论文目录 | |
| 摘要 | 第11-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 符号说明 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-44页 |
| 综述一：猪瘟及猪瘟病毒的研究进展 | 第16-38页 |
| 1 猪瘟的概况 | 第16-27页 |
| 1.1 猪瘟的流行病学 | 第17页 |
| 1.2 临床症状和致病机理 | 第17-19页 |
| 1.3 猪瘟的诊断 | 第19-20页 |
| 1.4 猪瘟的防控 | 第20-21页 |
| 1.5 猪瘟的疫苗 | 第21-27页 |
| 2 猪瘟病毒的病原学特性及研究进展 | 第27-32页 |
| 2.1 猪瘟病毒的形态及理化特性 | 第28-29页 |
| 2.2 猪瘟病毒的基因组结构及研究进展 | 第29-30页 |
| 2.3 猪瘟病毒E2基因的分子生物学特性 | 第30-32页 |
| 2.4 猪瘟病毒E2基因的研究进展 | 第32页 |
| 3 猪瘟病毒的增殖及细胞培养 | 第32-38页 |
| 3.1 猪瘟病毒的入侵及增殖 | 第33-34页 |
| 3.2 猪瘟病毒的细胞培养 | 第34-38页 |
| 综述二：细胞及病毒高密度培养关键技术研究进展 | 第38-44页 |
| 1 高密度培养的细胞特性研究及改造 | 第38页 |
| 2 无血清培养基的研究 | 第38-39页 |
| 3 生物反应器 | 第39-40页 |
| 3.1 机械搅拌式 | 第39页 |
| 3.2 气升式 | 第39页 |
| 3.3 中空纤维 | 第39-40页 |
| 3.4 空间生物反应器 | 第40页 |
| 3.5 其它生物反应器 | 第40页 |
| 4 生物反应器的相关技术 | 第40-41页 |
| 4.1 细胞培养工艺技术研究 | 第40-41页 |
| 4.2 微载体的选择 | 第41页 |
| 4.3 培养过程的在线监控 | 第41页 |
| 5 结语 | 第41-44页 |
| 第二章 生产用猪睾丸传代细胞的研究 | 第44-62页 |
| 1 材料 | 第44-47页 |
| 1.1 细胞和种毒 | 第44页 |
| 1.2 培养基及溶液 | 第44-46页 |
| 1.3 试验动物 | 第46-47页 |
| 1.4 荧光抗体 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-53页 |
| 2.1 冻存细胞的复苏 | 第47页 |
| 2.2 细胞传代 | 第47页 |
| 2.3 细胞的冻存 | 第47-48页 |
| 2.4 基础细胞库建立 | 第48页 |
| 2.5 工作细胞库建立 | 第48页 |
| 2.6 细胞库细胞的检验 | 第48-49页 |
| 2.7 基础细胞库和工作细胞库的病毒检验 | 第49-50页 |
| 2.8 ST细胞最高代次范围确定 | 第50-52页 |
| 2.9 细胞系转化、恶性程度及细胞核学检验 | 第52-53页 |
| 2 结果 | 第53-61页 |
| 2.1 各级细胞库建立结果 | 第53-55页 |
| 2.2 最高代次细胞研究结果 | 第55-57页 |
| 2.3 细胞三致试验结果 | 第57-61页 |
| 3 本章小结 | 第61-62页 |
| 3.1 ST细胞的确定及细胞库的建立 | 第61页 |
| 3.2 细胞最高代次的确定 | 第61页 |
| 3.3 细胞系转化、恶性程度及细胞核学检查试验 | 第61-62页 |
| 第三章 生产用毒种的研究 | 第62-78页 |
| 1 材料 | 第62-63页 |
| 1.1 细胞 | 第62页 |
| 1.2 毒种 | 第62页 |
| 1.3 培养基及试剂 | 第62-63页 |
| 1.4 试验动物 | 第63页 |
| 2 方法 | 第63-70页 |
| 2.1 生产用毒种种子批的建立(猪瘟脾毒的增殖与鉴定) | 第63-67页 |
| 2.2 生产种子制备及全面鉴定(细胞毒的增殖和鉴定) | 第67-68页 |
| 2.3 生产用毒种最高代次范围的研究 | 第68-70页 |
| 3 结果 | 第70-76页 |
| 3.1 生产种子批建立的结果(猪瘟脾毒种毒的增殖及鉴定结果) | 第70-71页 |
| 3.2 生产种子的鉴定结果(猪瘟细胞种毒的增殖及鉴定结果) | 第71-73页 |
| 3.3 生产用毒种最高代次范围的研究结果 | 第73-76页 |
| 4 本部分小结 | 第76-78页 |
| 第四章 实验用阴性猪的筛选 | 第78-94页 |
| 1 材料 | 第78-79页 |
| 1.1 动物 | 第78页 |
| 1.2 主要试剂 | 第78页 |
| 1.3 主要仪器 | 第78-79页 |
| 2 方法 | 第79-85页 |
| 2.1 猪瘟(CSF)抗原的检测 | 第79-80页 |
| 2.2 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)抗原的检测 | 第80页 |
| 2.3 猪瘟(CSF)抗体检测 | 第80-81页 |
| 2.4 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS)抗体检测 | 第81-83页 |
| 2.5 猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)抗体酶免检测 | 第83-84页 |
