论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| abstract | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-34页 |
| 1.1 伪狂犬病毒的研究概况 | 第14-23页 |
| 1.1.1 PRV病毒粒子的形态结构 | 第14页 |
| 1.1.2 PRV基因组结构 | 第14-16页 |
| 1.1.3 PRV主要结构蛋白 | 第16-17页 |
| 1.1.4 PRV的复制周期 | 第17-23页 |
| 1.2 伪狂犬病的流行病学及疫苗防控 | 第23-26页 |
| 1.2.1 PRV的宿主 | 第23页 |
| 1.2.2 PRV的传播途径 | 第23页 |
| 1.2.3 PR主要临床症状 | 第23-24页 |
| 1.2.4 PR的流行现状 | 第24-25页 |
| 1.2.5 PR的诊断方法 | 第25-26页 |
| 1.2.6 PRV疫苗及防控 | 第26页 |
| 1.3 蛋白质组学研究进展及在病毒学中的应用 | 第26-32页 |
| 1.3.1 蛋白质组的概念 | 第26-27页 |
| 1.3.2 定量蛋白质组学技术分类 | 第27-28页 |
| 1.3.3 绝对定量蛋白质组学技术 | 第28-29页 |
| 1.3.4 常用相对定量蛋白质组学技术 | 第29-32页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第32-34页 |
| 第二章 基于iTRAQ技术的伪狂犬病毒感染PK-15 细胞差异蛋白质鉴定及筛选 | 第34-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 病毒与细胞 | 第34页 |
| 2.1.2 主要试剂与药品 | 第34-35页 |
| 2.1.3 主要溶液与配置: | 第35页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-40页 |
| 2.2.1 病毒复制周期检测 | 第35-36页 |
| 2.2.2 PRV感染与检测 | 第36页 |
| 2.2.3 蛋白质组学样品制备 | 第36-37页 |
| 2.2.4 蛋白酶解及肽段定量 | 第37-38页 |
| 2.2.5 iTRAQ肽段标记 | 第38页 |
| 2.2.6 SCX分级 | 第38-39页 |
| 2.2.7 高效液相色谱联合串联质谱检测（LC-MS/MS） | 第39页 |
| 2.2.8 质谱数据分析 | 第39-40页 |
| 2.2.9 免疫印迹（Western blot） | 第40页 |
| 2.3 实验结果 | 第40-47页 |
| 2.3.1 PRV感染细胞后病毒增殖检测 | 第40-41页 |
| 2.3.2 SDS-PAGE预实验 | 第41-42页 |
| 2.3.3 蛋白质组数据分析 | 第42页 |
| 2.3.4 差异表达蛋白GO功能注释分析 | 第42-45页 |
| 2.3.5 差异表达蛋白参与的通路分析 | 第45页 |
| 2.3.6 差异表达蛋白的STRING分析 | 第45-47页 |
| 2.3.7 差异表达蛋白数据验证 | 第47页 |
| 2.4 讨论 | 第47-50页 |
| 第三章 PRV高温传代gE缺失株的制备 | 第50-62页 |
| 3.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 3.1.1 病毒与细胞 | 第50页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第50-51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-56页 |
| 3.2.1 PRV JS-2012 的TCID50测定 | 第51页 |
| 3.2.2 PRV病毒传代培养 | 第51页 |
| 3.2.3 传代病毒的蚀斑纯化 | 第51-52页 |
| 3.2.4 PRV JS2012F120病毒的生物学特性分析 | 第52-53页 |
| 3.2.5 PRV JS2012F120病毒基因缺失分析 | 第53-55页 |
| 3.2.6 统计学分析 | 第55-56页 |
| 3.3 实验结果 | 第56-59页 |
| 3.3.1 JS2012F120生长曲线测定 | 第56页 |
| 3.3.2 JS2012F120的蚀斑特性 | 第56-57页 |
| 3.3.3 JS2012F120的CPE特性 | 第57页 |
| 3.3.4 JS2012F120主要基因变异分析 | 第57页 |
| 3.3.5 JS2012F120 gE基因缺失鉴定及序列分析 | 第57-59页 |
| 3.3.6 JS2012F120 gE蛋白表达鉴定 | 第59页 |
| 3.4 讨论 | 第59-62页 |
| 第四章 gE缺失毒株JS2012F120的安全性评价及免疫效力评价 | 第62-70页 |
| 4.1 实验材料 | 第62页 |
| 4.1.1 病毒 | 第62页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第62页 |
| 4.2 实验方法 | 第62-64页 |
| 4.2.1 高温传代不同代次病毒对仔猪的安全性评价 | 第62-63页 |
| 4.2.2 PRV JS2012F120病毒对仔猪的免疫保护力评价 | 第63页 |
| 4.2.3 抗体水平测定 | 第63页 |
| 4.2.4 统计学分析 | 第63-64页 |
| 4.3 实验结果 | 第64-67页 |
| 4.3.1 不同代次病毒对仔猪的安全性实验 | 第64页 |
| 4.3.2 高温传代致弱毒株PRV JS2012F120免疫效力评价 | 第64-67页 |
| 4.4 讨论 | 第67-70页 |
| 全文总结 | 第70-72页 |
| 本研究创新点 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-88页 |
| 附录 | 第88-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 作者简介 | 第98页 |
