论文目录 | |
| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 缩略词表(Abbreviation words) | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-42页 |
| 1 蛋白质的翻译后修饰研究进展 | 第18-23页 |
| 1.1 糖基化 | 第18-19页 |
| 1.2 甲基化 | 第19-20页 |
| 1.3 乙酰化 | 第20-21页 |
| 1.4 磷酸化 | 第21-22页 |
| 1.5 泛素化 | 第22-23页 |
| 2 SUMO基因的研究进展 | 第23-36页 |
| 2.1 SUMO家族 | 第23-24页 |
| 2.2 SUMO化修饰过程及其酶体系 | 第24-28页 |
| 2.2.1 SUMO化修饰过程 | 第24-25页 |
| 2.2.2 SUMO化酶体系 | 第25-28页 |
| 2.3 SUMO化修饰的底物蛋白研究 | 第28-31页 |
| 2.4 SUMO化修饰的生物学功能 | 第31-36页 |
| 2.4.1 调节蛋白间的互作 | 第32-33页 |
| 2.4.2 调节蛋白定位 | 第33页 |
| 2.4.3 调节蛋白的核浆转运 | 第33-34页 |
| 2.4.4 调节信号通路,影响转录活性 | 第34页 |
| 2.4.5 维持染色体的正常结构和功能 | 第34-35页 |
| 2.4.6 SUMO化与细胞凋亡 | 第35-36页 |
| 3 PTX3 | 第36-37页 |
| 3.1 PTX3的组成和结构 | 第36-37页 |
| 3.2 PTX3的作用 | 第37页 |
| 4 颗粒细胞对卵泡发育的影响 | 第37-41页 |
| 4.1 卵泡发育过程 | 第37-38页 |
| 4.2 颗粒细胞的发育过程 | 第38-39页 |
| 4.3 颗粒细胞对卵泡发育的影响 | 第39页 |
| 4.4 颗粒细胞的凋亡 | 第39-41页 |
| 5 研究的目的和意义 | 第41-42页 |
| 第二章 SUMO-1和UBC9真核表达载体的构建及鉴定 | 第42-56页 |
| 1 前言 | 第42页 |
| 2 材料和方法 | 第42-50页 |
| 2.1 材料 | 第42-43页 |
| 2.1.1 主要生化材料及试剂 | 第42-43页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第43页 |
| 2.2 方法 | 第43-50页 |
| 2.2.1 小鼠颗粒细胞总RNA提取 | 第43-44页 |
| 2.2.2 反转录cDNA | 第44-45页 |
| 2.2.3 SUMO-1及UBC9引物的设计及片段的扩增 | 第45-46页 |
| 2.2.4 PCR产物回收和纯化 | 第46-47页 |
| 2.2.5 连接反应、转化、挑选阳性克隆、测序验证以及质粒抽提 | 第47-48页 |
| 2.2.6 重组质粒的构建 | 第48-50页 |
| 3 结果 | 第50-55页 |
| 3.1 小鼠颗粒细胞总RNA结果检测 | 第50页 |
| 3.2 SUMO-1及UBC9基因片段扩增 | 第50-51页 |
| 3.3 SUMO-1及UBC9各种重组载体的构建和鉴定 | 第51-54页 |
| 3.4 质粒测序鉴定 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55页 |
| 5. 小结 | 第55-56页 |
| 第三章 SUMO-1及UBC9对小鼠卵巢颗粒细胞的作用研究 | 第56-94页 |
| 1 前言 | 第56-57页 |
| 2 材料与方法 | 第57-70页 |
| 2.1 材料 | 第57-60页 |
| 2.1.1 实验动物、材料及试剂 | 第57-60页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第60页 |
| 2.2 方法 | 第60-70页 |
| 2.2.1 卵巢颗粒细胞培养 | 第60-62页 |
