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水稻中调控抽穗期的关键基因OsCOL13的克隆与生化分析

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水稻中调控抽穗期的关键基因OsCOL13的克隆与生化分析
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-13页
英文缩略词第13-15页
第1章 绪论第15-38页
  1.1 植物开花概述第15-23页
    1.1.1 植物开花的研究历史第15-17页
    1.1.2 调控植物开花的途径第17-22页
    1.1.3 水稻开花研究现状第22-23页
  1.2 水稻抽穗期的研究第23-36页
    1.2.1 水稻抽穗期QTL分析第23-25页
    1.2.2 水稻成花素Hd3a和RFT1的克隆与功能研究第25-27页
    1.2.3 水稻开花集成基因Hd1和Ehd1的克隆与功能研究第27-28页
    1.2.4 水稻开花促进基因的克隆与功能研究第28-31页
    1.2.5 水稻开花抑制基因的克隆与功能研究第31-34页
    1.2.6 水稻抽穗期的光周期调控网络第34-36页
  1.3 CO-like家族基因的研究第36-37页
  1.4 本研究的目的和意义第37-38页
第2章水稻抽穗期基因OsCOL13的克隆第38-53页
  2.1 材料与方法第38-43页
    2.1.1 材料来源第38页
    2.1.2 材料种植第38-39页
    2.1.3 农艺性状调查第39页
    2.1.4 载体构建第39-40页
    2.1.5 质粒的提取第40页
    2.1.6 DNA胶回收第40页
    2.1.7 感受态细胞的制备第40-41页
    2.1.8 感受态细胞的转化第41页
    2.1.9 DNA的提取第41-42页
    2.1.10 总RNA的提取以及qRT-PCR分析第42-43页
  2.2 结果与讨论第43-53页
    2.2.1 过表达OsCOL13-VP64使水稻开花延迟第43-44页
    2.2.2 过表达OsCOL13-Flag延迟水稻开花第44-50页
    2.2.3 OsCOL13突变体的构建与表型分析第50-52页
    2.2.4 讨论第52-53页
第3章 OsCOL13基因的基本功能分析第53-71页
  3.1 材料与方法第53-60页
    3.1.1 实验材料与种植第53页
    3.1.2 总RNA的提取以及qRT-PCR分析第53页
    3.1.3 GUS组织化学染色与观察第53-54页
    3.1.4 RNA原位杂交第54-56页
    3.1.5 水稻原生质体的制备以及转化第56-57页
    3.1.6 OsCOL13转录激活活性分析第57-58页
    3.1.7 植物总蛋白的提取与Western blot分析第58-59页
    3.1.8 蛋白的原核表达与纯化第59页
    3.1.9 体外Pull-down分析第59-60页
    3.1.10 双分子荧光互补( BiFC)第60页
  3.2 结果与讨论第60-71页
    3.2.1 OsCOL13生物信息学分析第60-62页
    3.2.2 OsCOL13的组织表达分析第62-64页
    3.2.3 OsCOL13的节律及生长周期表达第64-66页
    3.2.4 OsCOL13蛋白的亚细胞定位分析第66-67页
    3.2.5 OsCOL13的转录激活活性分析第67-68页
    3.2.6 OsCOL13与自身形成同源二聚体第68-70页
    3.2.7 讨论第70-71页
第4章 OsCOL13基因在开花网络中的功能分析第71-90页
  4.1 材料与方法第71-74页
    4.1.1 实验材料第71-72页
    4.1.2 抽穗期调查第72页
    4.1.3 载体构建第72页
    4.1.4 总RNA的提取以及qRT-PCR分析第72页
    4.1.5 酵母单杂交第72页
    4.1.6 地塞米松(DEX)的诱导处理第72-73页
    4.1.7 荧光素酶活性分析第73页
    4.1.8 染色质免疫共沉淀(ChIP)第73-74页
  4.2 结果与讨论第74-90页
    4.2.1 OsCOL13过表达植株中水稻开花相关基因表达分析第74-79页
    4.2.2 OsCOL13在各开花相关突变体或近等基因系中的表达分析第79-81页
    4.2.3 OsphyB对OsCOL13的调控分析第81-83页
    4.2.4 OsCOL13的转录谱分析以及对下游基因的调控分析第83-86页
    4.2.5 OsCOL13对OsLBD38的直接调控分析第86-89页
    4.2.6 讨论第89-90页
结论第90-93页
参考文献第93-107页
附录A(攻读博士学位期间所发表的学术论文目录)第107-109页
附录B 附表第109-112页
致谢第112页

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