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布氏艾美耳球虫微线体蛋白-2和顶膜抗原-1免疫原性分析

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布氏艾美耳球虫微线体蛋白-2和顶膜抗原-1免疫原性分析
论文目录
 
摘要第11-16页
Abstract第16-19页
Part Ⅰ:Review of Literature第19-59页
Chapter 1 Chicken Coccidiosis and Immune Response to Eimeria第19-45页
    1.1. Introduction第19-20页
    1.2. Economic importance第20页
    1.3. The life cycle of an Eimeria parasite第20-21页
    1.4. Diagnosis第21-22页
      1.4.1. Clinical findings第21-22页
      1.4.2. Gross lesions第22页
      1.4.3. Sites parasitized by different Eimeria species in the chicken第22页
    1.5. Factors that influence the course and severity of coccidial infection第22-24页
      1.5.1. Species第22-23页
      1.5.2. Extent of contamination第23页
      1.5.3. Stocking density of hosts第23页
      1.5.4. Extent of dampness of immediate environment第23页
      1.5.5. Immune status of the host第23页
      1.5.6. Secondary infections with other pathogens第23页
      1.5.7. Presence of effective anticoccidial drugs第23-24页
    1.6. Chicken coccidial organelles antigen-related functions第24-27页
    1.7. Immune response to coccidiosis第27-34页
      1.7.1. Immunogenicity of Eimeria第27-28页
      1.7.2. Immune response mechanisms in avian coccidiosis第28-34页
    1.8. Objectives of the study第34-35页
References第35-45页
Chapter 2 Control of Chicken Coccidiosis第45-59页
    2.1. Management control第45-46页
    2.2. Chemoprophylaxis第46-48页
    2.3. Feed quality control第48页
    2.4. Vaccination第48-54页
      2.4.1. Biology of vaccination with special reference to Eimeria第49-50页
      2.4.2. Immune responses to vaccination Eimeria infection第50页
      2.4.3. Vaccines available against coccidiosis第50-54页
References第54-59页
Part Ⅱ: Research第59-151页
Chapter 3 Isolation and Identification of Eimeria brunetti strain第59-69页
    3.1. Introduction第59-60页
    3.2. Materials and methods第60-63页
      3.2.1. Parasites and chickens第60-61页
      3.2.2. Equipments, solutions, chemicals, reagents and buffers第61页
      3.2.3. Isolation of oocyst第61页
      3.2.4. Identification of Eimeria species by PCR amplification第61-63页
    3.3. Results第63-65页
    3.4. Discussion第65-66页
References第66-69页
Chapter 4 Cloning, Expression and Characterization of Eimeria brunetti Microneme-2Protein (EbMIC2)第69-91页
    4.1. Introduction第69-71页
    4.2. Materials and methods第71-76页
      4.2.1. Vectors and bacteria strains第71页
      4.2.2. Equipments, solutions, chemicals, reagents and buffers第71-72页
      4.2.3. Designing primers第72页
      4.2.4. Animals and parasites第72页
      4.2.5. Chicken immune sera against E. brunetti第72页
      4.2.6. Total RNA extraction第72-73页
      4.2.7. Reverse transcription and amplification of cDNA (RT-PCR)第73-74页
      4.2.8. Cloning of EbMIC2 gene第74页
      4.2.9. Sequence alignments and phylogenetic analysis第74-75页
      4.2.10. Construction of recombinant expression vector of EbMIC2第75页
      4.2.11. Expression and purification of recombinant EbMIC2第75-76页
      4.2.12. Immuno-blot for the recombinant EbMIC2 and native protein of EbMIC2第76页
    4.3. Results第76-84页
      4.3.1. Cloning of E. brunetti MIC2 gene第76-79页
      4.3.2. Percent identity, phylogenetic tree and antigenic analysis第79-82页
      4.3.3. Expression and purification of recombinant EbMIC2 protein第82-83页
      4.3.4. Immunoblot for the recombinant EbMIC2 and native protein of EbMIC2第83-84页
