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葡萄风信子MYB和bHLH转录因子对花青苷合成的调控研究

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葡萄风信子MYB和bHLH转录因子对花青苷合成的调控研究
论文目录
 
摘要第1-7页
abstract第7-14页
第一章 文献综述第14-27页
  1.1 引言第14-15页
  1.2 植物花色与花青苷第15-17页
  1.3 花青苷合成的转录调控第17-25页
    1.3.1 MYB转录因子概述第17-18页
    1.3.2 bHLH转录因子概述第18-19页
    1.3.3 WD40或WDR蛋白概述第19-20页
    1.3.4 MYB-bHLH-WD40复合物对花色调控研究进展第20-25页
  1.4 葡萄风信子花色研究进展第25页
  1.5 本研究的目的意义第25-27页
第二章 葡萄风信子花色相关R2R3-MYB转录因子基因MaMybA和MaAN2克隆及基本特性分析第27-44页
  2.1 材料第27-28页
    2.1.1 植物材料第27-28页
    2.1.2 载体第28页
    2.1.3 主要试剂和菌株第28页
  2.2 方法第28-31页
    2.2.1 引物设计和基因测序第28页
    2.2.2 植物总RNA提取和cDNA合成第28-29页
    2.2.3 基因克隆第29页
    2.2.4 序列比对和聚类分析第29页
    2.2.5 载体构建第29页
    2.2.6 亚细胞定位第29-30页
    2.2.7 转录激活活性试验第30-31页
    2.2.8 qRT-PCR试验第31页
    2.2.9 葡萄风信子不同组织器官总花青苷相对含量测定第31页
  2.3 结果与分析第31-42页
    2.3.1 葡萄风信子花色相关R2R3-MYB转录因子基因MaMybA的克隆第31-34页
    2.3.2 葡萄风信子花色相关R2R3-MYB转录因子基因MaAN2的克隆第34页
    2.3.3 MaMybA和MaAN2序列分析和聚类分析第34-37页
    2.3.4 MaMybA和MaAN2亚细胞定位分析第37-39页
    2.3.5 MaMybA和MaAN2转录激活活性分析第39页
    2.3.6 葡萄风信子总花青苷相对含量测定和MaMybA、MaAN2转录表达分析第39-41页
    2.3.7 花青苷途径结构基因在葡萄风信子5个花发育时期的转录表达分析第41-42页
  2.4 讨论第42-44页
第三章 葡萄风信子花色相关R2R3-MYB转录因子与bHLH蛋白的互作研究第44-58页
  3.1 材料第44页
    3.1.1 植物材料第44页
    3.1.2 载体第44页
    3.1.3 主要试剂和菌株第44页
  3.2 方法第44-47页
    3.2.1 引物设计和基因测序第44页
    3.2.2 植物总RNA提取和cDNA合成第44页
    3.2.3 基因克隆第44-45页
    3.2.4 序列比对和聚类分析第45页
    3.2.5 亚细胞定位第45页
    3.2.6 转录激活活性试验第45页
    3.2.7 qRT-PCR试验第45页
    3.2.8 双分子荧光互补试验第45-47页
  3.3 结果与分析第47-56页
    3.3.1 葡萄风信子花色相关bHLH转录因子基因MabHLH1的克隆第47页
    3.3.2 MabHLH1序列分析和聚类分析第47-50页
    3.3.3 MabHLH1亚细胞定位和转录激活活性分析第50-52页
    3.3.4 MabHLH1转录表达分析第52页
    3.3.5 MabHLH1与MaMybA的互作验证第52-53页
    3.3.6 MabHLH1与MaAN2的互作验证第53-54页
    3.3.7 AtTT8与MaMybA的互作验证第54-55页
    3.3.8 AtTT8与MaAN2的互作验证第55-56页
  3.4 讨论第56-58页
第四章 葡萄风信子花色相关转录因子MYB-bHLH复合物对花青苷途径结构基因的调控研究第58-66页
  4.1 材料第58页
    4.1.1 植物材料第58页
    4.1.2 载体第58页
    4.1.3 主要试剂和菌株第58页
  4.2 方法第58-61页
    4.2.1 启动子序列分析第58页
    4.2.2 AtPAP1基因克隆第58-59页
    4.2.3 植物基因组DNA的提取和纯化第59页
    4.2.4 AtDFR启动子克隆第59页
    4.2.5 双荧光素酶植物表达载体构建第59-60页
    4.2.6 瞬时转化烟草和荧光素酶活性测定第60-61页
  4.3 结果与分析第61-64页
    4.3.1 葡萄风信子花青苷途径结构基因启动子顺式作用元件分析第61页
    4.3.2 AtTT8与R2R3-MYBs对花青苷途径结构基因的调控分析第61-62页
    4.3.3 MabHLH1与R2R3-MYBs对花青苷途径结构基因的调控分析第62-64页
  4.4 讨论第64-66页
第五章 葡萄风信子MaMybA和MaAN2功能分析第66-84页
  5.1 材料第66页
    5.1.1 植物材料第66页
    5.1.2 载体第66页
    5.1.3 主要试剂和菌株第66页
  5.2 方法第66-70页
    5.2.1 转化烟草的植物表达载体构建第66-67页
    5.2.2 烟草遗传转化第67-68页
    5.2.3 转基因植株的鉴定和培养第68页
    5.2.4 烟草叶片解剖结构观察第68页
    5.2.5 烟草叶片和花冠表皮细胞形态观察第68-69页
    5.2.6 烟草花青苷定性分析第69页
    5.2.7 烟草花青苷含量测定第69-70页
    5.2.8 烟草花青苷结构鉴定第70页
    5.2.9 qRT-PCR试验第70页
  5.3 结果与分析第70-80页
    5.3.1 过量表达MaMybA和MaAN2烟草表型分析第70-73页
    5.3.2 过量表达MaMybA和MaAN2烟草叶片组织解剖结构分析第73-74页
    5.3.3 过量表达MaMybA和MaAN2烟草叶片和花冠表皮细胞形态观察第74页
    5.3.4 过量表达MaMybA和MaAN2烟草叶片和花冠花青苷成分鉴定第74-76页
    5.3.5 过量表达MaMybA和MaAN2烟草叶片和花冠花青苷含量测定第76-77页
    5.3.6 过量表达MaMybA烟草花青苷途径相关基因表达分析第77-79页
    5.3.7 过量表达MaAN2烟草花青苷途径相关基因表达分析第79-80页
  5.4 讨论第80-84页
第六章 结论、创新点和研究展望第84-86页
  6.1 结论第84-85页
  6.2 创新点第85页
  6.3 研究展望第85-86页
参考文献第86-96页
附录第96-103页
缩略词第103-105页
致谢第105-107页
个人简介第107页

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