论文目录 | |
| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-16页 |
| 缩略语表 | 第16-35页 |
| 1 文献综述、研究内容及技术路线 | 第35-57页 |
| 1.1 植物组织培养中外植体灭菌及百合属植物离体快繁体系概况 | 第36-39页 |
| 1.1.1 植物组培中外植体表面灭菌 | 第36-37页 |
| 1.1.2 百合属植物离体快繁体系研究 | 第37-39页 |
| 1.2 鳞茎发育研究模型 | 第39-40页 |
| 1.3 试管鳞茎形成及膨大影响因子 | 第40-47页 |
| 1.3.1 外植体类型、方向性及取材时间 | 第41页 |
| 1.3.2 培养基配方及添加剂 | 第41-46页 |
| 1.3.3 培养条件 | 第46-47页 |
| 1.4 鳞茎形成及膨大生理生化机制 | 第47-49页 |
| 1.4.1 蔗糖及碳水化合物代谢 | 第47-48页 |
| 1.4.2 激素调控 | 第48-49页 |
| 1.4.3 抗氧化酶 | 第49页 |
| 1.5 鳞茎形成及膨大的分子机制 | 第49-50页 |
| 1.6 转录组学应用及百合属转录组学研究情况 | 第50-52页 |
| 1.6.1 转录组学研究及其应用 | 第50页 |
| 1.6.2 百合属转录组学研究概况 | 第50-52页 |
| 1.7 淀粉合成关键酶基因的克隆及功能研究 | 第52-55页 |
| 1.7.1 葡萄糖焦磷酸化酶AGPase | 第54页 |
| 1.7.2 淀粉合成酶GBSS及SSS | 第54-55页 |
| 1.7.3 淀粉分支酶SBE | 第55页 |
| 1.8 研究目的、内容、技术路线及意义 | 第55-57页 |
| 1.8.1 研究目的 | 第55页 |
| 1.8.2 研究内容 | 第55-56页 |
| 1.8.3 技术路线 | 第56页 |
| 1.8.4 研究意义 | 第56-57页 |
| 2 湖州百合组培快繁体系建立 | 第57-67页 |
| 2.1 材料与方法 | 第58-60页 |
| 2.1.1 材料 | 第58页 |
| 2.1.2 方法 | 第58-60页 |
| 2.2 结果与分析 | 第60-64页 |
| 2.2.1 低温冷藏对湖州百合污染的控制 | 第60页 |
| 2.2.2 不同酒精灭菌时间对湖州百合污染的控制 | 第60-61页 |
| 2.2.3 不同消毒剂及消毒时间对湖州百合污染的控制 | 第61-62页 |
| 2.2.4 甲基托布津预浸对湖州百合污染的控制 | 第62页 |
| 2.2.5 添加吐温-20对湖州百合污染的控制 | 第62页 |
| 2.2.6 不同诱导培养基对湖州百合诱导培养的影响 | 第62-63页 |
| 2.2.7 不同增殖培养基对湖州百合继代培养的影响 | 第63-64页 |
| 2.3 讨论 | 第64-66页 |
| 2.3.1 湖州百合无菌体系的建立 | 第64页 |
| 2.3.2 湖州百合快繁体系的建立 | 第64-66页 |
| 2.4 小结 | 第66-67页 |
| 3 药百合无菌播种体系建立 | 第67-75页 |
| 3.1 材料与方法 | 第68-69页 |
| 3.1.1 材料 | 第68页 |
| 3.1.2 方法 | 第68-69页 |
| 3.2 结果与分析 | 第69-73页 |
| 3.2.1 剥皮处理对药百合种子萌发的影响 | 第69-70页 |
| 3.2.2 不同激素配比对药百合种子萌发的影响 | 第70-72页 |
| 3.2.3 染色体倍性检测 | 第72-73页 |
| 3.3 讨论 | 第73-74页 |
| 3.4 小结 | 第74-75页 |
| 4 鳞茎发育离体研究模型的建立 | 第75-89页 |
| 4.1 材料与方法 | 第75-77页 |
| 4.1.1 材料 | 第75页 |
| 4.1.2 方法 | 第75-77页 |
| 4.2 结果与分析 | 第77-84页 |
| 4.2.1 不同消毒剂对'索邦'无菌体系建立的影响 | 第77页 |
| 4.2.2 不同诱导培养基对'索邦'诱导培养的影响 | 第77-78页 |
| 4.2.3 '索邦'均一离体模式研究体系的建立 | 第78-79页 |
