论文目录 | |
| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 本文所用主要缩略词 | 第15-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-51页 |
| 第一章 杀菌蛋白基因(HCM1)的研究进展 | 第17-33页 |
| 1 HARPIN类激发子 | 第17-21页 |
| 1.1 Harpins的一般特征 | 第17-18页 |
| 1.2 Harpins作为病原菌的致病因子 | 第18-19页 |
| 1.3 Harpins作为过敏性细胞死亡的激发子 | 第19页 |
| 1.4 部分Harpins可以诱导植物产生防卫反应,但是不能激发植物的过敏性反应 | 第19-20页 |
| 1.5 Harpins促进植物生长 | 第20-21页 |
| 1.6 Harpins与寄主植物的互作 | 第21页 |
| 2 抗菌肽(CECROPIN A)和蜂毒肽(MELITTIN)概述 | 第21-25页 |
| 2.1 家蚕抗菌肽(CecropinA) | 第21-22页 |
| 2.2 蜂毒肽(Melittin) | 第22-24页 |
| 2.3 抗菌肽(Cecropin A)和蜂毒肽(Melittin)杂交肽的植物基因工程 | 第24-25页 |
| 3 植物过敏性反应的研究进展 | 第25-27页 |
| 3.1 过敏性反应 | 第25页 |
| 3.2 过敏性反应的诱导 | 第25-27页 |
| 4 棉花抗枯、黄萎病研究进展 | 第27-33页 |
| 4.1 棉花枯萎病菌及其症状 | 第27-28页 |
| 4.2 棉花黄萎病菌及其症状 | 第28-30页 |
| 4.3 转基因棉花抗枯萎病和黄萎病的研究进展 | 第30-33页 |
| 第二章 固醇载体蛋白基因的研究进展 | 第33-47页 |
| 1 棉纤维伸长机制研究进展 | 第33-42页 |
| 1.1 棉纤维细胞的发育过程 | 第33-34页 |
| 1.2 控制棉纤维伸长的因素 | 第34-38页 |
| 1.3 棉纤维伸长机制假说 | 第38-42页 |
| 2 固醇载体蛋白研究进展 | 第42-47页 |
| 2.1 固醇载体蛋白简介 | 第42-43页 |
| 2.2 固醇载体蛋白的进化 | 第43-44页 |
| 2.3 固醇载体蛋白在植物中的研究进展 | 第44-47页 |
| 第三章 GHMYB9启动子的研究进展 | 第47-51页 |
| 1 MYB转录因子在棉纤维发育中的研究进展 | 第47-48页 |
| 2 植物启动子研究进展 | 第48-51页 |
| 2.1 启动子的类型及其特点 | 第48-49页 |
| 2.2 启动子的研究方法 | 第49-51页 |
| 本研究的目的和意义 | 第51-53页 |
| 1 杀菌蛋白Hcm1 | 第51页 |
| 2 陆地棉固醇载体蛋白基因GhSCP2D | 第51页 |
| 3 GhMYB9启动子 | 第51-53页 |
| 第二部分 研究报告 | 第53-143页 |
| 第四章 转杀菌蛋白基因HCM1棉花提高了枯萎病和黄萎病的抗性 | 第53-89页 |
| 1. 材料与方法 | 第53-65页 |
| 1.1 植物材料 | 第53-54页 |
| 1.2 枯萎病菌和黄萎病菌菌株的培养条件 | 第54页 |
| 1.3 细菌菌株和质粒 | 第54-55页 |
| 1.4 培养基 | 第55-58页 |
| 1.5 基因枪介导的瞬时表达载体在植物细胞的转化 | 第58-59页 |
| 1.6 农杆菌介导的棉花遗传转化 | 第59页 |
| 1.7 Southern杂交 | 第59页 |
| 1.8 目的蛋白的Western印迹检测 | 第59-60页 |
| 1.9 荧光实时定量RT-PCR分析 | 第60-61页 |
| 1.10 棉花黄萎病和枯萎病的室内抗性鉴定 | 第61页 |
| 1.1 棉花黄萎病和枯萎病的田间抗性鉴定 | 第61-62页 |
| 1.12 转基因棉农艺性状调查 | 第62页 |
| 1.13 微过敏检测 | 第62-63页 |
| 1.14 转基因叶片H_2O_2的测定 | 第63页 |
| 1.15 棉花体内黄萎病菌的定性和定量检测 | 第63页 |
| 1.16 原核表达 | 第63-64页 |
| 1.17 抑制真菌平板实验 | 第64-65页 |
| 2 结果和分析 | 第65-84页 |
| 2.1 转Hcm1基因棉花的获得 | 第65-66页 |
| 2.2 转基因植株的PCR检测和纯合株系的获得 | 第66-67页 |
| 2.3 转基因棉花染色体中Hcm1的拷贝数检测 | 第67页 |
| 2.4 转基因棉花中Hcm1蛋白表达检测 | 第67-68页 |
| 2.5 转Hcm1基因棉花提高了对于枯萎病和黄萎病的抗病性 | 第68-72页 |
| 2.6 转Hcm1基因棉花在大田和病圃中的主要农艺性状调查 | 第72-74页 |
