论文目录 | |
摘要 | 第1-5页 |
abstract | 第5-10页 |
第一章 前言 | 第10-12页 |
1.1 研究背景 | 第10页 |
1.2 研究内容 | 第10-12页 |
第二章 文献综述 | 第12-30页 |
2.1 类胡萝卜素 | 第12-14页 |
2.1.1 类胡萝卜素的结构和功能 | 第12-13页 |
2.1.2 植物类胡萝卜素代谢 | 第13-14页 |
2.2 脱辅基类胡萝卜素(Apocarotenoids) | 第14-18页 |
2.2.1 脱辅基类胡萝卜素的功能 | 第15页 |
2.2.2 脱辅基类胡萝卜素的产生 | 第15-17页 |
2.2.3 CCDs的结构 | 第17-18页 |
2.3 植物CCDs的主要功能 | 第18-28页 |
2.3.1 类胡萝卜素裂解双加氧酶(CCDs) | 第18-24页 |
2.3.2 9-顺式-环氧类胡萝卜素双氧合酶(NCEDs) | 第24-28页 |
2.4 结语 | 第28-30页 |
第三章 枸杞LcCCD1与LcCCD4基因的克隆及表达分析 | 第30-72页 |
3.1 实验材料和设备 | 第30-34页 |
3.1.1 植物材料 | 第30页 |
3.1.2 质粒和菌株 | 第30-31页 |
3.1.3 PCR所用引物 | 第31-32页 |
3.1.4 主要实验仪器 | 第32页 |
3.1.5 实验所用培养基 | 第32-33页 |
3.1.6 实验所用主要试剂 | 第33页 |
3.1.7 实验主要溶液的配制 | 第33-34页 |
3.2 实验方法 | 第34-45页 |
3.2.1 基本的分子生物学操作 | 第34-37页 |
3.2.2 LcCCD1基因cDNA序列的获得 | 第37-39页 |
3.2.3 枸杞LcCCD4基因的克隆 | 第39页 |
3.2.4 枸杞LcCCD1基因的表达 | 第39-42页 |
3.2.5 枸杞LcCCD4基因的表达 | 第42页 |
3.2.6 枸杞LcCCD1基因在烟草中的表达 | 第42-45页 |
3.3 结果分析 | 第45-67页 |
3.3.1 枸杞总RNA的提取 | 第45页 |
3.3.2 LcCCD1与LcCCD4基因完整cDNA序列的获得 | 第45-46页 |
3.3.3 克隆载体pMD18-T-LcCCD1和pMD18-T-LcCCD4的构建 | 第46-47页 |
3.3.4 LcCCD1和LcCCD4基因编码蛋白质的特性分析 | 第47-55页 |
3.3.5 LcCCD1和LcCCD4基因的表达分析 | 第55-67页 |
3.4 讨论 | 第67-70页 |
3.4.1 大肠杆菌表达系统问题 | 第67-68页 |
3.4.2 枸杞LcCCD1和LcCCD4基因的功能 | 第68-69页 |
3.4.3 过表达LcCCD1基因提高了转基因烟草 β-紫罗酮含量 | 第69-70页 |
3.4.4 农杆菌介导烟草遗传转化中应注意的问题 | 第70页 |
3.5 小结 | 第70-72页 |
第四章 枸杞LcNCED1基因的克隆和表达分析 | 第72-105页 |
4.1 实验材料 | 第72-75页 |
4.1.1 烟草及枸杞材料 | 第72页 |
4.1.2 菌株和质粒 | 第72-73页 |
4.1.3 PCR所需引物 | 第73页 |
4.1.4 实验所用培养基 | 第73-74页 |
4.1.5 实验所用主要溶液 | 第74-75页 |
4.1.6 酶与各种生化试剂 | 第75页 |
4.2 实验方法 | 第75-82页 |
4.2.1 基本的分子生物学方法 | 第75-76页 |
4.2.2 枸杞LcNCED1基因的克隆及克隆载体的构建 | 第76页 |
4.2.3 枸杞LcNCED1基因在枸杞中的表达 | 第76-78页 |
4.2.4 枸杞LcNCED1基因在烟草中的表达 | 第78-82页 |
4.3 结果和分析 | 第82-101页 |
4.3.1 枸杞LcNCED1基因的分离 | 第82-88页 |
4.3.2 LcNCED1基因在枸杞中的表达分析 | 第88-92页 |
4.3.3 LcNCED1基因在烟草中的表达 | 第92-101页 |
4.4 讨论 | 第101-103页 |
4.4.1 LcNCED1基因的抗逆响应 | 第101-102页 |
4.4.2 LcNCED1基因参与枸杞的果实成熟 | 第102-103页 |
4.4.3 LcNCED1酶的底物问题 | 第103页 |
4.5 小结 | 第103-105页 |
第五章 转基因烟草对土壤的安全性评价 | 第105-116页 |
5.1 材料和方法 | 第105-109页 |
5.1.1 实验材料 | 第105-107页 |
5.1.2 实验方法 | 第107-109页 |
5.2 结果与分析 | 第109-114页 |
5.2.1 转基因烟草对土壤微生物数量的影响 | 第109-111页 |
5.2.2 转基因烟草对土壤酶活性的影响 | 第111-113页 |
5.2.3 转基因烟草对土壤电导率和pH值的影响 | 第113-114页 |
5.3 讨论 | 第114-115页 |
5.3.1 转基因烟草对土壤酶活性和微生物数量的影响 | 第114-115页 |
5.3.2 转基因烟草对土壤pH和电导率的影响 | 第115页 |
5.4 结论 | 第115-116页 |
第六章 结论与展望 | 第116-119页 |
6.1 研究总结 | 第116-117页 |
6.2 创新点 | 第117页 |
6.3 展望 | 第117-119页 |
参考文献 | 第119-132页 |
发表论文和科研情况说明 | 第132-133页 |
致谢 | 第133-134页 |