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禾谷镰刀菌产毒性与致病力的相关性及毒素化学型的分子鉴定

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禾谷镰刀菌产毒性与致病力的相关性及毒素化学型的分子鉴定
论文目录
 
中文摘要第1-10页
Abstract第10-13页
缩略词表第13-14页
文献综述第14-39页
1 镰刀菌与赤霉第14-16页
  1.1 镰刀菌的种类与分布第14-15页
  1.2 赤霉病的病害循环第15-16页
2 镰刀菌毒素的主要类型及毒性第16-21页
  2.1 单端孢霉烯毒素第17-18页
  2.2 玉米赤霉烯酮第18-20页
  2.3 伏马菌素第20-21页
3 主要镰刀菌毒素的生物合成第21-29页
  3.1 单端孢霉烯毒素的生物合成第21-26页
  3.2 ZEN的生物合成第26-27页
  3.3 伏马菌素的生物合成第27-29页
4 镰刀菌毒素的检测第29-39页
  4.1 生物检测法第29页
  4.2 化学检测法第29-30页
  4.3 免疫学检测法第30页
  4.4 分子检测第30-39页
第一章 禾谷镰刀菌致病力及产毒性分析第39-69页
1 前言第39-41页
2 材料和方法第41-45页
  2.1 材料第41-42页
    2.1.1 菌株第41页
    2.1.2 植物材料第41页
    2.1.3 培养基及试剂第41-42页
    2.1.4 主要仪器设备第42页
  2.2 方法第42-45页
    2.2.1 接种孢子液的制备第42页
    2.2.2 接种方法第42-43页
      2.2.2.1 小麦和大麦的接种第42页
      2.2.2.2 玉米接种第42-43页
    2.2.3 调查方法第43页
      2.2.3.1 接种小麦和大麦的调查第43页
      2.2.3.2 接种玉米的调查第43页
    2.2.4 小麦赤霉病流行年份的病情及毒素分析第43-45页
3 结果与分析第45-67页
  3.1 接种小麦品种安农8455的致病力和产毒性分析第46-51页
    3.1.1 大田接种安农8455的致病力和产毒性分析第46-49页
      3.1.1.1 大田接种安农8455的致病力分析第46-47页
      3.1.1.2 大田接种安农8455的产毒量分析第47页
      3.1.1.3 大田接种安农8455菌株致病力与产毒量相关性分析第47-49页
    3.1.2 大棚内接种安农8455的致病力和产毒性分析第49-51页
      3.1.2.1 大棚内接种安农8455的致病力分析第49页
      3.1.2.2 大棚内接种安农8455的产毒量分析第49-50页
      3.1.2.3 大棚内接种安农8455菌株致病力与产毒量相关性分析第50-51页
  3.2 接种苏麦3号的致病力和产毒性分析第51-54页
    3.2.1 接种苏麦3号的致病力分析第51-52页
    3.2.2 接种苏麦3号的产毒量分析第52-53页
    3.2.3 接种苏麦3号的致病力与产毒量相关性分析第53-54页
  3.3 接种大麦鄂32380的致病力和产毒性分析第54-57页
    3.3.1 接种大麦鄂32380的致病力分析第54-55页
    3.3.2 接种鄂大麦32380的产毒量分析第55-56页
    3.3.3 接种大麦鄂32380的致病力与产毒量相关性分析第56-57页
  3.4 接种大麦鄂9的致病力和产毒性分析第57-59页
    3.4.1 接种大麦鄂9的致病力分析第57页
    3.4.2 接种大麦鄂9的产毒量分析第57-58页
    3.4.3 接种大麦鄂9的致病力与产毒量相关性分析第58-59页
  3.5 接种玉米品种郑单958的致病力和产毒性分析第59-63页
    3.5.1 接种郑单958的致病力分析第59-60页
    3.5.2 接种郑单958的产毒量分析第60-61页
    3.5.3 接种郑单958的致病力与产毒量相关性分析第61-63页
  3.6 小麦赤霉病流行年份的病情及毒素含量分析第63-67页
    3.6.1 小麦赤霉病病情统计结果第63-64页
    3.6.2 小麦样品中的毒素含量分析第64-65页
    3.6.3 小麦赤霉病发病程度与毒素含量的相关性分析第65-67页
4 讨论第67-69页
第二章 镰刀菌产毒类型分子及化学检测第69-110页
1 前言第69页
2 材料和方法第69-82页