| 2.7 Hcm1基因在植物细胞中的定位 | 第74-75页 |
| 2.8 转Hcm1基因棉花在生物胁迫下活性氧爆发并诱导抗病基因的表达 | 第75-78页 |
| 2.9 转Hcm1基因棉花在生物胁迫下产生微过敏性反应 | 第78-80页 |
| 2.10 转Hcm1基因棉花具有抑制黄萎病菌扩展的能力 | 第80-84页 |
| 3 讨论 | 第84-89页 |
| 3.1 Hcm1基因作用于植物细胞的膜系统 | 第84页 |
| 3.2 转Hcm1基因棉花可能有广谱的抗病性 | 第84-85页 |
| 3.3 Hcm1可能使植物处于一种引发态从而激发植物产生抗病性反应 | 第85-86页 |
| 3.4 Hcm1在植物体内能够抑制病菌的生长 | 第86-89页 |
| 第五章 陆地棉固醇载体蛋白基因GHSCP2D在棉花纤维发育过程中的功能分析 | 第89-133页 |
| 1 材料与方法 | 第89-99页 |
| 1.1 植物材料 | 第89页 |
| 1.2 菌株和质粒 | 第89-91页 |
| 1.3 培养基 | 第91-92页 |
| 1.4 RNA的提取及定量RT-PCR验证 | 第92页 |
| 1.5 PCR扩增产物的电泳、回收、连接 | 第92页 |
| 1.6 连接产物的转化与检测 | 第92-93页 |
| 1.7 序列分析 | 第93-94页 |
| 1.8 SNP引物设计 | 第94页 |
| 1.9 亚细胞定位 | 第94页 |
| 1.10 植物表达载体的农杆菌转化 | 第94-96页 |
| 1.11 农杆菌介导的棉花遗传转化 | 第96页 |
| 1.12 转基因植株表达分析 | 第96页 |
| 1.13 转基因株系纤维品质测定 | 第96页 |
| 1.14 拟南芥的转化 | 第96-97页 |
| 1.15 棉花纤维细胞中单糖和总糖含量测定 | 第97页 |
| 1.16 棉花纤维细胞中过氧化氢(H_2O_2)含量测定 | 第97-98页 |
| 1.17 家族基因数据与分析方法 | 第98-99页 |
| 2 结果和分析 | 第99-127页 |
| 2.1 棉花固醇载体蛋白(GhSCP)家族基因的寻找和序列特征分析 | 第99-101页 |
| 2.2 固醇载体蛋白(SCP)的进化分析 | 第101-103页 |
| 2.3 棉花固醇载体蛋白(GhSCP)家族基因在棉花不同组织中的表达分析 | 第103-106页 |
| 2.4 棉花固醇载体蛋白(GhSCP)基因在蔗糖诱导下的表达分析 | 第106-107页 |
| 2.5 棉花固醇载体蛋白(GhSCP)基因的亚细胞定位 | 第107-109页 |
| 2.6 GhSCP2D的组成性过量表达不影响拟南芥的幼苗发育 | 第109-112页 |
| 2.7 转GhSCP2D基因棉花的获得、PCR检测和表达分析 | 第112-114页 |
| 2.8 转GhSCP2D基因棉花的纤维品质测定 | 第114-115页 |
| 2.9 转GhSCP2D基因棉花纤维中的糖含量测定 | 第115-116页 |
| 2.10 蔗糖转运蛋白在转GhSCP2D基因棉花中的表达分析 | 第116-123页 |
| 2.11 转GhSCP2D基因棉花纤维中的过氧化氢含量测定 | 第123-125页 |
| 2.12 棉花纤维发育相关基因在转GhSCP2D基因棉花中的表达分析 | 第125-127页 |
| 3 讨论 | 第127-133页 |
| 3.1 棉花固醇载体蛋白基因GhSCP2D调控棉花纤维发育机制 | 第127-129页 |
| 3.2 植物在生长发育过程中,蔗糖在韧皮部中的装载存在不同的方式 | 第129-130页 |
| 3.3 过量表达GhSCP2D不影响拟南芥的幼苗发育 | 第130-133页 |
| 第六章 GHMYB9启动子在棉花中的功能分析 | 第133-143页 |
| 1. 材料与方法 | 第133-135页 |
| 1.1 植物材料 | 第133页 |
| 1.2 菌株和质粒 | 第133页 |
| 1.3 棉花遗传转化 | 第133页 |
| 1.4 定量RT-PCR | 第133页 |
| 1.5 GUS组织化学检测 | 第133页 |
| 1.6 GUS活性测定 | 第133-134页 |
| 1.7 转基因后代生长素处理 | 第134-135页 |
| 2 结果与分析 | 第135-141页 |
| 2.1 GhMYB9和GhMYB7在不同组织器官中的表达分析 | 第135-136页 |
| 2.2 GhMYB9启动子序列分析 | 第136-138页 |
| 2.3 GhMYB9基因启动子的表达特性 | 第138-140页 |
| 2.4 GhMYB9启动子受生长素诱导 | 第140-141页 |
| 3. 讨论 | 第141-143页 |
| 全文结论 | 第143-145页 |
| 创新点 | 第145-147页 |
| 参考文献 | 第147-173页 |
| 附录 | 第173-183页 |
| 发表论文 | 第183-185页 |
| 致谢 | 第185页 |
