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玉米dek35突变体的基因克隆和功能分析

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玉米dek35突变体的基因克隆和功能分析
论文目录
 
摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
第一章 文献综述第12-22页
  1.1 玉米概述第12-13页
    1.1.1 玉米和玉米籽粒第12-13页
    1.1.2 玉米dek籽粒突变体第13页
  1.2 高等植物的线粒体第13-17页
    1.2.1 线粒体和氧化呼吸链第13-14页
    1.2.2 NADH脱氢酶第14-15页
    1.2.3 线粒体的断裂基因第15-16页
    1.2.4 线粒体是半自主型细胞器第16-17页
  1.3 PPR蛋白家族第17-22页
    1.3.1 PPR的进化第18页
    1.3.2 高等植物中的PPR蛋白第18-19页
    1.3.3 PLS类PPR蛋白主要参与RNA编辑第19-20页
    1.3.4 P类PPR蛋白的多功能调控第20页
    1.3.5 P类PPR蛋白参与RNA剪切第20-22页
第二章 实验材料与方法第22-33页
  2.1 实验材料第22-26页
    2.1.1 生物材料来源第22页
    2.1.2 生化试剂第22-26页
  2.2 实验方法第26-33页
    2.2.1 未成熟籽粒石蜡切片制作第26-27页
    2.2.2 未成熟籽粒树脂切片制作第27-28页
    2.2.3 未成熟籽粒透射电镜观察第28页
    2.2.4 成熟籽粒的扫描电镜观察第28页
    2.2.5 成熟籽粒的蛋白提取第28-29页
    2.2.6 成熟籽粒的淀粉提取第29页
    2.2.7 成熟籽粒的油脂测量第29页
    2.2.8 DNA提取第29-30页
    2.2.9 RNA提取及反转录第30页
    2.2.10 生物信息学分析第30页
    2.2.11 原核表达载体构建第30页
    2.2.12 亚细胞定位第30-31页
    2.2.13 线粒体分离、BN-PAGE及NADH酶活性染色第31-33页
第三章 实验结果与分析第33-50页
  3.1 玉米dek35突变体的表型、生化分析和细胞学观察第33-38页
    3.1.1 dek35突变体的籽粒表型第33-34页
    3.1.2 dek35突变体的籽粒蛋白含量测定第34页
    3.1.3 dek35突变体的籽粒淀粉含量测定和扫描电镜观察第34-35页
    3.1.4 dek35突变体的籽粒油脂含量测定第35-36页
    3.1.5 dek35突变体的石蜡切片观察第36-37页
    3.1.6 dek35突变体的树脂切片观察第37页
    3.1.7 dek35突变体的透射电镜观察第37-38页
  3.2 玉米dek35突变体的基因克隆第38-40页
    3.2.1 Dek35的基因定位和Mutator标签克隆第38-39页
    3.2.2 Dek35候选基因的确认第39-40页
  3.3 玉米Dek35的基因功能分析第40-50页
    3.3.1 Dek35基因的生物信息学分析第40-42页
    3.3.2 Dek35基因的表达第42页
    3.3.3 Dek35基因的亚细胞定位第42-44页
    3.3.4 dek35突变体中DEK35蛋白含量显著减少第44页
    3.3.5 dek35突变体中nad4转录本第一个内含子的剪切效率下降第44-46页
    3.3.6 dek35突变体中呼吸链复合物Ⅰ含量下降第46-48页
    3.3.7 dek35突变体中替代呼吸途径相关的基因表达量上升第48页
    3.3.8 dek35突变体中转录组分析第48-50页
第四章 讨论第50-54页
  4.1 玉米Dek35编码一个新的P类PPR蛋白第50-51页
  4.2 nad4基因的转录后加工对线粒体功能至关重要第51页
  4.3 线粒体功能缺失显著影响籽粒发育第51-54页
参考文献第54-61页
附录Ⅰ dek35转录组数据GO聚类第61-71页
附录Ⅱ 全部引物序列第71-76页
作者在攻读博士学位期间发表的学术论文第76-77页
致谢第77页

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