论文目录 | |
摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
缩略词 | 第13-15页 |
上篇 水稻种子腹白突变体wbe1的基因克隆和功能研究 | 第15-71页 |
第一章 文献综述 | 第15-33页 |
第一节 水稻种子贮藏蛋白的研究进展 | 第15-25页 |
1.1 水稻种子贮藏蛋白的组成 | 第15-16页 |
1.2 水稻种子胚乳中贮藏蛋白的分布 | 第16-18页 |
1.2.1 一型蛋白体的结构 | 第16-17页 |
1.2.2 二型蛋白体的组成及形成途径 | 第17-18页 |
1.3 水稻贮藏蛋白基因及其表达调控 | 第18-22页 |
1.3.1 水稻谷蛋白基因家族及球蛋白基因 | 第18-19页 |
1.3.2 水稻醇溶蛋白基因家族 | 第19-21页 |
1.3.3 水稻贮藏蛋白基因的表达调控 | 第21-22页 |
1.4 水稻贮藏蛋白mRNA的定位 | 第22-23页 |
1.5 水稻贮藏蛋白分选缺陷突变体的研究概况 | 第23-25页 |
第二节 植物贮藏蛋白囊泡转运机理的研究进展 | 第25-28页 |
2.1 内质网和高尔基体之间的囊泡转运 | 第26页 |
2.2 贮藏蛋白的后高尔基体转运 | 第26-27页 |
2.3 非高尔基体依赖的囊泡转运 | 第27-28页 |
第三节 植物支链氨基酸转氨酶的研究进展 | 第28-31页 |
第四节 本研究的目的与意义 | 第31-33页 |
第二章 水稻种子腹白基因WBE1的图位克隆及功能的初步研究 | 第33-61页 |
1 材料和方法 | 第34-44页 |
1.1 植物材料 | 第34页 |
1.2 生理生化指标的测定 | 第34-35页 |
1.2.1 籽粒直链淀粉含量测定 | 第34页 |
1.2.2 籽粒总蛋白和脂肪含量测定 | 第34-35页 |
1.2.3 籽粒总淀粉含量测定 | 第35页 |
1.2.4 支链淀粉链长分布检测 | 第35页 |
1.3 种子千粒重及干物质积累测定 | 第35-36页 |
1.4 成熟种子断面的扫描电镜观察 | 第36页 |
1.5 胚乳透射电镜观察 | 第36页 |
1.6 胚乳半薄切片制备和淀粉颗粒碘染 | 第36-37页 |
1.7 种子腹部胚乳中总蛋白提取 | 第37页 |
1.8 SDS-PAGE凝胶电泳分离种子贮藏蛋白 | 第37-38页 |
1.9 Western杂交分析 | 第38-39页 |
1.10 突变基因定位 | 第39-41页 |
1.10.1 极端个体筛选 | 第39页 |
1.10.2 植物总DNA提取-SDS法 | 第39-40页 |
1.10.3 分子标记的扩增 | 第40页 |
1.10.4 非变性PAGE凝胶鉴检测PCR产物 | 第40-41页 |
1.10.5 标记筛选及定位 | 第41页 |
1.11 候选基因预测和测序 | 第41页 |
1.12 RNA提取 | 第41-42页 |
1.13 Real-time PCR | 第42页 |
1.14 基因互补载体构建 | 第42页 |
1.15 亚细胞定位载体构建 | 第42-43页 |
1.16 转基因阳性植株鉴定 | 第43页 |
1.17 酵母双杂交分析 | 第43-44页 |
2 结果与分析 | 第44-56页 |
2.1 wbe1突变体的表型分析 | 第44-46页 |
2.2 wbe1突变体生理生化性状分析 | 第46-47页 |
2.3 WBE1突变影响种子贮藏蛋白含量和干物质积累 | 第47-48页 |
2.4 wbe1突变体中存在异常的复合淀粉粒结构 | 第48页 |
2.5 wbe1突变体胚乳细胞的亚细胞结构存在异常 | 第48-50页 |
2.6 WBE1的图位克隆 | 第50-52页 |
2.7 转基因互补验证 | 第52-53页 |
2.8 WBE1的时空表达特性及亚细胞定位 | 第53-55页 |
2.9 wbe1突变体胚乳细胞中发生内质网胁迫 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
