论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| abstract | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| 1.1 果实的成熟与软化 | 第13-18页 |
| 1.1.1 细胞壁组成及成熟软化过程中的结构变化 | 第13-14页 |
| 1.1.2 细胞壁修饰酶及相关基因研究 | 第14-16页 |
| 1.1.3 柿果实成熟软化研究进展 | 第16-17页 |
| 1.1.4 生长调节剂对果实成熟软化的影响 | 第17-18页 |
| 1.2 木葡聚糖内糖基转移/水解酶（XTH）研究进展 | 第18-24页 |
| 1.2.1 XTHs的结构特征 | 第19页 |
| 1.2.2 XTHs的作用机制 | 第19-22页 |
| 1.2.3 XTHs的生理作用 | 第22-24页 |
| 1.3 本研究的目的意义 | 第24-26页 |
| 第二章 柿XTH基因家族克隆及序列分析 | 第26-38页 |
| 2.1 试验材料与处理 | 第26页 |
| 2.2 试剂与仪器 | 第26页 |
| 2.3 试验方法 | 第26-30页 |
| 2.3.1 柿果实总RNA提取及检测 | 第26-27页 |
| 2.3.2 cDNA第一条链的合成 | 第27-28页 |
| 2.3.3 柿XTH基因全长序列克隆 | 第28-29页 |
| 2.3.4 柿XTH基因生物信息学分析 | 第29-30页 |
| 2.4 结果分析 | 第30-37页 |
| 2.4.1 柿果实总RNA提取 | 第30页 |
| 2.4.2 RT-PCR获得柿XTH基因片段 | 第30-31页 |
| 2.4.3 3’RACE和 5’RACE反应结果 | 第31-32页 |
| 2.4.4 柿XTH基因全长序列获得 | 第32-33页 |
| 2.4.5 柿XTH基因生物信息学分析 | 第33-37页 |
| 2.5 讨论与小结 | 第37-38页 |
| 第三章 柿XTH基因表达模式分析 | 第38-49页 |
| 3.1 试验材料与处理 | 第38-39页 |
| 3.2 试剂与仪器 | 第39页 |
| 3.3 试验方法 | 第39-40页 |
| 3.3.1 果实硬度、呼吸速率及乙烯释放速率测定 | 第39页 |
| 3.3.2 XET活性测定 | 第39-40页 |
| 3.3.3 XTH基因表达分析 | 第40页 |
| 3.3.4 数据处理方法 | 第40页 |
| 3.4 结果分析 | 第40-47页 |
| 3.4.1‘富平尖柿’果实生长发育特征 | 第40-41页 |
| 3.4.2 DkXTH1-8 在柿生长发育过程中的表达特征 | 第41-42页 |
| 3.4.3 DkXTH1-8 基因在柿不同组织中表达特征 | 第42-45页 |
| 3.4.4 不同生长调节剂及冷藏处理对柿果实生理指标的影响 | 第45页 |
| 3.4.5 不同生长调节剂及冷藏处理对DkXTH1和DkXTH8基因表达的影响 | 第45-47页 |
| 3.5 讨论与小结 | 第47-49页 |
| 第四章 柿XTH原核表达和亚细胞定位研究 | 第49-62页 |
| 4.1 试验材料 | 第49页 |
| 4.2 试剂与仪器 | 第49页 |
| 4.3 试验方法 | 第49-54页 |
| 4.3.1 原核表达载体构建 | 第49-51页 |
| 4.3.2 DkXTH1和DkXTH8融合蛋白的诱导表达 | 第51-52页 |
| 4.3.3 亚细胞定位载体构建 | 第52-53页 |
| 4.3.4 基因枪转化洋葱表皮 | 第53-54页 |
| 4.4 结果分析 | 第54-61页 |
| 4.4.1 原核表达载体的构建 | 第54-55页 |
| 4.4.2 融合蛋白诱导表达及可溶性分析 | 第55-57页 |
| 4.4.3 融合蛋白纯化及酶学特性分析 | 第57-59页 |
| 4.4.4 亚细胞定位载体的构建 | 第59页 |
| 4.4.5 DkXTH1和DkXTH8洋葱表皮亚细胞定位 | 第59-61页 |
| 4.5 讨论与小结 | 第61-62页 |
| 第五章 柿DkXTH1基因的功能分析 | 第62-79页 |
| 5.1 试验材料 | 第62页 |
| 5.2 试剂与仪器 | 第62页 |
| 5.3 试验方法 | 第62-66页 |
| 5.3.1 过表达载体DkXTH1-pVBG2307构建与转化 | 第62-64页 |
| 5.3.2 农杆菌侵染拟南芥 | 第64页 |
| 5.3.3 农杆菌侵染番茄 | 第64-65页 |
| 5.3.4 拟南芥逆境胁迫处理 | 第65-66页 |
| 5.3.5 番茄采后贮藏 | 第66页 |
| 5.3.6 显微结构观察 | 第66页 |
| 5.3.7 相关生理指标测定 | 第66页 |
| 5.4 结果分析 | 第66-76页 |
| 5.4.1 过表达载体DkXTH1-pVBG2307构建 | 第66-67页 |
| 5.4.2 转基因拟南芥和番茄植株鉴定 | 第67-68页 |
| 5.4.3 过表达DkXTH1对拟南芥逆境胁迫抗性的影响 | 第68-72页 |
| 5.4.4 过表达DkXTH1延缓番茄果实后熟软化 | 第72-75页 |
| 5.4.5 过表达DkXTH1对拟南芥显微结构的影响 | 第75-76页 |
| 5.4.6 过表达DkXTH1对番茄果实显微结构的影响 | 第76页 |
| 5.5 讨论与小结 | 第76-79页 |
| 第六章 柿DkXTH8基因的功能分析 | 第79-90页 |
| 6.1 试验材料 | 第79页 |
| 6.2 试剂与仪器 | 第79页 |
| 6.3 试验方法 | 第79-80页 |
| 6.3.1 过表达载体DkXTH8- pVBG2307构建与转化 | 第79-80页 |
| 6.3.2 农杆菌侵染拟南芥 | 第80页 |
| 6.3.3 农杆菌侵染番茄 | 第80页 |
| 6.3.4 拟南芥叶片的黑暗诱导衰老 | 第80页 |
| 6.3.5 番茄采后贮藏 | 第80页 |
| 6.3.6 显微结构观察 | 第80页 |
| 6.3.7 生理指标测定 | 第80页 |
| 6.4 结果分析 | 第80-88页 |
| 6.4.1 过表达载体DkXTH8-pVBG2307构建 | 第80-81页 |
| 6.4.2 转基因拟南芥和番茄植株鉴定 | 第81-82页 |
| 6.4.3 过表达DkXTH8促进拟南芥离体叶片衰老 | 第82-84页 |
| 6.4.4 过表达DkXTH8促进番茄果实后熟软化 | 第84-85页 |
| 6.4.5 过表达DkXTH8对拟南芥显微结构的影响 | 第85-87页 |
| 6.4.6 过表达DkXTH8对番茄果实显微结构的影响 | 第87-88页 |
| 6.5 讨论与小结 | 第88-90页 |
| 第七章 结论与创新点 | 第90-91页 |
| 7.1 结论 | 第90页 |
| 7.2 创新点 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-98页 |
| 附录 | 第98-100页 |
| 缩略词 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简介 | 第103-104页 |
