论文目录 | |
| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-17页 |
| 符号及缩略语的中英文对照 | 第17-18页 |
| 第一章 鱼类摄食调节因子研究进展 | 第18-38页 |
| 1 食欲刺激因子 | 第18-26页 |
| 1.1 下丘脑神经肽 | 第18-24页 |
| 1.1.1 Neuropeptide Y family | 第18-20页 |
| 1.1.2 MCH | 第20-21页 |
| 1.1.3 Galanin | 第21-22页 |
| 1.1.4 Orexin | 第22-23页 |
| 1.1.5 Agouti-related protein | 第23-24页 |
| 1.2 Somatotropic axis and GH | 第24-25页 |
| 1.3 Ghrelin | 第25-26页 |
| 2 食欲抑制因子 | 第26-36页 |
| 2.1 Leptin | 第26-29页 |
| 2.2 CCK/gastrin | 第29-30页 |
| 2.3 Bombesin/GRP | 第30-31页 |
| 2.4 GLP-1/glucagon | 第31页 |
| 2.5 下丘脑神经肽 | 第31-36页 |
| 2.5.1 Melanocortin system | 第31-33页 |
| 2.5.2 CART | 第33-34页 |
| 2.5.3 Tachykinins/substance P | 第34页 |
| 2.5.4 CRF-related peptides and cortisol | 第34-36页 |
| 3 结论 | 第36-37页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第37-38页 |
| 第二章 建鲤最适管家基因的研究 | 第38-55页 |
| 1 材料与方法 | 第38-47页 |
| 1.1 材料 | 第38-40页 |
| 1.1.1 实验鱼 | 第38页 |
| 1.1.2 试剂与仪器 | 第38-39页 |
| 1.1.3 引物设计与合成 | 第39-40页 |
| 1.2 方法 | 第40-47页 |
| 1.2.1 建鲤血液DNA的提取及其浓度和质量的测定 | 第40-41页 |
| 1.2.2 建鲤组织总RNA的提取 | 第41页 |
| 1.2.3 建鲤组织总RNA的反转录 | 第41-42页 |
| 1.2.4 建鲤管家基因的扩增 | 第42页 |
| 1.2.5 建鲤管家基因的克隆 | 第42-45页 |
| 1.2.6 Real time PCR | 第45-47页 |
| 1.2.7 数据处理 | 第47页 |
| 2 结果 | 第47-54页 |
| 2.1 建鲤管家基因的克隆 | 第47-51页 |
| 2.2 引物特异性分析 | 第51页 |
| 2.3 管家基因在建鲤幼鱼和成鱼中的表达量 | 第51-52页 |
| 2.4 管家基因在建鲤幼鱼和成鱼中的表达稳定性 | 第52-53页 |
| 2.5 管家基因在建鲤不同发育期的表达稳定性 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 第三章 建鲤leptins基因的克隆与时空表达 | 第55-68页 |
| 1 材料与方法 | 第55-58页 |
| 1.1 材料 | 第55-56页 |
| 1.1.1 实验鱼 | 第55-56页 |
| 1.1.2 引物设计与合成 | 第56页 |
| 1.2 方法 | 第56-58页 |
| 1.2.1 建鲤leptins基因扩增 | 第56-57页 |
| 1.2.2 测序和序列分析 | 第57页 |
| 1.2.3 聚类分析 | 第57页 |
| 1.2.4 组织表达分析 | 第57页 |
| 1.2.5 数据处理 | 第57-58页 |
| 2 结果 | 第58-66页 |
| 2.1 建鲤leptins基因的分离 | 第58页 |
| 2.2 建鲤leptins序列拼接与分析 | 第58-63页 |
| 2.3 聚类分析 | 第63-64页 |
| 2.4 建鲤leptins的组织表达 | 第64-66页 |
| 2.4.1 建鲤leptins在幼鱼中的组织表达 | 第64-65页 |
| 2.4.2 建鲤leptins在成鱼中的组织表达 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| 第四章 建鲤NPYs基因的克隆与时空表达 | 第68-79页 |
| 1 材料与方法 | 第68-70页 |
| 1.1 材料 | 第68-69页 |
| 1.1.1 实验鱼 | 第68页 |
| 1.1.2 引物设计与合成 | 第68-69页 |
| 1.2 方法 | 第69-70页 |
