论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 玉米概述 | 第12-13页 |
1.1.1 玉米和玉米籽粒 | 第12-13页 |
1.1.2 玉米dek籽粒突变体 | 第13页 |
1.2 高等植物的线粒体 | 第13-17页 |
1.2.1 线粒体和氧化呼吸链 | 第13-14页 |
1.2.2 NADH脱氢酶 | 第14-15页 |
1.2.3 线粒体的断裂基因 | 第15-16页 |
1.2.4 线粒体是半自主型细胞器 | 第16-17页 |
1.3 PPR蛋白家族 | 第17-22页 |
1.3.1 PPR的进化 | 第18页 |
1.3.2 高等植物中的PPR蛋白 | 第18-19页 |
1.3.3 PLS类PPR蛋白主要参与RNA编辑 | 第19-20页 |
1.3.4 P类PPR蛋白的多功能调控 | 第20页 |
1.3.5 P类PPR蛋白参与RNA剪切 | 第20-22页 |
第二章 实验材料与方法 | 第22-33页 |
2.1 实验材料 | 第22-26页 |
2.1.1 生物材料来源 | 第22页 |
2.1.2 生化试剂 | 第22-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-33页 |
2.2.1 未成熟籽粒石蜡切片制作 | 第26-27页 |
2.2.2 未成熟籽粒树脂切片制作 | 第27-28页 |
2.2.3 未成熟籽粒透射电镜观察 | 第28页 |
2.2.4 成熟籽粒的扫描电镜观察 | 第28页 |
2.2.5 成熟籽粒的蛋白提取 | 第28-29页 |
2.2.6 成熟籽粒的淀粉提取 | 第29页 |
2.2.7 成熟籽粒的油脂测量 | 第29页 |
2.2.8 DNA提取 | 第29-30页 |
2.2.9 RNA提取及反转录 | 第30页 |
2.2.10 生物信息学分析 | 第30页 |
2.2.11 原核表达载体构建 | 第30页 |
2.2.12 亚细胞定位 | 第30-31页 |
2.2.13 线粒体分离、BN-PAGE及NADH酶活性染色 | 第31-33页 |
第三章 实验结果与分析 | 第33-50页 |
3.1 玉米dek35突变体的表型、生化分析和细胞学观察 | 第33-38页 |
3.1.1 dek35突变体的籽粒表型 | 第33-34页 |
3.1.2 dek35突变体的籽粒蛋白含量测定 | 第34页 |
3.1.3 dek35突变体的籽粒淀粉含量测定和扫描电镜观察 | 第34-35页 |
3.1.4 dek35突变体的籽粒油脂含量测定 | 第35-36页 |
3.1.5 dek35突变体的石蜡切片观察 | 第36-37页 |
3.1.6 dek35突变体的树脂切片观察 | 第37页 |
3.1.7 dek35突变体的透射电镜观察 | 第37-38页 |
3.2 玉米dek35突变体的基因克隆 | 第38-40页 |
3.2.1 Dek35的基因定位和Mutator标签克隆 | 第38-39页 |
3.2.2 Dek35候选基因的确认 | 第39-40页 |
3.3 玉米Dek35的基因功能分析 | 第40-50页 |
3.3.1 Dek35基因的生物信息学分析 | 第40-42页 |
3.3.2 Dek35基因的表达 | 第42页 |
3.3.3 Dek35基因的亚细胞定位 | 第42-44页 |
3.3.4 dek35突变体中DEK35蛋白含量显著减少 | 第44页 |
3.3.5 dek35突变体中nad4转录本第一个内含子的剪切效率下降 | 第44-46页 |
3.3.6 dek35突变体中呼吸链复合物Ⅰ含量下降 | 第46-48页 |
3.3.7 dek35突变体中替代呼吸途径相关的基因表达量上升 | 第48页 |
3.3.8 dek35突变体中转录组分析 | 第48-50页 |
第四章 讨论 | 第50-54页 |
4.1 玉米Dek35编码一个新的P类PPR蛋白 | 第50-51页 |
4.2 nad4基因的转录后加工对线粒体功能至关重要 | 第51页 |
4.3 线粒体功能缺失显著影响籽粒发育 | 第51-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
附录Ⅰ dek35转录组数据GO聚类 | 第61-71页 |
附录Ⅱ 全部引物序列 | 第71-76页 |
作者在攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |