论文目录 | |
| 摘要 | 第11-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 符号及缩略语(Abbreviation)表 | 第15-17页 |
| 第一章 文章综述 | 第17-52页 |
| 1.1 植物体中激素的概况 | 第17页 |
| 1.2 脱落酸ABA的相关内容 | 第17-25页 |
| 1.2.1 ABA合成和代谢途径 | 第17-19页 |
| 1.2.2 ABA的生理功能 | 第19-20页 |
| 1.2.3 ABA类似物的发现 | 第20-21页 |
| 1.2.4 ABA信号通路研究概况 | 第21-25页 |
| 1.3 ABA受体基因研究概况 | 第25-31页 |
| 1.3.1 花期控制蛋白FCA | 第25-26页 |
| 1.3.2 叶绿体镁离子螯合酶H亚基(ChlH) | 第26-27页 |
| 1.3.3 G蛋白偶联受体类(GCR2>G1>G2) | 第27-28页 |
| 1.3.4 ABA受体调节元件pyrabactin抵抗蛋白/pyrabactin抵抗类似蛋白(RCAR1/PYR/PYL) | 第28-31页 |
| 1.4 ABA受体RCAR/PYR/PYL介导的ABA信号通路研究概况 | 第31-49页 |
| 1.4.1 ABA信号通路中重要的调控因子:蛋白磷酸酶PP2Cs的研究概况 | 第35-37页 |
| 1.4.2 ABA信号通路中重要的调控因子:蛋白激酶SnRK2s的研究概况 | 第37-41页 |
| 1.4.3 ABA信号转导过程的转录调控 | 第41-49页 |
| 1.4.3.1 bZIP家族转录因子参与ABA信号转导过程的研究 | 第43-47页 |
| 1.4.3.2 具有B3结构域的转录因子参与ABA信号转导过程的研究 | 第47-48页 |
| 1.4.3.3 APETALA2(AP2)/EREBP(ERF)家族转录因子参与ABA信号转导过程的研究 | 第48页 |
| 1.4.3.4 WRKY家族转录因子参与ABA信号转导过程的研究 | 第48-49页 |
| 1.5 本部分研究的目的意义和相关内容 | 第49-52页 |
| 1.5.1 本部分主要研究的内容 | 第50-51页 |
| 1.5.2 本部分技术路线图 | 第51-52页 |
| 第二章 实验材料、方法与结果 | 第52-95页 |
| 2.1 实验材料 | 第52-56页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第52页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第52页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第52页 |
| 2.1.4 主要化学试剂 | 第52-53页 |
| 2.1.5 常用培养基 | 第53-54页 |
| 2.1.6 常用抗生素和激素类 | 第54页 |
| 2.1.7 常用溶液 | 第54-56页 |
| 2.2 实验方法 | 第56-72页 |
| 2.2.1 反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR | 第56-60页 |
| 2.2.2 载体构建 | 第60-65页 |
| 2.2.2.1 PCR扩增目的片段 | 第60-61页 |
| 2.2.2.2 PCR产物纯化(Axygen琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒) | 第61-62页 |
| 2.2.2.3 目的片段和载体的酶切 | 第62页 |
| 2.2.2.4 酶切产物纯化(Axygen琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒) | 第62-63页 |
| 2.2.2.5 目的片断与载体的连接 | 第63页 |
| 2.2.2.6 大肠杆菌DH5α热激感受态细胞的制备及转化 | 第63-64页 |