| 2.6 猪伪狂犬病病毒(PRV)gpI抗体检测 | 第84-85页 |
| 3 结果 | 第85-92页 |
| 3.1 不同日龄猪PRRSV及CSFV抗原检测结果 | 第85-88页 |
| 3.2 ELISA检测结果 | 第88-92页 |
| 4 本章小结 | 第92-94页 |
| 第五章 猪瘟活疫苗(ST传代细胞源)的研制 | 第94-124页 |
| 1 材料 | 第94-95页 |
| 1.1 毒种与细胞 | 第94页 |
| 1.2 培养基 | 第94页 |
| 1.3 试验动物 | 第94页 |
| 1.4 生物反应器及载体 | 第94页 |
| 1.5 猪瘟活疫苗(细胞源) | 第94-95页 |
| 2 方法 | 第95-104页 |
| 2.1 细胞培养 | 第95-96页 |
| 2.2 生产用种毒制备 | 第96页 |
| 2.3 用不同代次细胞培养猪瘟弱毒产毒情况比较试验 | 第96页 |
| 2.4 不同接毒量比较试验 | 第96页 |
| 2.5 接毒后不同时间收获比较试验 | 第96-97页 |
| 2.6 病毒液于不同温度保存期试验 | 第97页 |
| 2.7 病毒的繁殖与收获 | 第97-98页 |
| 2.8 半成品检验 | 第98页 |
| 2.9 配苗、分装和冻干 | 第98页 |
| 2.10 成品检验方法研究 | 第98-104页 |
| 3 结果与讨论 | 第104-121页 |
| 3.1 用不同代次细胞培养猪瘟弱毒产毒情况比较试验结果 | 第104页 |
| 3.2 不同接毒量比较试验结果 | 第104-105页 |
| 3.3 接毒后不同时间收获比较试验结果 | 第105-107页 |
| 3.4 病毒液于不同温度保存期试验结果 | 第107-108页 |
| 3.5 新型疫苗制备结果 | 第108-113页 |
| 3.6 成品检验结果 | 第113-121页 |
| 4 讨论 | 第121-122页 |
| 5 本章小结 | 第122-124页 |
| 5.1 疫苗的研制与开发 | 第122页 |
| 5.2 疫苗的成品检验 | 第122-124页 |
| 第六章 新型疫苗与同类产品的比较试验 | 第124-156页 |
| 第一部分 新型疫苗与猪瘟活疫苗(牛睾丸细胞源)的安全、效力等比较试验 | 第124-130页 |
| 1 材料 | 第124页 |
| 1.1 疫苗 | 第124页 |
| 1.2 试验动物 | 第124页 |
| 2 方法 | 第124-126页 |
| 2.1 物理性状检验 | 第124页 |
| 2.2 无菌检验 | 第124页 |
| 2.3 支原体检验 | 第124-125页 |
| 2.4 鉴别检验 | 第125页 |
| 2.5 外源病毒检验 | 第125页 |
| 2.6 安全检验 | 第125页 |
| 2.7 效力检验 | 第125页 |
| 2.8 剩余水份测定 | 第125-126页 |
| 2.9 真空度测定 | 第126页 |
| 3 结果 | 第126-130页 |
| 3.1 物理性状检验结果 | 第126页 |
| 3.2 无菌检验结果 | 第126页 |
| 3.3 支原体检验结果 | 第126页 |
| 3.4 鉴别检验结果 | 第126-127页 |
| 3.5 外源病毒检验结果 | 第127页 |
| 3.6 安全检验结果 | 第127页 |
| 3.7 效力检验结果 | 第127-129页 |
| 3.8 剩余水份、真空度测定结果 | 第129-130页 |
| 第二部分 猪瘟兔化弱疫苗株不同细胞源E2基因克隆与序列分析 | 第130-156页 |
| 1 材料 | 第130-131页 |
| 2 方法 | 第131-136页 |
| 2.1 猪瘟(ST-BT细胞源)病毒核酸的提取 | 第131页 |
| 2.2 RT-PCR | 第131-136页 |
| 3 结果与分析 | 第136-149页 |
| 3.1 E2基因RT-PCR鉴定 | 第136-137页 |
| 3.2 菌落PCR筛选E2基因重组质粒初步鉴定 | 第137页 |
| 3.3 E2基因重组质粒初步鉴定 | 第137-138页 |
| 3.4 E2基因重组质粒PCR鉴定 | 第138页 |
| 3.5 E2基因重组质粒酶切鉴定 | 第138-139页 |
| 3.6 E2基因序列测定与结果 | 第139-149页 |
| 4 讨论 | 第149-154页 |
| 4.1 病毒在猪睾丸细胞和牛睾丸细胞上培养的讨论 | 第149页 |
| 4.2 E2基因的序列分析 | 第149-154页 |
| 5 本部分小结 | 第154页 |
| 6 本章小结 | 第154-156页 |
| 第七章 猪瘟活疫苗(ST传代细胞源)临床试验 | 第156-168页 |
| 1 材料和方法 | 第156-157页 |
| 1.1 试验用疫苗 | 第156页 |
| 1.2 试验猪场 | 第156页 |
| 1.3 疫苗免疫 | 第156页 |
| 1.4 临床应用观察 | 第156页 |
| 1.5 血清检测方法 | 第156-157页 |
| 2 结果 | 第157-165页 |
| 2.1 临床应用观察 | 第157-162页 |
| 2.2 免疫效果观察 | 第162-165页 |
| 3 分析与讨论 | 第165-166页 |
| 4 本章小结 | 第166-168页 |
| 全文总结 | 第168-170页 |
| 参考文献 | 第170-180页 |
| 致谢 | 第180-182页 |
| 个人简介 | 第182-185页 |