4 全文总结 | 第58-60页 |
4.1 wbe1是一个新的贮藏蛋白突变体 | 第59页 |
4.2 wbe1腹部胚乳中造粉体发育异常 | 第59页 |
4.3 WBE1编码一个包含转氨酶结构域的蛋白 | 第59页 |
4.4 wbe1突变体胚乳细胞中发生严重内质网胁迫 | 第59-60页 |
5 本研究的创新之处 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-71页 |
下篇 水稻白条纹叶基因WSL3(White-Stripe Leaf3)的图位克隆和功能分析 | 第71-113页 |
第一章 文献综述 | 第71-87页 |
1 水稻叶色突变体来源和分类 | 第71-72页 |
1.1 水稻叶色突变体来源 | 第71-72页 |
1.2 水稻叶色突变体的分类 | 第72页 |
2 水稻叶色突变的分子机制 | 第72-84页 |
2.1 叶绿素的生物合成和相关基因的研究 | 第72-77页 |
2.1.1 叶绿素生物合成限速酶基因 | 第76-77页 |
2.1.2 其他叶绿素生物合成相关基因 | 第77页 |
2.2 叶绿素降解途径和相关基因的研究 | 第77-79页 |
2.3 叶绿体发育途径和相关基因的研究 | 第79-83页 |
2.3.1 核基因转录途径相关基因克隆 | 第80页 |
2.3.2 叶绿体蛋白的输入和加工途径相关基因克隆 | 第80-81页 |
2.3.3 叶绿体基因的转录与翻译途径相关基因克隆 | 第81-82页 |
2.3.4 叶绿体蛋白的折叠与降解途径相关基因克隆 | 第82-83页 |
2.3.5 类囊体形成和色素合成途径相关基因克隆 | 第83页 |
2.3.6 核-质信号途径相关基因克隆 | 第83页 |
2.4 其他叶色基因的克隆 | 第83-84页 |
3 叶色突变体的应用 | 第84页 |
4 HD超家族蛋白的研究进展 | 第84-85页 |
5 本研究的目的与意义 | 第85-87页 |
第二章 水稻白条纹叶基因WSL3(White-Stripe Leaf3)的图位克隆和功能分析 | 第87-102页 |
1 材料方法 | 第88-89页 |
1.1 植物材料 | 第88页 |
1.2 wsl3的表型观察 | 第88页 |
1.3 透射电镜观察叶绿体超微结构 | 第88页 |
1.4 遗传分析 | 第88页 |
1.5 wsl3的定位分析 | 第88-89页 |
1.5.1 极端个体筛选 | 第88页 |
1.5.2 叶片总DNA提取-SDS法 | 第88-89页 |
1.5.3 非变性PAGE凝胶鉴定分子标记 | 第89页 |
1.5.4 标记筛选及定位 | 第89页 |
1.6 候选基因预测和测序 | 第89页 |
1.7 RNA提取和Real-time PCR | 第89页 |
1.8 基因互补载体构建 | 第89页 |
1.9 转基因阳性植株鉴定 | 第89页 |
2 结果与分析 | 第89-98页 |
2.1 水稻白条纹叶突变体wsl3的表型分析 | 第89-91页 |
2.2 苗期wsl3的叶绿体超微结构观察 | 第91页 |
2.3 wsl3的精细定位 | 第91页 |
2.4 定位区间的基因预测及测序 | 第91-96页 |
2.5 wsl3转基因互补及干扰实验 | 第96-97页 |
2.6 抽穗期WSL3的表达模式分析 | 第97-98页 |
2.7 突变体wsl3中叶绿素合成相关基因的表达分析 | 第98页 |
3 讨论 | 第98-100页 |
4 全文总结 | 第100-101页 |
4.1 突变体wsl3是一个新的叶色突变体 | 第100页 |
4.2 WSL3突变影响了叶绿体的发育和叶绿素的合成 | 第100-101页 |
5 本研究的创新之处 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-113页 |
附录 | 第113-121页 |
在读期间发表论文 | 第121-123页 |
致谢 | 第123页 |