| 2.2.2.7 PtPYRL1和PtPYRL5序列的测序 | 第64页 |
| 2.2.2.8 杨树ABA受体家族PtPYRLs进化树分析 | 第64-65页 |
| 2.2.3 拟南芥的培养 | 第65页 |
| 2.2.4 杨树的培养 | 第65-66页 |
| 2.2.5 拟南芥转基因植株获得 | 第66-67页 |
| 2.2.6 目的蛋白亚细胞定位实验 | 第67-69页 |
| 2.2.7 酵母转化 | 第69-70页 |
| 2.2.8 拟南芥ABA相关表型实验 | 第70-71页 |
| 2.2.9 数据分析 | 第71-72页 |
| 2.3 结果与分析 | 第72-92页 |
| 2.3.1 杨树基因组中ABA受体分析 | 第72-73页 |
| 2.3.2 杨树ABA受体基因的聚类分析 | 第73-74页 |
| 2.3.3 PtPYRL1和PtPYRL5基因在杨树不同组织的表达情况 | 第74-76页 |
| 2.3.4 PtPYRL1和PtPYRL5基因的亚细胞定位 | 第76-77页 |
| 2.3.5 杨树PtPYRLs-PtABI1B-PtSnRK2.11的相互作用 | 第77-80页 |
| 2.3.6 相对高水平表达PtPYRL1和PtPYRL5使转基因拟南芥种子对ABA更敏感 | 第80-85页 |
| 2.3.7 转基因拟南芥中相对高水平表达PtPYRL1和PtPYRL5会增强植株的抗旱性 | 第85-89页 |
| 2.3.8 转基因拟南芥中相对高水平表达PtPYRL1和PtPYRL5会降低植株的失水率 | 第89-90页 |
| 2.3.9 转基因拟南芥中相对高水平表达PtPYRL1和PtPYRL5促进ABA诱导的气孔关闭 | 第90-92页 |
| 2.4 讨论 | 第92-95页 |
| 第三章 过量表达杨树ABA受体基因PtPYRL1和PtPYRL5增强杨树的抗逆性 | 第95-116页 |
| 3.1 材料与方法 | 第96-100页 |
| 3.1.1 杨树转基因植株获得 | 第97页 |
| 3.1.2 GUS组织化学染色 | 第97-98页 |
| 3.1.3 杨树干旱实验 | 第98-99页 |
| 3.1.4 杨树叶片水势的测定 | 第99页 |
| 3.1.5 台盼蓝(Trypan Blue)染色 | 第99页 |
| 3.1.6 DAB(Diaminobenzidine)染色 | 第99页 |
| 3.1.7 数据统计 | 第99-100页 |
| 3.2 结果与分析 | 第100-114页 |
| 3.2.1 杨树ABA受体基因受ABA的诱导表达情况 | 第100-101页 |
| 3.2.2 杨树ABA受体基因受干旱胁迫的表达情况 | 第101页 |
| 3.2.3 杨树ABA受体基因受低温冷害的表达情况 | 第101页 |
| 3.2.4 PtPYRL1和PtPYRL5转基因杨树表型分析 | 第101-114页 |
| 3.2.4.1 PtPYRL1和PtPYRL5转基因杨树鉴定 | 第101-103页 |
| 3.2.4.2 转基因杨树中PtPYRL1和PtPYRL5的表达水平检测 | 第103-104页 |
| 3.2.4.3 PtPYRL1或PtPYRL5的过量表达增强转基因杨树的抗旱性 | 第104-108页 |
| 3.2.4.4 PtPYRL1或PtPYRL5的过量表达使ABA应答基因表达上调 | 第108-110页 |
| 3.2.4.5 PtPYRL1或PtPYRL5的过量表达增强转基因杨树的抗高渗透胁迫 | 第110-112页 |
| 3.2.4.6 PtPYRL1或PtPYRL5的过量表达增强转基因杨树的抗冷害胁迫 | 第112-114页 |
| 3.3 讨论 | 第114-116页 |
| 第四章 总结与展望 | 第116-119页 |
| 4.1 总结 | 第116-117页 |
| 4.2 创新点和不足 | 第117-118页 |
| 4.3 展望 | 第118-119页 |
| 附表 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-146页 |
| 科研成果 | 第146-147页 |
| 致谢 | 第147-149页 |
