论文目录 | |
| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-36页 |
| 1 植物成花途径 | 第16-21页 |
| 1.1 光周期途径 | 第17-19页 |
| 1.2 春化途径 | 第19-20页 |
| 1.3 自主途径 | 第20页 |
| 1.4 赤霉素途径 | 第20-21页 |
| 1.5 开花抑制基因 | 第21页 |
| 2 植物抽薹开花调控基因的分子特征研究 | 第21-27页 |
| 2.1 植物FT/TFL1基因家族 | 第22页 |
| 2.2 FT基因的作用模式 | 第22-23页 |
| 2.3 FT基因在光周期途径中的作用 | 第23页 |
| 2.4 FT基因在自主途径和春化途径中的作用 | 第23-24页 |
| 2.5 FLC影响植物抽薹开花 | 第24-25页 |
| 2.6 FLC基因在开花网络调控中具有重要作用 | 第25-26页 |
| 2.7 其他抽薹开花相关基因结构与功能 | 第26-27页 |
| 3 植物抽薹开花相关基因启动子研究 | 第27-30页 |
| 3.1 植物启动子的结构 | 第27-28页 |
| 3.2 植物启动子分类 | 第28-29页 |
| 3.3 植物启动子克隆方法 | 第29页 |
| 3.4 抽薹开花基因启动子研究进展 | 第29-30页 |
| 4 植物抽薹开花相关基因表达特征研究 | 第30-34页 |
| 4.1 植物中内参基因的选择 | 第30-32页 |
| 4.2 内参基因稳定性评价 | 第32-33页 |
| 4.3 内参基因组合应用 | 第33页 |
| 4.4 抽薹开花基因表达研究中内参基因选择的重要性 | 第33-34页 |
| 5 本研究目的和意义 | 第34-36页 |
| 第二章 萝卜RsFT基因克隆与功能验证 | 第36-68页 |
| 1 材料与方法 | 第37-44页 |
| 1.1 植物材料 | 第37-38页 |
| 1.2 菌株与质粒 | 第38页 |
| 1.3 试剂 | 第38页 |
| 1.4 常用储液 | 第38页 |
| 1.5 基因组DNA与总RNA提取 | 第38页 |
| 1.6 cDNA第一条链合成 | 第38-39页 |
| 1.7 引物设计与合成 | 第39页 |
| 1.8 RsFT基因克隆 | 第39-40页 |
| 1.9 RsFT基因的5'上游调控序列克隆 | 第40-41页 |
| 1.10 RsFT基因表达验证 | 第41-42页 |
| 1.11 RsFT基因原核表达分析 | 第42页 |
| 1.12 RsFT基因亚细胞定位分析 | 第42-43页 |
| 1.13 RsFT基因转基因过表达功能验证 | 第43-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-62页 |
| 2.1 萝卜叶片基因组DNA提取 | 第44页 |
| 2.2 萝卜叶片总RNA提取 | 第44页 |
| 2.3 萝卜FT基因DNA与cDNA扩增 | 第44-45页 |
| 2.4 萝卜FT基因DNA与cDNA克隆及序列分析 | 第45-47页 |
| 2.5 推测萝卜RsFT蛋白特征 | 第47-50页 |
| 2.6 RsFT氨基酸序列同源性及系统树分析 | 第50-51页 |
| 2.7 FT基因上游调控序列克隆与分析 | 第51-54页 |
| 2.8 萝卜RsFT基因表达特征分析 | 第54-55页 |
| 2.9 萝卜RsFT基因原核表达分析 | 第55-57页 |
| 2.10 萝卜RsFT/RsFLC基因互作表达分析 | 第57-59页 |
| 2.11 萝卜RsFT基因亚细胞定位 | 第59-60页 |
| 2.12 RsFT转基因烟草功能验证 | 第60-62页 |
| 3 讨论 | 第62-68页 |
| 第三章 萝卜RsFLC基因克隆与功能验证 | 第68-86页 |
| 1 材料与方法 | 第69-72页 |
| 1.1 植物材料 | 第69-70页 |
| 1.2 菌株与质粒 | 第70页 |
| 1.3 试剂 | 第70页 |
| 1.4 基因组DNA、RNA提取及cDNA的合成 | 第70页 |
| 1.5 萝卜RsFLC基因的克隆 | 第70-71页 |
| 1.6 RsFLC基因5'上游调控序列克隆 | 第71-72页 |
| 1.7 RsFLC基因转基因功能验证 | 第72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-82页 |
| 2.1 RsFLC基因DNA及cDNA克隆与分析 | 第72-73页 |
| 2.2 RsFLC基因5'上游序列克隆与分析 | 第73页 |
| 2.3 RsFLC基因启动子序列分析 | 第73-77页 |
| 2.4 RsFLC核心启动子元件鉴定 | 第77-80页 |