    4.4. Discussion第84-86页
References第86-91页
Chapter 5 Immunogenicity of Eimeria brunetti Microneme-2 Protein and ItsProtective Effects on Chicken第91-117页
    5.1. Introduction第92-93页
    5.2. Materials and methods第93-98页
      5.2.1. Equipments, solutions, chemicals, reagents and buffers第93页
      5.2.2. Animals and parasites第93页
      5.2.3. Cloning of E. brunetti MIC2 gene第93页
      5.2.4. Construction of the recombinant eukaryotic expression plasmid第93-94页
      5.2.5. Detection of the expressions of EbMIC2 gene in vivo by reverse transcriptionpolymerase chain reaction (RT-PCR) assay and western blot analysis第94-95页
      5.2.6. Determination of serum antibody level by enzyme-linked Immuno Sorbent assay(ELISA)第95页
      5.2.7. Determination of serum cytokine concentration第95-96页
      5.2.8. Production of anti-serum for passive immunization第96页
      5.2.9. Immunization and challenge experiment第96-97页
      5.2.10. Immunization and challenge experiment in passive immunization第97页
      5.2.11. Evaluation of immune protection第97-98页
      5.2.12. Statistical analysis第98页
    5.3. Results第98-106页
      5.3.1. Identification of recombinant plasmid pVAX1-EbMIC2第98-99页
      5.3.2. Detection of the transcription of constructed recombinant plasmid pVAX1-EbMIC2 in vivo第99页
      5.3.3. Detection of the expression of EbMIC2 gene in vivo by Western blot第99-100页
      5.3.4. IgG and cytokine levels in sera of immunized chickens第100-102页
      5.3.5. Protective effects of EbMIC2 against E. brunetti challenge in activeimmunization第102-104页
      5.3.6. Protective effects of constructed recombinant plasmid pVAXl-EbMIC2 againstE. brunetti challenge in passive immunization第104-106页
    5.4. Discussion第106-110页
References第110-117页
Chapter 6 Cloning, Expression and Characterization of Eimeria brunetti ApicalMembrane Antigen-1 (EbAMAl)第117-133页
    6.1. Introduction第117-118页
    6.2. Materials and Methods第118页
    6.3. Results第118-127页
      6.3.1. Cloning of E. brunetti AMA1 gene第118-119页
      6.3.2. Sequence analysis第119-122页
      6.3.3. Percent identity, phylogenetic tree and antigenic analysis第122-124页
      6.3.4. Construction and identification of the recombinant pET-28a (+)-EbAMA1第124-125页
      6.3.5. Expression and purification of recombinant EbAMAl protein第125-126页
      6.3.6. Immunoblot for the recombinant EbAMA1 and native protein of EbAMA1第126-127页
    6.4. Discussion第127-129页
References第129-133页
Chapter 7 Immunogenicity of Eimeria brunetti Apical Membrane Antigen-1 and ItsProtective Effects on Chicken第133-151页
    7.1. Introduction第134-135页
    7.2. Materials and Methods第135页
    7.3. Results第135-143页
      7.3.1. Identification of recombinant plasmid EbAMA1第135-136页
      7.3.2. Detection of the transcription of constructed recombinant plasmid EbAMA1 invivo第136页
      7.3.3. Detection of the expression of EbAMA1 gene in vivo by Western blot第136-137页
      7.3.4. IgG and cytokine levels in sera of immunized chickens第137-139页
      7.3.5. Protective effects of EbAMAl against E. brunetti challenge in activeimmunization第139-141页
      7.3.6. Protective effects of recombinant plasmid pVAX1-EbAMA1 against E. brunettichallenge in passive immunization第141-143页
    7.4. Discussion第143-146页
References第146-151页
Conclusion第151-153页
Acknowledgements第153页

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