| 2.2.2 颗粒细胞转染 | 第62页 |
| 2.2.3 细胞周期检测 | 第62-63页 |
| 2.2.4 细胞凋亡检测 | 第63-64页 |
| 2.2.5 细胞增殖检测 | 第64页 |
| 2.2.6 Western Blotting(WB) | 第64-67页 |
| 2.2.7 免疫组织化学(IHC) | 第67-69页 |
| 2.2.8 免疫细胞化学(ICC) | 第69-70页 |
| 3 结果 | 第70-89页 |
| 3.1 pEGFP-C1-SUMO-1及pEGFP-C1-UBC9重组质粒转染小鼠颗粒细胞 | 第70-71页 |
| 3.2 SUMO-1及UBC9在小鼠卵巢及颗粒细胞中的表达规律 | 第71-75页 |
| 3.3 SUMO-1及UBC9在小鼠卵巢中的定位 | 第75-80页 |
| 3.4 SUMO-1及UBC9对小鼠颗粒细胞亚细胞定位的影响 | 第80-82页 |
| 3.5 SUMO-1及UBC9对颗粒细胞周期的影响 | 第82-84页 |
| 3.6 SUMO-1及UBC9对颗粒细胞增殖的影响 | 第84-85页 |
| 3.7 SUMO-1及UBC9对颗粒细胞凋亡的影响 | 第85-89页 |
| 4 讨论 | 第89-93页 |
| 4.1 SUMO-1和UBC9在卵巢及颗粒细胞中表达的作用 | 第89-90页 |
| 4.2 SUMO-1和UBC9对细胞定位的影响 | 第90-91页 |
| 4.3 SUMO-1和UBC9对颗粒细胞周期、增殖和凋亡的调控 | 第91-93页 |
| 5 小结 | 第93-94页 |
| 第四章 PTX3的SUMO-1修饰在小鼠卵巢颗粒细胞中的研究 | 第94-107页 |
| 1 前言 | 第94页 |
| 2 材料和方法 | 第94-97页 |
| 2.1 材料 | 第94-95页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第94-95页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第95页 |
| 2.2 方法 | 第95-97页 |
| 2.2.1 PTX3片段合成 | 第95页 |
| 2.2.2 PTX3片段回收和纯化 | 第95页 |
| 2.2.3 PTX3重组质粒的构建 | 第95-96页 |
| 2.2.4 卵巢颗粒细胞培养及转染 | 第96页 |
| 2.2.5 Western Blotting(WB) | 第96页 |
| 2.2.6 免疫细胞化学(ICC) | 第96页 |
| 2.2.7 免疫共沉淀(IP) | 第96-97页 |
| 3 结果 | 第97-105页 |
| 3.1 PTX3真核表达载体的构建 | 第97-101页 |
| 3.1.1 PTX3的SUMO化位点预测 | 第97-98页 |
| 3.1.2 PTX3及PTX3~(k203R)目的片段的扩增 | 第98-99页 |
| 3.1.3 pCMV-N-HA-PTX3/pCMV-N-HA-PTX3~(K203R)基因真核表达载体的构建和鉴定 | 第99-100页 |
| 3.1.4 质粒测序鉴定 | 第100-101页 |
| 3.2 PTX3的SUMO-1修饰对颗粒细胞的影响 | 第101-105页 |
| 3.2.1 PTX3的SUMO-1修饰位点检测及其蛋白表达情况研究 | 第101-103页 |
| 3.2.2 PTX3的SUMO-1修饰对其在颗粒细胞定位的影响 | 第103-105页 |
| 4 讨论 | 第105-106页 |
| 5 小结 | 第106-107页 |
| 结论 | 第107-109页 |
| 研究创新点与不足 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-138页 |
| 附录Ⅰ 发表的主要文章 | 第138-139页 |
| 附录Ⅱ 在Genbank登录的基因片段 | 第139-140页 |
| 附录Ⅲ 出版的书籍 | 第140页 |
| 附录Ⅳ 参加的学术活动 | 第140-141页 |
| 致谢 | 第141页 |