  2.1 材料第69-70页
    2.1.1 菌株第69-70页
    2.1.2 培养基及试剂第70页
    2.1.3 主要仪器设备第70页
  2.2 方法第70-82页
    2.2.1 镰刀菌的分离及纯化第70-71页
    2.2.2 菌株培养及DNA提取第71页
    2.2.3 引物设计及合成第71-75页
      2.2.3.1 菌种鉴定所用的引物第71-72页
      2.2.3.2 A类单端孢霉烯毒素菌株特异引物的设计及合成第72页
      2.2.3.3 B类单端孢霉烯毒素菌株特异引物的设计及合成第72-73页
      2.2.3.4 产ZEN毒素菌株特异引物的设计及合成第73-75页
    2.2.4 镰刀菌菌种的鉴定第75-78页
      2.2.4.1 禾谷镰刀菌的鉴定及SCAR类型分析第75页
      2.2.4.2 其它类型镰刀菌种的鉴定第75-78页
    2.2.5 镰刀菌产毒类型分子鉴定第78-80页
      2.2.5.1 产A类毒素菌株的PCR鉴定第78页
      2.2.5.2 产B类毒素菌株的PCR鉴定第78-80页
        2.2.5.2.1 Tri13-P1/2鉴定禾谷镰刀菌毒素化学型第78页
        2.2.5.2.2 多重PCR鉴定禾谷镰刀菌毒素化学型第78-79页
        2.2.5.2.3 DON和NIV毒素化学型的PCR验证第79页
        2.2.5.2.4 DON毒素衍生类型的PCR验证第79-80页
      2.2.5.3 产ZEN毒素菌株的PCR鉴定第80页
    2.2.6 镰刀菌毒素的诱导培养第80页
      2.2.6.1 A类单端孢霉烯毒素的诱导培养第80页
      2.2.6.2 B类毒素的诱导培养第80页
      2.2.6.3 ZEN毒素的诱导培养第80页
    2.2.7 镰刀菌毒素的提取及化学检测第80-82页
      2.2.7.1 毒素的提取及纯化第80-81页
      2.2.7.2 毒素的GC/MS检测第81-82页
3 结果与分析第82-105页
  3.1 镰刀菌的鉴定第82页
  3.2 A类单端孢霉烯毒素的分子及化学检测第82-83页
    3.2.1 利用引物对T2-P1/2鉴定的结果第82-83页
    3.2.2 A类毒素的化学检测第83页
  3.3 B类毒素的分子及化学检测第83-100页
    3.3.1 Tri13-P1/2鉴定体系的建立第84-89页
      3.3.1.1 引物对Tri13-P1/2的PCR鉴定结果第84-87页
      3.3.1.2 Tri13产物的聚类分析第87-89页
    3.3.2 多重PCR鉴定体系的建立及应用第89-96页
      3.3.2.1 多重PCR鉴定方法的建立第89-90页
      3.3.2.2 Tri11扩增序列聚类分析第90-92页
      3.3.2.3 多重PCR鉴定策略的应用第92-96页
        3.3.2.3.1 玉米上禾谷镰刀菌的鉴定及SCAR类型分析第92-94页
        3.3.2.3.2 玉米上的禾谷镰刀菌毒素化学型分析第94-96页
    3.3.3 B类单端孢霉烯毒素的化学检测第96页
    3.3.4 新3-AcDON菌株的发现及鉴定第96-100页
      3.3.4.1 新3-AcDON菌株的发现第96-98页
      3.3.4.2 新3-AcDON菌株的鉴定第98-100页
  3.4 ZEN毒素的分子及化学检测第100-102页
    3.4.1 利用引物对PKS4-P1/2的鉴定结果第100-101页
    3.4.2 利用引物对PKS13-P1/2的鉴定结果第101-102页
    3.4.3 ZEN毒素的化学检测第102页
  3.5 镰刀菌Tri13基因全长的聚类分析第102-105页
4 讨论第105-110页
  4.1 A类毒素分子鉴定第105-107页
  4.2 禾谷镰刀菌毒素化学型的分子检测第107页
    4.2.1 Tri13-P1/2的适用范围第107页
    4.2.2 多重PCR鉴定体系的优越性第107页
  4.3 新型3-AcDON菌株的分布第107-108页
  4.4 湖北玉米上禾谷镰刀菌的群体结构第108-109页
  4.5 ZEN分子检测第109-110页
参考文献第110-126页
致谢第126-127页
附录第127页

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