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响应乙烯的HD-Zip家族成员RhHB2在月季花朵开放过程中的功能分析

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响应乙烯的HD-Zip家族成员RhHB2在月季花朵开放过程中的功能分析
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-8页
缩略词表第8-13页
第一章 文献综述第13-25页
  1.1 乙烯是影响月季切花损耗的关键因素第13-14页
    1.1.1 月季是全球最重要的切花之一第13页
    1.1.2 月季切花采后损耗是月季产业发展中亟待解决的问题第13-14页
    1.1.3 乙烯对月季花朵开放品质具有重要影响第14页
  1.2 花瓣细胞扩展是花朵开放品质的重要决定因素第14-18页
    1.2.1 花朵开放品质的形成主要依赖花瓣扩展第14-15页
    1.2.2 花瓣细胞扩展的调节机制第15-16页
    1.2.3 乙烯参与植物细胞扩展的调节第16-17页
    1.2.4 乙烯调节植物细胞扩展的机理第17-18页
  1.3 转录因子是乙烯作用机制中的重要组分第18-22页
    1.3.1 乙烯信号转导途径第18-20页
    1.3.2 转录因子概述第20-21页
    1.3.3 与乙烯合成和信号相关的转录因子第21-22页
  1.4 HD-Zip转录因子可能参与乙烯调节的细胞扩展第22-24页
    1.4.1 HD-Zip转录因子概述第22-24页
    1.4.2 HD-Zip转录因子与乙烯第24页
  1.5 研究思路第24页
  1.6 本研究的目的与意义第24-25页
第二章 RhHB2基因的表达特性和蛋白生化特性分析第25-50页
  2.1 材料与方法第25-38页
    2.1.1 植物材料及处理第25-26页
    2.1.2 月季花瓣RNA提取及基因组DNA提取第26-28页
    2.1.3 反转录PCR与实时荧光定量PCR第28-30页
    2.1.4 大肠杆菌感受态的制备及转化第30-32页
    2.1.5 RhHB2基因全长及启动子的克隆第32-33页
    2.1.6 质粒的提取第33-34页
    2.1.7 相关载体及载体构建引物第34-35页
    2.1.8 基因枪法转化洋葱表皮细胞第35-36页
    2.1.9 酵母感受态细胞的制备及转化第36页
    2.1.10 转录激活检测第36-37页
    2.1.11 农杆菌感受态细胞制备及转化第37-38页
  2.2 结果与分析第38-49页
    2.2.1 RhHB2基因的筛选与克隆第38-41页
    2.2.2 RhHB2基因的表达特性分析第41-44页
    2.2.3 RhHB2蛋白的亚细胞定位第44-45页
    2.2.4 RhHB2蛋白的转录激活活性分析第45-46页
    2.2.5 RhHB2蛋白的二聚化分析第46-47页
    2.2.6 RhHB2基因启动子的克隆及顺式作用元件分析第47-48页
    2.2.7 RhHB2基因启动子载体的构建及转化拟南芥第48-49页
  2.3 小结第49-50页
第三章 沉默RhHB2对月季花朵开放和花瓣扩展的影响第50-59页
  3.1 材料与方法第50-52页
    3.1.1 VIGS载体构建及下游基因检测引物第50-51页
    3.1.2 VIGS第51-52页
    3.1.3 花枝、花瓣面积计算及花朵开放进程统计第52页
    3.1.4 显微观察与细胞计数第52页
    3.1.5 花瓣圆片衰老观察及统计第52页
  3.2 结果与分析第52-58页
    3.2.1 沉默载体的构建第52-53页
    3.2.2 月季中RhHB2基因沉默的检测第53-54页
    3.2.3 沉默RhHB2对月季花朵开放的影响第54页
    3.2.4 沉默RhHB2对月季花瓣扩展的影响第54-55页
    3.2.5 沉默RhHB2对月季花瓣衰老的影响第55-56页
    3.2.6 RhHB2沉默花瓣中与细胞扩展相关的潜在下游基因的表达分析第56-58页
  3.3 小结第58-59页
第四章 RhHB2在拟南芥中的过表达对植株生长的影响第59-76页
  4.1 材料与方法第59-63页
    4.1.1 植物材料培养第59页
    4.1.2 拟南芥遗传转化第59-60页
    4.1.3 拟南芥RhHB2异源过表达株系的筛选第60页
    4.1.4 拟南芥RNA提取、DNA消化及下游基因检测引物第60-62页
    4.1.5 转基因植株表型观察及统计第62页
    4.1.6 花瓣表皮细胞固定和观察第62页
    4.1.7 转基因植株黄化苗下胚轴长度统计第62页
    4.1.8 各种处理条件下转基因植株成活率统计第62-63页
  4.2 结果与分析第63-75页
    4.2.1 过表达载体的构建及转基因植株的筛选第63页
    4.2.2 拟南芥转RhHB2基因植株表型观测第63-68页
    4.2.3 不同处理下转基因植株的特性分析第68-72页
    4.2.4 拟南芥过表达植株中与细胞分裂和扩展相关的潜在下游基因的表达分析第72-75页
  4.3 小结第75-76页
第五章 讨论与结论第76-79页
  5.1 讨论第76-78页
    5.1.1 RhHB2基因的表达受乙烯显著诱导第76页
    5.1.2 RhHB2可能调节了细胞分裂和扩展相关基因的表达第76-77页
    5.1.3 RhHB2与RhHB1具有不同的转录调节机制第77-78页
  5.2 结论第78-79页
参考文献第79-86页
致谢第86-87页
个人简历第87页

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