论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 文中缩略词中英文对照 | 第14-20页 |
| 第一章 综述 | 第20-55页 |
| 第一部分 诱导性多潜能干细胞的研究进展 | 第20-47页 |
| 1 干细胞概述 | 第20-29页 |
| 2 体细胞重编程 | 第29-32页 |
| 3 诱导性多潜能干细胞的生产 | 第32-44页 |
| 4 诱导性多潜能干细胞的应用及前景展望 | 第44-47页 |
| 第二部分 干细胞与iPSCs的蛋白质组学研究进展 | 第47-55页 |
| 1 蛋白质组学研究概述 | 第47页 |
| 2 蛋白质组学的研究内容 | 第47-48页 |
| 3 翻译后修饰蛋白质组学 | 第48-51页 |
| 4 蛋白质组学的主要研究技术 | 第51-52页 |
| 5 ESC和iPSC蛋白质组学研究进展 | 第52-55页 |
| 第二章 牛iPSCs相关特异性转录因子的克隆、分析及病毒载体的构建 | 第55-81页 |
| 前言 | 第55-56页 |
| 1 试验材料与方法 | 第56-63页 |
| 1.1 试验材料 | 第56-59页 |
| 1.2 试验方法 | 第59-63页 |
| 2 试验结果 | 第63-78页 |
| 2.1 总RNA的提取 | 第63-64页 |
| 2.2 牛特异性转录因子RT-PCR鉴定 | 第64页 |
| 2.3 biPSCs特异性转录因子慢病毒真核表达载体的鉴定 | 第64-66页 |
| 2.4 测序结果分析 | 第66-78页 |
| 3 分析与讨论 | 第78-80页 |
| 3.1 biPSCs六个特异性转录因子的克隆 | 第78-79页 |
| 3.2 iPSCs携带特异性转录因子载体的选择 | 第79-80页 |
| 4 结论 | 第80-81页 |
| 第三章 病毒的包装检测及感染生产牛iPSCs | 第81-96页 |
| 前言 | 第81-82页 |
| 1 材料和方法 | 第82-87页 |
| 1.1 材料 | 第82-83页 |
| 1.2 试验方法 | 第83-87页 |
| 2 试验结果 | 第87-91页 |
| 2.1 胎牛成纤维细胞建系和EG-like细胞的获得 | 第87页 |
| 2.2 病毒包装及病毒滴度检测 | 第87-89页 |
| 2.3 biPSCs的形成 | 第89-90页 |
| 2.4 biPSCs的诱导效率 | 第90-91页 |
| 2.5 biPSCs传代培养 | 第91页 |
| 3 分析与讨论 | 第91-95页 |
| 3.1 诱导性多潜能干细胞诱导培养体系的选择构建 | 第91-93页 |
| 3.2 病毒包装与感染 | 第93-94页 |
| 3.3 biPSCs的形成及其诱导率 | 第94页 |
| 3.4 biPSCs的培养 | 第94-95页 |
| 4 结论 | 第95-96页 |
| 第四章 牛iPSCs生物学特性的研究 | 第96-116页 |
| 前言 | 第97页 |
| 1 材料和方法 | 第97-102页 |
| 1.1 材料 | 第97-99页 |
| 1.2 试验方法 | 第99-102页 |
| 2 试验结果 | 第102-111页 |
| 2.1 biPSCs的形态学特征 | 第102页 |
| 2.2 biPSCs碱性磷酸酶染色 | 第102-103页 |
| 2.3 biPSCs多能性相关基因的检测 | 第103-104页 |
| 2.4 干细胞标记的免疫荧光染色 | 第104-105页 |
| 2.5 biPSCs核型分析 | 第105页 |
| 2.6 多能性相关基因启动子区甲基化水平检测 | 第105-107页 |
| 2.7 bPSCs端粒酶检测 | 第107-108页 |
| 2.8 biPSCs体外分化检测 | 第108-109页 |
| 2.9 bPSCs体内分化检测 | 第109-111页 |
| 3 分析和讨论 | 第111-114页 |
| 3.1 分子水平上对biPSCs的检测 | 第111-112页 |
| 3.2 细胞水平上对biPSCs的检测 | 第112-114页 |
| 3.3 动物机体水平上biPSCs的检测 | 第114页 |
| 4 结论 | 第114-116页 |
| 第五章 牛iPSCs翻译后修饰蛋白质组的初步研究 | 第116-131页 |
| 前言 | 第116-117页 |
| 1 试验材料与方法 | 第117-120页 |
| 1.1 试验材料 | 第117-118页 |
| 1.2 试验方法 | 第118-120页 |
| 2 试验结果 | 第120-126页 |
| 2.1 BCA法测蛋白浓度标准曲线 | 第120-121页 |
| 2.2 质谱鉴定结果 | 第121页 |
| 2.3 鉴定蛋白质的功能分类 | 第121-126页 |
| 3 分析与讨论 | 第126-130页 |
| 3.1 磷酸化蛋白/肽段富集技术的研究 | 第126-127页 |
| 3.2 biPSCs以及biPSCs来源体细胞之间的蛋白组差异 | 第127-129页 |
| 3.3 biPSCs与bPSCs来源体细胞的磷酸化蛋白组差异 | 第129-130页 |
| 4 结论 | 第130-131页 |
| 附录 | 第131-145页 |
| 附录1 诱导性多潜能干细胞所用特异性转录因子、其他小分子化合物、靶细胞类型、特异性转录因子导入方式以及iPSCs形成率的比较 | 第131-138页 |
| 附录2 牛Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc、Nanog和Lin28的测序结果 | 第138-141页 |
| 附录3 甲基化测序结果 | 第141-142页 |
| 附录4 BEFs和biPSCs样品中鉴定到的磷酸化蛋白 | 第142-145页 |
| 参考文献 | 第145-166页 |
| 攻读博士期间文章发表情况 | 第166-167页 |
| 致谢 | 第167页 |
