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水牛供体细胞性别对其核移植胚胎发育及印记基因甲基化的影响

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水牛供体细胞性别对其核移植胚胎发育及印记基因甲基化的影响
论文目录
 
摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
中英文缩略词表第12-17页
第一部分 文献综述第17-39页
第一章 核移植技术的研究进展第17-39页
  1. 影响核移植克隆的因素第17-23页
  1.1 影响核移植技术效率的原因第17-21页
  1.2 影响克隆胚胎的分子机制第21-23页
  2. 表观遗传修饰第23-32页
  2.1 DNA甲基化第24-25页
  2.2 组蛋白修饰第25-28页
  2.3 基因印记第28-30页
  2.4 X染色体失活第30-32页
3 提高核移植效率的方法第32-35页
  3.1 降低甲基化第32-34页
  3.2 提高乙酰化第34页
  3.3 调控印记基因第34-35页
  4. 雌雄核移植克隆胚胎的印记基因甲基化的研究第35-36页
  4.1 印记基因甲基化对克隆胚胎的影响第35-36页
  4.2 X染色体失活对克隆胚胎的影响第36页
  4.3 供体性别差异对克隆胚胎的影响第36页
  5. 核移植技术的意义第36-37页
  5.1 医疗第37页
  5.2 动物保护第37页
  5.3 科研第37页
  6. 展望第37-38页
  7. 研究目的与意义第38-39页
第二部分 实验内容第39-130页
第二章 雌雄水牛成纤维细胞对克隆胚胎发育的影响第40-56页
前言第41页
  1. 材料与方法第41-49页
  1.1 试验材料第41-42页
  1.2 主要设备仪器及试剂第42-44页
  1.3 试验方法第44-48页
  1.4 试验设计第48-49页
  1.5 统计分析第49页
  2. 结果与分析第49-54页
  2.1 水牛成纤维体细胞(BFF)的性别鉴定第49页
  2.2 比较IVF、ICSI-X、ICSI-Y、SCNT-♀、SCNT-♂胚胎的发育情况第49-50页
  2.3 比较IVF、SCNT-♀、SCNT-♂胚胎的发育速度第50-52页
  2.4 比较ICSI-X、ICSI-Y、SCNT-♀、SCNT-♂桑椹胚、囊胚多能性基因的表达情况第52-54页
  3. 讨论第54-55页
  4. 小结第55-56页
第三章 雌雄水牛克隆胚胎甲基化差异的研究第56-75页
前言第57-58页
  1. 材料与方法第58-61页
  1.1 试验材料第58页
  1.2 主要设备仪器及试剂第58页
  1.3 试验方法第58-60页
  1.4 试验设计第60-61页
  1.5 统计分析第61页
  2. 结果与分析第61-72页
  2.1 ~(5m)C、~(5hm)C在IVF、SCNT-♀、SCNT-♂早期胚胎的变化情况第61-65页
  2.2 Dnmts mRNA在ICSI-X、ICSI-Y、SCNT -♀、SCNT -♂早期胚胎的表达第65-66页
  2.3 TETs mRNA在ICSI-X、ICSI-Y、SCNT -♀、SCNT -♂早期胚胎的表达第66-68页
  2.4 H3K9me2、H3K9me3在IVF、SCNT-♀、SCNT-♂早期胚胎的表达情况第68-72页
  3. 讨论第72-74页
  4. 小结第74-75页
第四章 雌雄水牛克隆胚胎Xist、H19和IGF2的甲基化模式及调控研究第75-103页
前言第75-77页
  1. 材料与方法第77-85页
  1.1 试验材料第77页
  1.2 主要设备仪器和试剂第77页
  1.3 试验方法第77-84页
  1.4 试验设计第84-85页
  1.5 统计分析第85页
  2. 结果与分析第85-100页
  2.1 Xist、H19、IGF2基因的印记调控序列的克隆第85-87页
  2.2 雌雄BFF印记基因的甲基化第87-89页
  2.3 IVF-X、IVF-Y、SCNT-♀、SCNT-♂早期胚胎印记基因的甲基化第89-91页
  2.4 水牛KDM4B ORF的克隆与分析第91-93页
  2.5 构建KDM4B-pEGFP-N1载体第93-94页
  2.6 过表达KDM4B对SCNT-♀和SCNT-♂胚胎发育的影响第94页
  2.7 过表达KDM4B对雌雄SCNT早期胚胎中的H3K9me2和H3K9me3表达的影响第94-100页
  3. 讨论第100-102页
  4. 小结第102-103页
第五章 雌雄水牛克隆胚胎印记基因的表达和调控第103-118页
前言第103-104页
  1. 材料与方法第104-108页
  1.1 试验材料第104页
  1.2 主要设备仪器及试剂第104页
  1.3 试验方法第104-106页
  1.4 试验设计第106-108页
  1.5 统计分析第108页
  2. 结果与分析第108-116页
  2.1 雌雄BFF印记基因的表达第108-109页
  2.2 ICSI-X、ICSI-Y、SCNT♀、SCNT-♂早期胚胎印记基因的表达第109-110页
  2.3 水牛Xist-shRNA-psicoR-GFP载体的构建第110-111页
  2.4 Xist-shRNA-psicoR-GFP在孤雌胚胎的荧光表达情况第111-112页
  2.5 不同浓度Xist-shRNA-psicoR-GFP对孤雌胚胎发育的影响第112-113页
  2.6 不同浓度Xist-shRNA-psicoR-GFP对孤雌胚胎Xist mRNA表达的影响第113-114页
  2.7 Xist-shRNA-5697在SCNT-♀胚胎的荧光表达情况第114-115页
  2.8 不同浓度的Xist-shRNA-5697对SCNT-♀胚胎发育的影响第115页
  2.9 Xist shRNA-5697对SCNT-早胚胎囊胚Xist mRNA表达的影响第115-116页
  3. 讨论第116-117页
  4. 小结第117-118页
第六章 雌雄克隆水牛印记基因的甲基化和表达情况第118-130页
前言第119页
  1. 材料与方法第119-121页
  1.1 试验材料第119-120页
  1.2 主要设备仪器及试剂第120页
  1.3 试验方法第120页
  1.4 试验设计第120-121页
  1.5 统计分析第121页
  2. 结果与分析第121-128页
  2.1 雌雄克隆水牛Xist基因的甲基化第121-123页
  2.2 雌雄克隆水牛H19基因的甲基化第123-124页
  2.3 雌雄克隆水牛IGF2基因的甲基化第124-126页
  2.4 雌雄克隆水牛Xist mRNA的表达第126页
  2.5 雌雄克隆水牛H19 mRNA的表达第126-127页
  2.6 雌雄克隆水牛IGF2 mRNA的表达第127-128页
  3. 讨论第128-129页
  4. 小结第129-130页
全文总结论第130-131页
参考文献第131-146页
附件第146-147页
致谢第147-148页
攻读学位期间发表的论文第148页

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