| 2.5 RsFLC基因转基因功能验证 | 第80-82页 |
| 3 讨论 | 第82-86页 |
| 第四章 萝卜RsCO与RsFPF1基因克隆与功能分析 | 第86-108页 |
| 1 材料与方法 | 第87-90页 |
| 1.1 试验材料 | 第87页 |
| 1.2 基因组DNA与总RNA提取 | 第87-88页 |
| 1.3 cDNA合成 | 第88页 |
| 1.4 RsCO和RsFPF1基因的扩增 | 第88页 |
| 1.5 RsCO和RsFPF1基因启动子序列克隆 | 第88-89页 |
| 1.6 RsCO和RsFPF1基因半定量表达特征分析 | 第89页 |
| 1.7 RsCO和RsFPF1基因功能验证分析 | 第89-90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-105页 |
| 2.1 萝卜抽薹开花相关基因RsCO和RsFPF1 DNA及cDNA扩增 | 第90页 |
| 2.2 萝卜RsCO与RsFPF1基因DNA与cDNA序列分析 | 第90-94页 |
| 2.3 萝卜RsCO与RsFPF1基因启动子克隆 | 第94-101页 |
| 2.4 萝卜RsCO与RsFPF1基因表达特征分析 | 第101页 |
| 2.5 萝卜RsCO与RsFPF1基因功能验证分析 | 第101-105页 |
| 3 讨论 | 第105-108页 |
| 第五章 萝卜RsAP1与RsSVP基因分子特征分析 | 第108-126页 |
| 1 材料与方法 | 第109-111页 |
| 1.1 植物材料 | 第109页 |
| 1.2 基因组DNA与总RNA提取 | 第109页 |
| 1.3 cDNA合成 | 第109页 |
| 1.4 RsAP1和RsSVP基因扩增 | 第109-110页 |
| 1.5 RsAP1和RsSVP基因启动子序列克隆 | 第110页 |
| 1.6 RsAP1和RsSVP基因表达特征分析 | 第110-111页 |
| 2 结果与分析 | 第111-123页 |
| 2.1 萝卜RsAP1和RsSVP基因DNA及cDNA扩增 | 第111-112页 |
| 2.2 萝卜RsAP1与RsSVP基因DNA与cDNA序列分析 | 第112-116页 |
| 2.3 萝卜RsAP1与RsSVP基因启动子克隆 | 第116-122页 |
| 2.4 萝卜RsAP1与RsSVP基因表达特征分析 | 第122-123页 |
| 3 讨论 | 第123-126页 |
| 第六章 萝卜RsTFL1与RsTSF基因遗传特征分析 | 第126-140页 |
| 1 材料与方法 | 第127-129页 |
| 1.1 植物材料 | 第127页 |
| 1.2 基因组DNA与总RNA提取 | 第127页 |
| 1.3 cDNA合成 | 第127页 |
| 1.4 RsTFL1与RsTSF基因扩增 | 第127-128页 |
| 1.5 RsTFL1基因启动子序列克隆 | 第128页 |
| 1.6 RsTSF转基因过表达功能验证 | 第128-129页 |
| 2 结果与分析 | 第129-137页 |
| 2.1 萝卜RsTFL1基因DNA及cDNA扩增 | 第129页 |
| 2.2 萝卜RsTFL1基因DNA与cDNA序列分析 | 第129-131页 |
| 2.3 萝卜RsTSF基因cDNA扩增 | 第131-132页 |
| 2.4 萝卜RsTSF基因cDNA序列分析 | 第132-133页 |
| 2.5 萝卜RsTFL1基因启动子克隆 | 第133-135页 |
| 2.6 萝卜RsTSF基因功能验证分析 | 第135-137页 |
| 3 讨论 | 第137-140页 |
| 第七章 萝卜实时荧光定量RT-PCR内参基因筛选 | 第140-154页 |
| 1 材料与方法 | 第141-144页 |
| 1.1 试验材料 | 第141-142页 |
| 1.2 总RNA的提取和第一条链合成 | 第142页 |
| 1.3 内参基因的选择和引物设计 | 第142-143页 |
| 1.4 RT-qPCR分析 | 第143-144页 |
| 1.5 基因表达稳定性数据分析 | 第144页 |
| 2 结果与分析 | 第144-150页 |
| 2.1 引物检测 | 第144-146页 |
| 2.2 内参基因的Ct值分析 | 第146页 |
| 2.3 GeNorm分析 | 第146-149页 |
| 2.4 NormFinder分析 | 第149-150页 |
| 3 讨论 | 第150-154页 |
| 全文结论 | 第154-156页 |
| 创新之处 | 第156-158页 |
| 参考文献 | 第158-170页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第170-172页 |
| 致谢 | 第172页 |