| 4.2.4 离体模式研究体系中的细胞学观察 | 第79-84页 |
| 4.3 讨论 | 第84-87页 |
| 4.3.1 '索邦'组培快繁体系的建立 | 第84页 |
| 4.3.2 离体研究模型建立的必要性及可行性 | 第84-86页 |
| 4.3.3 离体条件下诱芽的形态发生学 | 第86-87页 |
| 4.4 小结 | 第87-89页 |
| 5 多效唑(PBZ)处理对离体小鳞茎发育的影响 | 第89-119页 |
| 5.1 材料与方法 | 第90-94页 |
| 5.1.1 材料 | 第90页 |
| 5.1.2 方法 | 第90-94页 |
| 5.1.3 观察与统计 | 第94页 |
| 5.2 结果与分析 | 第94-108页 |
| 5.2.1 PBZ处理对'索邦'小鳞茎形态建成的影响 | 第94-96页 |
| 5.2.2 PBZ处理对'索邦'小鳞茎发育过程中NSC含量的影响 | 第96-99页 |
| 5.2.3 PBZ处理对'索邦'小鳞茎发育过程中淀粉合成酶活性的影响 | 第99-102页 |
| 5.2.4 PBZ处理对'索邦'小鳞茎发育过程中内源激素水平的影响 | 第102-105页 |
| 5.2.5 PBZ处理对'索邦'小鳞茎发育过程中抗氧化酶/蛋白活性的影响 | 第105-107页 |
| 5.2.6 PBZ处理对'索邦'小鳞茎发育过程中MDA含量的影响 | 第107-108页 |
| 5.3 讨论 | 第108-116页 |
| 5.3.1 低浓度PBZ处理促进'索邦'试管植株生长 | 第109-112页 |
| 5.3.2 PBZ处理有利于NSC活跃转化 | 第112-114页 |
| 5.3.3 离体条件下PBZ处理对内源激素水平及其平衡的影响 | 第114-115页 |
| 5.3.4 PBZ处理下抗氧化酶、MDA与离体鳞茎形态建成的关系 | 第115-116页 |
| 5.4 小结 | 第116-119页 |
| 6 腐殖酸(HA)处理对离体小鳞茎发育的影响 | 第119-145页 |
| 6.1 材料与方法 | 第120-122页 |
| 6.1.1 材料 | 第120页 |
| 6.1.2 方法 | 第120-121页 |
| 6.1.3 观察与统计 | 第121-122页 |
| 6.2 结果与分析 | 第122-135页 |
| 6.2.1 HA处理对'索邦'小鳞茎形态建成的影响 | 第122-124页 |
| 6.2.2 HA处理对'索邦'小鳞茎发育过程中NSC含量的影响 | 第124-127页 |
| 6.2.3 HA处理对'索邦'小鳞茎发育过程中淀粉合成酶活性的影响 | 第127-128页 |
| 6.2.4 HA处理对'索邦'小鳞茎发育过程中内源激素水平的影响 | 第128-132页 |
| 6.2.5 HA处理对'索邦'小鳞茎发育过程中抗氧化酶/蛋白活性的影响 | 第132-134页 |
| 6.2.6 HA处理对'索邦'小鳞茎发育过程中MDA含量的影响 | 第134-135页 |
| 6.3 讨论 | 第135-142页 |
| 6.3.1 低浓度HA处理有利于'索邦'试管鳞茎膨大 | 第135-138页 |
| 6.3.2 HA处理促进同化物的合成及向下运输 | 第138-140页 |
| 6.3.3 离体条件下HA处理对内源激素水平及其平衡的影响 | 第140-141页 |
| 6.3.4 HA处理下抗氧化酶、MDA与离体鳞茎发生发育的关系 | 第141-142页 |
| 6.4 小结 | 第142-145页 |
| 7 氯吡苯脲(CPPU)处理对离体小鳞茎发育的影响 | 第145-167页 |
| 7.1 材料与方法 | 第146-147页 |
| 7.1.1 材料 | 第146页 |
| 7.1.2 方法 | 第146-147页 |
| 7.1.3 观察与统计 | 第147页 |
| 7.2 结果与分析 | 第147-161页 |
| 7.2.1 CPPU处理对'索邦'小鳞茎形态建成的影响 | 第147-150页 |
| 7.2.2 CPPU处理对'索邦'小鳞茎发育过程中NSC含量的影响 | 第150-153页 |
| 7.2.3 CPPU处理对'索邦'小鳞茎发育过程中淀粉合成酶活性的影响 | 第153-155页 |
