褐飞虱的抗性 | 第133-134页 |
| 5.2.11 OsSerpin蛋白的诱导表达 | 第134-135页 |
| 5.3 讨论 | 第135-137页 |
| 第六章 总讨论 | 第137-140页 |
| 6.1 韧皮部特异表达的OsCEBiP识别褐飞虱虫体沉淀激活了水稻免疫反应 | 第137-139页 |
| 6.2 水稻OsSerpin基因参与对褐飞虱的防御反应 | 第139-140页 |
| 参考文献 | 第140-150页 |
| 博士在读期间发表的学术论文 | 第150-151页 |
| 致谢 | 第151页 |
