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苦瓜果实与成熟相关的若干基因克隆与表达分析

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苦瓜果实与成熟相关的若干基因克隆与表达分析
论文目录
 
摘要第1-13页
Abstract第13-21页
1 引言第21-42页
  1.1 研究进展第21-40页
    1.1.1 果实成熟机理的研究进展第21-36页
      1.1.1.1 果实成熟与乙烯第22-32页
      1.1.1.2 多胺与果实成熟第32-33页
      1.1.1.3 成熟衰老相关的酶类与果实成熟第33-36页
    1.1.2 苦瓜果实采后生理和分子生物学研究现状与存在问题第36-37页
    1.1.3 均一化文库构建的研究进展第37-38页
    1.1.4 植物启动子的研究进展第38-40页
  1.2 本论文研究的目的意义与主要内容第40-42页
    1.2.1 研究的目的意义第40页
    1.2.2 主要研究内容第40-42页
2 材料与方法第42-55页
  2.1 材料与试剂第42-43页
    2.1.1 苦瓜果实成熟过程中生理指标测定的材料第42页
    2.1.2 均一化建库的苦瓜果实材料第42-43页
    2.1.3 亚细胞定位的植物材料第43页
    2.1.4 试剂第43页
  2.2 方法第43-55页
    2.2.1 不同基因型苦瓜果实生理指标的测定第43页
    2.2.2 苦瓜果实均一化文库构建第43-45页
    2.2.3 苦瓜果实成熟相关基因的克隆及结构分析第45-49页
    2.2.4 苦瓜果实成熟相关基因的表达分析第49-51页
    2.2.5 McACS5基因的瞬时表达第51页
    2.2.6 苦瓜McACS5、McACO2和McGal基因启动子的克隆和序列分析第51-54页
    2.2.7 MC/1C02启动子缺失区段载体构建和烟草瞬间表达第54-55页
3 结果与分析第55-114页
  3.1 成熟期3个基因型苦瓜硬度,乙烯、呼吸半乳糖苷酶变化差异分析第55-59页
    3.1.1 成熟期3个基因型苦瓜硬度变化第55页
    3.1.2 成熟期3个基因型苦瓜乙烯释放变化第55-56页
    3.1.3 成熟期3个基因型苦瓜果实呼吸速率变化第56-57页
    3.1.4 成熟过程3个基因型苦瓜半乳糖苷酶活性变化第57页
    3.1.5 成熟过程3个基因型苦瓜硬度,乙烯、呼吸、半乳糖苷酶活性相关分析第57-59页
  3.2 苦瓜果实均一化文库的构建第59-62页
    3.2.1 总RNA提取第59页
    3.2.2 全长cDNA的合成第59页
    3.2.3 全长cDNA文库均一化效果检测第59-60页
    3.2.4 文库质量鉴定第60页
    3.2.5 EST测序结果分析第60-62页
  3.3 7个苦瓜果实成熟相关基因全长cDNA克隆、结构分析第62-97页
    3.3.1 7个苦瓜果实成熟相关基因全长cDNA的获得第62-69页
    3.3.2 7个苦瓜果实成熟相关基因生物信息学分析第69-80页
    3.3.3 7个苦瓜果实成熟相关基因推导氨基酸序列的系统发育分析第80-92页
    3.3.4 7个苦瓜果实成熟相关基因亚细胞定位第92-97页
  3.4 McACS5、McACO2和McGal启动子的克隆及序列分析第97-104页
    3.4.1 McACS5基因启动子的克隆和序列分析第97-99页
    3.4.2 McACO2启动子的克隆和序列分析第99-101页
    3.4.3 McGal启动子的克隆和序列分析第101-104页
  3.5 7个苦瓜果实成熟相关基因的表达分析第104-111页
    3.5.1 McACS5与苦瓜ACS基因家族其它4个成员的表达差异分析第104页
    3.5.2 苦瓜McACO2、McACO1基因的表达差异分析第104-105页
    3.5.3 苦瓜McEIL2和McERF1的表达差异分析第105-106页
    3.5.4 苦瓜McSAMDC基因的表达差异分析第106-107页
    3.5.5 苦瓜McLOX2基因的表达差异分析第107-108页
    3.5.6 苦瓜McGal基因的表达差异分析第108页
    3.5.7 McACS5、McACO2和McGal启动子GUS表达分析第108-111页
  3.6 McACS5与McACO2基因功能的初步分析第111-112页
  3.7 McACO2启动子不同缺失区段的GUS定量分析第112-114页
  4. 讨论第114-123页
  4.1 苦瓜果实成熟与硬度、乙烯、呼吸和β-半乳糖甘酶的关系第114-115页
  4.2 苦瓜果实全长均一化文库的质量与保证第115-116页
  4.3 苦瓜果实成熟相关基因的结构与表达分析推测其功能及可能的进化途径第116-122页
    4.3.1 McACS5结构与表达分析推测其功能及可能的进化途径第116-118页
    4.3.2 McACO2结构与表达分析,推测其功能及可能的进化途径第118-119页
    4.3.3 乙烯信号转导因子McEIL2和反应因子McERF1结构及表达分析第119-120页
    4.3.4 McSAMDC结构与表达分析推测其功能及可能的进化途径第120-121页
    4.3.5 McLOX2结构与表达分析推测其功能及可能的进化途径第121页
    4.3.6 McGal结构与表达分析,推测其功能及可能的进化途径第121-122页
  4.4 McACO2基因表达可能调控机制第122-123页
5 总结与展望第123-130页
  5.1 总结第123-128页
  5.2 创新点第128-129页
  5.3 展望第129-130页
参考文献第130-145页
致谢第145页

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