| 7.2.4 CPPU处理对'索邦'小鳞茎发育过程中内源激素水平的影响 | 第155-158页 |
| 7.2.5 CPPU处理对'索邦'小鳞茎发育过程中抗氧化酶/蛋白活性的影响 | 第158-160页 |
| 7.2.6 CPPU处理对'索邦'小鳞茎发育过程中MDA含量的影响 | 第160-161页 |
| 7.3 讨论 | 第161-165页 |
| 7.3.1 高浓度CPPU处理阻断'索邦'离体鳞茎形成 | 第161-163页 |
| 7.3.2 CPPU同时促进淀粉合成及分解方向 | 第163-164页 |
| 7.3.3 离体条件下CPPU处理对内源激素水平及其平衡的影响 | 第164-165页 |
| 7.3.4 CPPU处理下抗氧化酶、MDA与离体鳞茎发生的关系 | 第165页 |
| 7.4 小结 | 第165-167页 |
| 8 蔗糖对离体小鳞茎发育的影响 | 第167-175页 |
| 8.1 材料与方法 | 第167-169页 |
| 8.1.1 材料 | 第167-168页 |
| 8.1.2 方法 | 第168页 |
| 8.1.3 观察与统计 | 第168-169页 |
| 8.2 结果与分析 | 第169-171页 |
| 8.2.1 不添加蔗糖对于外源最适处理形态指标的影响 | 第169-170页 |
| 8.2.2 添加蔗糖与否的不同处理形态指标比较 | 第170-171页 |
| 8.3 讨论 | 第171-172页 |
| 8.4 小结 | 第172-175页 |
| 9 基于ILLUMINA平台的离体百合鳞茎转录组学研究 | 第175-197页 |
| 9.1 材料与方法 | 第175-178页 |
| 9.1.1 材料 | 第175-176页 |
| 9.1.2 RNA的提取、纯化及质量检验 | 第176页 |
| 9.1.3 cDNA文库的构建及RNA-Seq | 第176-177页 |
| 9.1.4 重头组装 | 第177页 |
| 9.1.5 测序和拼接数据提交 | 第177页 |
| 9.1.6 Unigene功能注释和分类 | 第177-178页 |
| 9.1.7 SSR分析 | 第178页 |
| 9.2 结果与分析 | 第178-195页 |
| 9.2.1 离体鳞茎RNA质量及测序均一性分布评估 | 第178-179页 |
| 9.2.2 测序及组装情况 | 第179-181页 |
| 9.2.3 Unigene功能注释 | 第181-183页 |
| 9.2.4 Unigene功能分类 | 第183-187页 |
| 9.2.5 转录因子及转录本分析 | 第187-189页 |
| 9.2.6 KEGG代谢途径分类及注释 | 第189-193页 |
| 9.2.7 SSR鉴定 | 第193-195页 |
| 9.3 小结 | 第195-197页 |
| 10 外源正负向鳞茎发育调控的转录组学差异表达基因研究 | 第197-219页 |
| 10.1 材料与方法 | 第197-199页 |
| 10.1.1 材料 | 第197页 |
| 10.1.2 RNA的提取、纯化及质量检验 | 第197页 |
| 10.1.3 cDNA文库的构建及RNA-Seq | 第197页 |
| 10.1.4 重头组装 | 第197-198页 |
| 10.1.5 测序和拼接数据提交 | 第198页 |
| 10.1.6 Unigene功能注释和分类 | 第198页 |
| 10.1.7 基因差异表达分析 | 第198页 |
| 10.1.8 差异表达基因聚类分析 | 第198页 |
| 10.1.9 不同鳞茎调控方式下最显著差异表达基因的筛选和注释 | 第198-199页 |
| 10.1.10 差异表达基因GO功能富集及KEGG pathway注释对比 | 第199页 |
| 10.2 结果与分析 | 第199-213页 |
| 10.2.1 三种处理测序情况 | 第199页 |
| 10.2.2 差异表达基因比较 | 第199-201页 |
| 10.2.3 差异基因表达模式聚类分析 | 第201-203页 |
| 10.2.4 差异表达基因的筛选和注释 | 第203-207页 |
| 10.2.5 特异性表达基因的筛选和注释 | 第207-209页 |
