论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 上篇 文献综述 | 第11-32页 |
| 第一章 梨树腐烂病的研究进展 | 第12-20页 |
| 1. 梨树腐烂病病害发生与危害 | 第12-13页 |
| 2. 梨树腐烂病分布 | 第13页 |
| 3. 影响梨树腐烂病发生与传播因素 | 第13-15页 |
| 4. 梨树腐烂病病原菌鉴定 | 第15页 |
| 5. 梨树腐烂病菌致病力差异 | 第15-16页 |
| 6. 梨树腐烂病菌与梨树相互作用研究进展 | 第16-17页 |
| 7. 梨树腐烂病的综合防治策略 | 第17-18页 |
| 8. 展望 | 第18-20页 |
| 第二章 真菌转录因子的研究进展 | 第20-32页 |
| 1. 真菌转录因子种类 | 第21-23页 |
| 2. 转录因子调控真菌生长与菌丝形态 | 第23-25页 |
| 3. 转录因子调控真菌的发育过程与次生代谢 | 第25-26页 |
| 4. 转录因子影响真菌的细胞壁完整性 | 第26-27页 |
| 5. 转录因子参与应答真菌非生物胁迫 | 第27-28页 |
| 6. 转录因子参与真菌致病过程 | 第28-29页 |
| 7. 转录因子参与真菌信号传导途径 | 第29-30页 |
| 8. 展望 | 第30-32页 |
| 下篇 研究内容 | 第32-100页 |
| 第一章 梨树腐烂病菌的比较转录组分析 | 第34-58页 |
| 1. 材料与方法 | 第37-40页 |
| 1.1 用于转录组测序的样品准备 | 第37页 |
| 1.2 RNA提取与转录组测序 | 第37页 |
| 1.3 基因的表达分析 | 第37-38页 |
| 1.4 无参考基因组的De novo拼接 | 第38页 |
| 1.5 基因的功能注释与分类 | 第38页 |
| 1.6 进化树分析 | 第38页 |
| 1.7 转录本的丰度分析 | 第38-39页 |
| 1.8 特异基因注释分类 | 第39-40页 |
| 2. 结果分析 | 第40-55页 |
| 2.1 转录组Reads的De novo拼接 | 第40-42页 |
| 2.2 梨树腐烂病菌的进化地位与GO功能注释 | 第42-44页 |
| 2.3 梨树腐烂病菌中致病相关基因反应其死体营养特性 | 第44-46页 |
| 2.4 梨树腐烂病菌侵染寄主期间的转录调控 | 第46-48页 |
| 2.5 Vp14菌株更利于对糖的利用 | 第48-49页 |
| 2.6 Vp14表达更多的蛋白酶基因 | 第49-51页 |
| 2.7 膜转运子的大量表达是梨树腐烂病菌的一种普遍侵染策略 | 第51-53页 |
| 2.8 Vp297中表达具有更多的信号传导相关的基因 | 第53-55页 |
| 3 讨论与结论 | 第55-58页 |
| 第二章 梨树腐烂病菌遗传转化体系建立 | 第58-64页 |
| 1 实验材料与方法 | 第59页 |
| 1.1 实验材料 | 第59页 |
| 1.2 原生质体制备条件的确定与遗传转化体系的优化 | 第59页 |
| 1.3 梨树腐烂病菌对抗生素临界耐受浓度 | 第59页 |
| 1.4 转化子的验证 | 第59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-62页 |
| 2.1 筛选标记的选择 | 第60页 |
| 2.2 原生质体的制备 | 第60-61页 |
| 2.3 遗传转化过程 | 第61-62页 |
| 2.4 转化子的验证 | 第62页 |
| 3 讨论与结论 | 第62-64页 |
| 第三章 真菌特异转录因子VpPf2的功能研究 | 第64-78页 |
| 1 材料与方法 | 第66-69页 |
| 1.1 真菌的分离与培养 | 第66页 |
| 1.2 构建VpPf2的敲除转化子 | 第66-67页 |
| 1.3 构建Pf2ko突变体的回补菌株 | 第67-68页 |
| 1.4 基因表达分析 | 第68页 |
| 1.5 致病性测试 | 第68页 |
| 1.6 VpP2的菌丝形态差异 | 第68-69页 |
| 2 结果分析 | 第69-74页 |
| 2.1 生物信息学鉴定梨树腐烂病菌的VpPf2 | 第69-71页 |
| 2.2 建构梨VpPf2敲除突变体 | 第71-72页 |
| 2.3 VpPf2调控制梨树腐烂病菌分生孢子器形成与菌丝形态 | 第72页 |
| 2.4 VpPf2ko突变体致病性降低 | 第72-74页 |
| 2.5 VpPf2负调控梨树腐烂病菌对细胞壁胁迫反应 | 第74页 |
| 3 讨论 | 第74-78页 |
| 第四章 转录因子VpCRZ1的功能研究 | 第78-100页 |
| 1. 材料与方法 | 第80-84页 |
| 1.1 真菌的分离与培养 | 第80-81页 |
| 1.2 构建VpCRZ1的敲除转化子 | 第81页 |
| 1.3 构建△VpCRZ1突变体的回补菌株 | 第81-83页 |
| 1.4 PEG介导的梨树腐烂病菌遗传转化体系 | 第83页 |
| 1.5 基因表达分析 | 第83-84页 |
| 1.6 致病性测试 | 第84页 |
| 1.7 VpCRZ1的亚细胞定位及菌丝形态差异 | 第84页 |
| 2. 结果分析 | 第84-94页 |
| 2.1 生物信息学鉴定梨树腐烂病菌的VpCRZ1 | 第84-86页 |
| 2.2 建构VpCRZ1敲除突变体 | 第86-87页 |
| 2.3 VpCRZ1调控制梨树腐烂病菌分生孢子器形成与菌丝形态 | 第87-88页 |
| 2.4 VpCRZ1是梨树腐烂病菌致病过程所必不可少的重要调控因子 | 第88-90页 |
| 2.5 VpCRZ1负调控梨树腐烂病菌对细胞壁胁迫反应 | 第90-91页 |
| 2.6 VpCRZ1影响应答依赖磷酸酶相关基因以及抗刚果红基因的的表达 | 第91-92页 |
| 2.7 VpCRZ1依赖Ca2+方式定位于细胞核 | 第92-94页 |
| 3. 讨论 | 第94-100页 |
| 全文总结与创新点 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-114页 |
| 附录 | 第114-118页 |
| 攻读博士期间发表或待发表的论文 | 第118-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