| 1.2.1 建鲤NPYs基因扩增 | 第69页 |
| 1.2.2 测序和序列分析 | 第69页 |
| 1.2.3 聚类分析 | 第69页 |
| 1.2.4 组织表达分析 | 第69-70页 |
| 1.2.5 数据处理 | 第70页 |
| 2 结果 | 第70-77页 |
| 2.1 建鲤NPYs基因的分离 | 第70页 |
| 2.2 建鲤NPYs序列拼接与分析 | 第70-74页 |
| 2.3 聚类分析 | 第74页 |
| 2.4 建鲤NPYs的组织表达 | 第74-77页 |
| 2.4.1 建鲤NPYs在幼鱼中的组织表达 | 第75页 |
| 2.4.2 建鲤NPYs在成鱼中的组织表达 | 第75-77页 |
| 3 讨论 | 第77-79页 |
| 第五章 禁食对建鲤leptins和NPYs表达的影响 | 第79-87页 |
| 1 材料与方法 | 第79-80页 |
| 1.1 材料 | 第79-80页 |
| 1.1.1 实验鱼 | 第79页 |
| 1.1.2 引物设计与合成 | 第79-80页 |
| 1.2 方法 | 第80页 |
| 1.2.1 组织表达分析 | 第80页 |
| 1.2.2 数据处理 | 第80页 |
| 2 结果 | 第80-85页 |
| 2.1 禁食对建鲤leptins的组织表达的影响 | 第80-83页 |
| 2.1.1 禁食对jlLEP-A1的组织表达的影响 | 第80-81页 |
| 2.1.2 禁食对jlLEP-A2的组织表达的影响 | 第81-82页 |
| 2.1.3 禁食对jlLEP-B的组织表达的影响 | 第82-83页 |
| 2.2 禁食对建鲤NPYs的组织表达的影响 | 第83-85页 |
| 2.2.1 禁食对jlNPYa的组织表达的影响 | 第83-84页 |
| 2.2.2 禁食对jlNPYb的组织表达的影响 | 第84-85页 |
| 3 讨论 | 第85-87页 |
| 第六章 建鲤leptins的原核表达 | 第87-96页 |
| 1 材料与方法 | 第87-90页 |
| 1.1 材料 | 第87页 |
| 1.1.1 载体和菌株 | 第87页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第87页 |
| 1.2 方法 | 第87-90页 |
| 1.2.1 信号肽序列的预测 | 第87页 |
| 1.2.2 E.coli BL21 (DE3)感受态细胞的制备 | 第87-88页 |
| 1.2.3 建鲤leptins基因编码区的扩增 | 第88-89页 |
| 1.2.4 重组质粒的构建及鉴定 | 第89-90页 |
| 1.2.5 重组质粒pET-32a(+)/leptins和pGex-4T-1/leptins的原核表达及鉴定 | 第90页 |
| 1.2.6 工程菌的诱导表达及表达条件优化 | 第90页 |
| 2 结果 | 第90-95页 |
| 2.1 建鲤leptins氨基酸的信号肽分析 | 第90-91页 |
| 2.2 建鲤leptins基因编码区(不含信号肽)的扩增 | 第91页 |
| 2.3 重组质粒pET-32a(+)/leptins和pGex-4T-1/leptins的构建及鉴定 | 第91-92页 |
| 2.4 重组质粒pET-32a(+)/leptins和pGex-4T-1/leptins的原核表达 | 第92-94页 |
| 2.5 pGex-4T-1/leptins融合蛋白的纯化 | 第94-95页 |
| 3 讨论 | 第95-96页 |
| 第七章 建鲤leptins的SNPs和生长的相关性分析 | 第96-102页 |
| 1 材料与方法 | 第96-98页 |
| 1.1 材料 | 第96-97页 |
| 1.1.1 实验鱼 | 第97页 |
| 1.1.2 试剂与仪器 | 第97页 |
| 1.1.3 引物设计与合成 | 第97页 |
| 1.2 方法 | 第97-98页 |
| 1.2.1 SNPs多态位点的查找和检测 | 第97页 |
| 1.2.2 统计分析 | 第97-98页 |
| 2 结果 | 第98-101页 |
| 2.1 SNPs位点检测 | 第98-99页 |
| 2.2 SNPs基因型与建鲤生长的相关性分析 | 第99-101页 |
| 3 讨论 | 第101-102页 |
| 全文结论 | 第102-104页 |
| 创新点 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-128页 |
| 附录一: 实验试剂及配置 | 第128-132页 |
| 附录二: 载体图谱及序列 | 第132-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第135-136页 |
| 主持和参与的科研项目 | 第136页 |
