论文目录 | |
| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-30页 |
| 1 前言 | 第13-14页 |
| 2 家畜的育种 | 第14-19页 |
| 2.1 选择的作用 | 第14-15页 |
| 2.2 杂种优势在家畜育种中的应用 | 第15-16页 |
| 2.3 数量遗传学在家畜育种中的应用 | 第16-17页 |
| 2.4 生物技术在家畜育种中的应用 | 第17-19页 |
| 2.4.1 分子生物学的应用 | 第17-18页 |
| 2.4.2 转基因技术的应用 | 第18-19页 |
| 3 影响猪的肉质性状的因素 | 第19-24页 |
| 3.1 主效基因 | 第20-22页 |
| 3.1.1 氟烷基因 | 第20页 |
| 3.1.2 酸肉基因 | 第20-21页 |
| 3.1.3 肥胖基因 | 第21-22页 |
| 3.2 动物营养 | 第22-23页 |
| 3.3 动物福利与生物安全 | 第23-24页 |
| 4 启动子功能的分析 | 第24-26页 |
| 4.1 启动子的克隆 | 第24-25页 |
| 4.2 启动子的功能分析 | 第25-26页 |
| 5 候选基因PGM1和UGP2研究进展 | 第26-28页 |
| 5.1 PGM1的研究进展 | 第26-27页 |
| 5.2 UGP2的研究进展 | 第27-28页 |
| 6 研究目的和意义 | 第28-30页 |
| 第二章 猪PGM1的分离克隆、表达分析及其启动子功能研究 | 第30-59页 |
| 1 引言 | 第30页 |
| 2 试验材料 | 第30-34页 |
| 2.1 材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第30页 |
| 2.1.2 组织样品及DNA样品 | 第30页 |
| 2.1.3 载体、菌株和细胞系 | 第30-31页 |
| 2.2 试验主要试剂、仪器和主要溶液的配制 | 第31-34页 |
| 2.2.1 主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 2.2.2 主要溶液的配制与试剂(盒) | 第32-33页 |
| 2.2.3 主要分子生物学软件 | 第33页 |
| 2.2.4 主要数据库 | 第33-34页 |
| 3 试验方法 | 第34-42页 |
| 3.1 猪PGM1基因的分离克隆 | 第34页 |
| 3.2 PCR扩增目的基因 | 第34-35页 |
| 3.3 PCR产物的回收与纯化 | 第35页 |
| 3.4 载体连接 | 第35页 |
| 3.5 转化连接产物 | 第35页 |
| 3.6 阳性克隆的鉴定和测序 | 第35页 |
| 3.7 猪PGM1基因家族的生物信息学分析 | 第35-36页 |
| 3.7.1 猪PGM1基因家族的序列分析 | 第35-36页 |
| 3.7.2 猪PGM1基因家族氨基酸序列多重比对和进化分析 | 第36页 |
| 3.8 猪PGM1基因时空表达分析 | 第36-38页 |
| 3.8.1 组织样品总RNA的提取 | 第36-37页 |
| 3.8.2 总RNA的纯化 | 第37页 |
| 3.8.3 反转录合成cDNA的第一条链 | 第37-38页 |
| 3.8.4 表达分析 | 第38页 |
| 3.9 猪PGM1基因近端启动子研究 | 第38-42页 |
| 3.9.1 近端启动子序列的扩增 | 第38页 |
| 3.9.2 启动子不同缺失片段的获取序列及载体构建 | 第38-39页 |
| 3.9.3 启动子缺失片段转染载体的构建 | 第39页 |
| 3.9.4 启动子在真核细胞中的活性分析 | 第39-42页 |
| 4 结果与讨论 | 第42-59页 |
| 4.1 猪PGM1基因的序列分析 | 第42-48页 |
| 4.1.1 猪PGM1基因核酸序列分析 | 第42-43页 |
| 4.1.2 猪PGM1基因氨基酸序列分析 | 第43-44页 |
| 4.1.3 猪PGM1基因启动子序列分析 | 第44-47页 |
| 4.1.4 讨论 | 第47-48页 |
| 4.2 猪PGM1基因的组织表达分析 | 第48-53页 |
| 4.2.1 猪PGM1基因实时定量表达谱分析 | 第48-50页 |
| 4.2.2 猪PGM1基因在不同发育阶段骨骼肌中的表达分析 | 第50-52页 |
| 4.2.3 猪PGM1基因在不同肌纤维类型骨骼肌中的表达分析 | 第52-53页 |
| 4.2.4 讨论 | 第53页 |
| 4.3 猪PGM1基因的核心启动子分析 | 第53-56页 |
| 4.3.1 讨论 | 第56页 |
| 4.4 小结 | 第56-59页 |
| 第三章 猪UGP2的分离克隆、表达分析及其启动子功能研究 | 第59-75页 |
| 1 引言 | 第59页 |
| 2 试验材料 | 第59页 |
| 3 试验方法 | 第59-60页 |
| 4 结果与讨论 | 第60-75页 |
| 4.1 猪UGP2基因的序列分析 | 第60-65页 |
| 4.1.1 猪UGP2基因核酸序列分析 | 第60页 |
| 4.1.2 猪UGP2基因氨基酸序列分析 | 第60-62页 |
| 4.1.3 猪UGP2基因启动子序列分析 | 第62-65页 |
| 4.1.4 讨论 | 第65页 |
| 4.2 猪UGP2基因的组织表达分析 | 第65-70页 |
| 4.2.1 猪UGP2基因实时定量表达谱分析 | 第65-67页 |
| 4.2.2 猪UGP2基因在不同发育阶段骨骼肌中的表达分析 | 第67-69页 |
| 4.2.3 猪UGP2基因在不同肌纤维类型骨骼肌中的表达分析 | 第69-70页 |
| 4.2.4 讨论 | 第70页 |
| 4.3 猪UGP2基因的核心启动子分析 | 第70-73页 |
| 4.4 小结 | 第73-75页 |
| 第四章 结论 | 第75-77页 |
| 1 主要结果 | 第75-76页 |
| 2 主要创新点 | 第76页 |
| 3 下一步研究计划 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 在读期间发表论文 | 第89-90页 |
| 附表 中英文缩写对照表 | 第90-91页 |
| 附图1 猪PGM1基因启动子区域第4个缺失片段序列 | 第91-92页 |
| 附图2 猪UGP2基因启动子区域第7个缺失片段序列 | 第92-93页 |
| 附图3 本研究所用载体信息 | 第93-94页 |
