论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-30页 |
| 1.1 鱼类免疫球蛋白研究进展 | 第12-20页 |
| 1.1.1 鱼类免疫球蛋白类型 | 第13-15页 |
| 1.1.2 鱼类免疫球蛋白介导的免疫应答 | 第15-18页 |
| 1.1.3 鱼类免疫球蛋白基因 | 第18-20页 |
| 1.2 鱼类Ig阳性B淋巴细胞研究进展 | 第20-24页 |
| 1.2.1 Ig阳性B淋巴细胞类型 | 第20页 |
| 1.2.2 Ig阳性B淋巴细胞分布 | 第20-21页 |
| 1.2.3 Ig阳性B淋巴细胞其他功能 | 第21-23页 |
| 1.2.4 Ig阳性B淋巴细胞的终末分化 | 第23-24页 |
| 1.3 鱼类肠道粘膜免疫研究进展 | 第24-28页 |
| 1.3.1 鱼类肠道相关淋巴组织 | 第25-26页 |
| 1.3.2 鱼类肠道粘膜抗体应答 | 第26-27页 |
| 1.3.3 鱼类粘膜疫苗 | 第27-28页 |
| 1.4 本论文的研究目的和意义 | 第28-30页 |
| 第二章 浸泡免疫鲤鱼头肾和后肠转录组学研究 | 第30-71页 |
| 前言 | 第30页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 实验材料及饲养 | 第30页 |
| 2.1.2 菌株 | 第30-31页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-37页 |
| 2.2.1 嗜水气单胞菌浸泡免疫刺激鲤鱼 | 第31页 |
| 2.2.2 鲤鱼组织取材 | 第31-32页 |
| 2.2.3 鲤鱼组织RNA提取及检测 | 第32-34页 |
| 2.2.4 转录组测序 | 第34-35页 |
| 2.2.5 基因差异表达分析 | 第35-37页 |
| 2.3 实验结果 | 第37-68页 |
| 2.3.1 组织提取RNA质量检测 | 第37-38页 |
| 2.3.2 样品测序数据及序列比对结果 | 第38-49页 |
| 2.3.3 Unigene表达差异分析 | 第49-51页 |
| 2.3.4 免疫相关差异表达基因的GO分析 | 第51-56页 |
| 2.3.5 差异表达基因KEGG通路预测 | 第56-60页 |
| 2.3.6 免疫相关差异表达基因KEGG分析 | 第60-65页 |
| 2.3.7 免疫球蛋白相关的差异表达基因 | 第65-68页 |
| 2.4 讨论 | 第68-71页 |
| 第三章 免疫刺激对鲤鱼IgT、IgM及其受体分子表达的影响 | 第71-119页 |
| 前言 | 第71页 |
| 3.1 实验材料 | 第71-72页 |
| 3.1.1 实验材料及饲养 | 第71-72页 |
| 3.1.2 菌株 | 第72页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第72页 |
| 3.2 实验方法 | 第72-90页 |
| 3.2.1 嗜水气单胞菌免疫刺激鲤鱼 | 第72-73页 |
| 3.2.2 鲤鱼组织取材 | 第73-74页 |
| 3.2.3 鲤鱼不同组织RNA提取及检测 | 第74页 |
| 3.2.4 鲤鱼不同组织cDNA的制备 | 第74-75页 |
| 3.2.5 实时荧光定量PCR(Real-time PCR) | 第75-77页 |
| 3.2.6 鲤鱼IgT-CH3区片段原核表达及多克隆抗体的制备 | 第77-83页 |
| 3.2.7 鲤鱼IgT单克隆抗体的制备 | 第83-86页 |
| 3.2.8 鲤鱼组织取材 | 第86-87页 |
| 3.2.9 BCA蛋白定量检测 | 第87-88页 |
| 3.2.10 免疫印迹检测(Western blotting) | 第88-90页 |
| 3.3 实验结果 | 第90-114页 |
| 3.3.1 组织RNA提取及检测 | 第90-92页 |
| 3.3.2 正常鲤鱼IgT/IgM分子的组织特异性表达检测 | 第92-93页 |
| 3.3.3 浸泡免疫鲤鱼各组织IgT/IgM的荧光定量PCR检测 | 第93-99页 |
| 3.3.4 注射免疫鲤鱼各组织IgT/IgM的荧光定量PCR检测 | 第99-105页 |
| 3.3.5 浸泡免疫鲤鱼各组织pIgR的荧光定量PCR检测 | 第105-107页 |
| 3.3.6 IgT-CH3的诱导表达 | 第107-109页 |
| 3.3.7 鲤鱼IgT及IgM抗体的免疫印迹鉴定及筛选 | 第109-111页 |
| 3.3.8 组织总蛋白含量的测定 | 第111页 |
| 3.3.9 浸泡免疫鲤鱼各组织IgT/IgM的免疫印迹检测 | 第111-113页 |
| 3.3.10 注射免疫鲤鱼各组织IgT/IgM的免疫印迹检测 | 第113-114页 |
| 3.4 讨论 | 第114-119页 |
| 第四章 IgT~+B细胞在组织中的分布 | 第119-138页 |
| 前言 | 第119页 |
| 4.1 实验材料 | 第119页 |
| 4.2 实验方法 | 第119-125页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第119-120页 |
| 4.2.2 鲤鱼组织切片制备 | 第120-121页 |
| 4.2.3 常规组化H.E染色 | 第121-122页 |
| 4.2.4 常规AB-PAS染色 | 第122-123页 |
| 4.2.5 免疫组化检测 | 第123-125页 |
| 4.3 实验结果 | 第125-136页 |
| 4.3.1 组织学观察 | 第125-128页 |
| 4.3.2 鲤鱼头肾IgT~+B细胞的分布 | 第128-131页 |
| 4.3.3 鲤鱼脾脏IgT~+B细胞的分布 | 第131-134页 |
| 4.3.4 鲤鱼后肠IgT~+B细胞的分布 | 第134-136页 |
| 4.4 讨论 | 第136-138页 |
| 结论 | 第138-139页 |
| 参考文献 | 第139-147页 |
| 致谢 | 第147-148页 |
| 攻读博士学位期间发表文章 | 第148页 |
