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宿主NSF在苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒入侵与出芽释放中的作用

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宿主NSF在苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒入侵与出芽释放中的作用
论文目录
 
摘要第1-7页
abstract第7-10页
第一章 文献综述第10-34页
  1.1 SNARE膜融合系统的组成第10-18页
    1.1.1 SNARE蛋白的结构与类型第10-13页
    1.1.2 NSF与α-SNAP蛋白的结构与功能第13-18页
  1.2 SNARE介导膜融合的分子机制第18-20页
  1.3 SNARE膜融合系统与病毒侵染第20-23页
  1.4 杆状病毒简介第23-33页
    1.4.1 杆状病毒表型及其侵染循环第23-24页
    1.4.2 杆状病毒基因组结构及其分类第24-25页
    1.4.3 出芽型病毒粒子BV的侵染循环第25-28页
    1.4.4 杆状病毒的基因表达第28页
    1.4.5 杆状病毒的应用第28-33页
  1.5 选题目的及意义第33-34页
第二章 材料与方法第34-52页
  2.1 实验材料第34-37页
    2.1.1 昆虫细胞、菌株与质粒第34页
    2.1.2 试剂盒及相关试剂第34-36页
    2.1.3 细菌培养基及其它试剂的配置第36-37页
  2.2 实验方法第37-52页
    2.2.1 昆虫SNARE蛋白注释第37-38页
    2.2.2 细胞转染与感染第38页
    2.2.3 NSF基因转录分析第38-39页
    2.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备第39-40页
    2.2.5 细胞总RNA提取第40页
    2.2.6 草地贪夜蛾NSF基因克隆第40-43页
    2.2.7 NSF突变体及其表达质粒、重组ACMNPV bacmid构建第43-45页
    2.2.8 细胞活性测定第45页
    2.2.9 缺失-补偿实验第45-46页
    2.2.10 RNA干扰第46-47页
    2.2.11 AcMNPV基因表达与基因组DNA复制检测第47页
    2.2.12 AcMNPV入侵分析第47-48页
    2.2.13 AcMNPV出芽释放分析第48页
    2.2.14 激光共聚焦显微镜分析第48页
    2.2.15 cELISA、免疫荧光与嵌合体形成分析第48-49页
    2.2.16 透射电子显微镜观察第49页
    2.2.17 免疫共沉淀第49-50页
    2.2.18 双分子荧光互补第50页
    2.2.19 出芽病毒粒子纯化第50页
    2.2.20 Western blot分析第50-51页
    2.2.21 基因序列登录号第51-52页
第三章 结果与分析第52-89页
  3.1 昆虫SNARE系统组成基因注释第52-56页
  3.2 SNARE基因在AcMNPV病毒侵染过程中的表达谱分析第56-59页
  3.3 草地贪夜蛾NSF基因克隆及其编码蛋白的三级结构分析第59-64页
  3.4 NSF及其突变体的表达第64-66页
  3.5 过表达NSF显性-负性突变体及RNAi下调NSF蛋白表达对AcMNPV感染性病毒粒子产生的影响第66-69页
  3.6 过表达NSF显性-负性突变体对AcMNPV侵染早期阶段的影响第69-71页
  3.7 过表达NSF显性-负性突变体影响AcMNPV BV入侵宿主细胞第71-73页
  3.8 AcMNPV感染性病毒粒子的出芽释放依赖于NSF第73-76页
  3.9 AcMNPV囊膜蛋白GP64在细胞表面的定位依赖于宿主NSF第76-78页
  3.10 AcMNPV子代病毒核衣壳从核膜释放依赖于NSF第78-82页
  3.11 NSF与AcMNPV侵染关键蛋白的互作第82-87页
  3.12 NSF存在于AcMNPV出芽病毒粒子中第87-89页
第四章 讨论第89-95页
  4.1 AcMNPV BV的入侵需要NSF第90-91页
  4.2 AcMNPV子代核衣壳经核膜释放需要NSF第91-95页
参考文献第95-109页
附录第109-111页
致谢第111-112页
作者简介第112页

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