| 10.2.6 差异表达基因的GO分类与富集分析 | 第209-213页 |
| 10.2.7 差异表达基因的KEGG代谢途径 | 第213页 |
| 10.3 讨论 | 第213-217页 |
| 10.3.1 正负调控下差异表达基因及特异表达基因 | 第213-217页 |
| 10.3.2 正负调控下GO功能及KEGG代谢途径富集 | 第217页 |
| 10.4 小结 | 第217-219页 |
| 11 LohAGPS1基因的克隆与分析 | 第219-243页 |
| 11.1 材料与方法 | 第221-223页 |
| 11.1.1 植物材料 | 第221页 |
| 11.1.2 菌株与载体 | 第221页 |
| 11.1.3 主要试剂与试剂盒 | 第221-222页 |
| 11.1.4 缓冲液、生化试剂和培养基 | 第222-223页 |
| 11.1.5 外源RNase的去除 | 第223页 |
| 11.1.6 仪器设备 | 第223页 |
| 11.2 试验方法 | 第223-231页 |
| 11.2.1 总RNA的提取 | 第223-225页 |
| 11.2.2 RNA质量检测 | 第225-226页 |
| 11.2.3 引物序列 | 第226页 |
| 11.2.4 第一链cDNA合成 | 第226-227页 |
| 11.2.5 AGPS基因全长cDNA扩增 | 第227-229页 |
| 11.2.6 目的片段的回收与纯化 | 第229页 |
| 11.2.7 加A | 第229页 |
| 11.2.8 片段与载体的连接 | 第229-230页 |
| 11.2.9 连接产物的转化 | 第230页 |
| 11.2.10 阳性克隆的鉴定 | 第230-231页 |
| 11.2.11 LohAGPS1基因cDNA全长的获得 | 第231页 |
| 11.2.12 序列测定与分析 | 第231页 |
| 11.3 结果与分析 | 第231-239页 |
| 11.3.1 百合RNA提取方法比较 | 第231-235页 |
| 11.3.2 LohAGPS1基因的克隆 | 第235页 |
| 11.3.3 LohAGPS1基因的序列与功能分析 | 第235-239页 |
| 11.3.4 LohAGPS1基因的系统进化树分析 | 第239页 |
| 11.4 讨论 | 第239-241页 |
| 11.4.1 复杂样品百合的RNA提取 | 第239-240页 |
| 11.4.2 '索邦'离体鳞茎LohAGPS1基因全长克隆 | 第240-241页 |
| 11.5 小结 | 第241-243页 |
| 12 巨球百合——可能用于鳞茎发育研究的天然突变体 | 第243-253页 |
| 12.1 材料与方法 | 第243-245页 |
| 12.1.1 材料 | 第243-244页 |
| 12.1.2 方法 | 第244-245页 |
| 12.2 结果与分析 | 第245-249页 |
| 12.2.1 巨球百合组培体系建立 | 第245-247页 |
| 12.2.2 巨球百合鳞茎营养成分分析 | 第247-249页 |
| 12.3 讨论 | 第249-252页 |
| 12.3.1 巨球百合材料的特异性 | 第249-252页 |
| 12.3.2 巨球百合食用性的可开发潜力 | 第252页 |
| 12.4 小结 | 第252-253页 |
| 13 结论、创新点及展望 | 第253-261页 |
| 13.1 主要结论 | 第253-258页 |
| 13.1.1 百合属植物组织培养及'索邦'离体研究模型建立 | 第253-254页 |
| 13.1.2 外源添加物质对'索邦'离体百合发育的影响及其生理生化机制 | 第254-257页 |
| 13.1.3 离体小鳞茎发生发育的分子调控路径及关键基因挖掘分析 | 第257-258页 |
| 13.1.4 巨球百合——可能用于鳞茎发育研究的天然突变体 | 第258页 |
| 13.2 创新点 | 第258-259页 |
| 13.3 不足与展望 | 第259-261页 |
| 参考文献 | 第261-291页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第291-295页 |
| 致谢 | 第295-301页 |
