论文目录 | |
| 致谢 | 第1-14页 |
| 摘要 | 第14-18页 |
| 1 真菌抗氧化酶系及内吞标志位点蛋白的研究现状 | 第18-31页 |
| 1.1 生防真菌的胁迫应答机制 | 第18-21页 |
| 1.1.1 抗氧化 | 第18-19页 |
| 1.1.2 耐高温胁迫 | 第19页 |
| 1.1.3 抗紫外辐射 | 第19-20页 |
| 1.1.4 耐化学农药 | 第20-21页 |
| 1.2 谷氧还蛋白与谷胱甘肽还原酶的功能 | 第21-23页 |
| 1.3 硫氧还蛋白与硫氧还蛋白还原酶的功能 | 第23-27页 |
| 1.3.1 硫氧还蛋白 | 第24-25页 |
| 1.3.2 硫氧还蛋白还原酶 | 第25-27页 |
| 1.4 内吞标志位点蛋白PIL1和LsP1的结构与功能 | 第27-29页 |
| 1.5 展望 | 第29-31页 |
| 2 球孢白僵菌谷氧还蛋白及谷胱甘肽还原酶的功能解析 | 第31-59页 |
| 2.1 材料 | 第33-34页 |
| 2.1.1 菌株及培养条件 | 第33页 |
| 2.1.2 试剂及试剂盒 | 第33-34页 |
| 2.2 方法 | 第34-45页 |
| 2.2.1 真菌核酸提取 | 第34-35页 |
| 2.2.2 球孢白僵菌Grx及Glr的鉴定及分类 | 第35-36页 |
| 2.2.3 Grx/Glr单基因敲除/回补菌株的构建与鉴定 | 第36-38页 |
| 2.2.4 grx和glr的转录水平分析 | 第38-39页 |
| 2.2.5 SOD总酶活、CAT总酶活及GSH-POD总酶活的测定 | 第39-41页 |
| 2.2.6 胞内谷胱甘肽含量的测定 | 第41-42页 |
| 2.2.7 胞内ROS含量的测定 | 第42页 |
| 2.2.8 关键铁离子转运蛋白基因的转录水平测定 | 第42-43页 |
| 2.2.9 生物累积量、产孢量及萌发速率测定 | 第43页 |
| 2.2.10 化学及环境胁迫敏感性的测定 | 第43-44页 |
| 2.2.11 分生孢子毒力的生物测定 | 第44-45页 |
| 2.2.12 数据处理与分析 | 第45页 |
| 2.3 结果与分析 | 第45-55页 |
| 2.3.1 球孢白僵菌GRX/GLR家族的结构特征与分类 | 第45-47页 |
| 2.3.2 各grx或glr单基因缺失上调伙伴基因的转录表达 | 第47-50页 |
| 2.3.3 各grx或glr单基因缺失对胞内GSH/GSSG比率及ROS水平的影响 | 第50-51页 |
| 2.3.4 各grx或glr单基因缺失对胞内SOD、CAT及GSH-POD总酶活的影响 | 第51-52页 |
| 2.3.5 各grx或glr缺失对Fe~(3+)抗性及其转运蛋白转录表达的影响 | 第52-53页 |
| 2.3.6 各grx或glr缺失对胁迫应答的影响 | 第53页 |
| 2.3.7 各grx或glr缺失对生防潜能相关性状的影响 | 第53-55页 |
| 2.4 讨论 | 第55-59页 |
| 3 球孢白僵菌硫氧还蛋白酶的功能解析 | 第59-78页 |
| 3.1 材料 | 第60页 |
| 3.1.1 菌株和培养条件 | 第60页 |
| 3.1.2 试剂和试剂盒 | 第60页 |
| 3.2 方法 | 第60-65页 |
| 3.2.1 真菌核酸的提取 | 第60页 |
| 3.2.2 六个Trx同源蛋白的序列分析 | 第60-61页 |
| 3.2.3 各Trx基因的敲除与回补菌株构建与鉴定 | 第61页 |
| 3.2.4 各trx的转录分析 | 第61-62页 |
| 3.2.5 各Trx的亚细胞定位 | 第62-63页 |
| 3.2.6 胞内SOD总酶活、谷胱甘肽含量及Trx总酶活的测定 | 第63-64页 |
| 3.2.7 胁迫敏感性的测定 | 第64-65页 |
| 3.2.8 分生孢子产量及萌发速率测定 | 第65页 |
| 3.2.9 分生孢子毒力的生物测定 | 第65页 |
| 3.2.10 数据处理与分析 | 第65页 |
| 3.3 结果与分析 | 第65-75页 |
| 3.3.1 球孢白僵菌TRX家族的结构特征与分类 | 第65-67页 |
| 3.3.2 球孢白僵菌各Trx的亚细胞定位 | 第67-69页 |
| 3.3.3 各trx的单基因缺失对伙伴基因转录表达的影响 | 第69页 |
| 3.3.4 各trx的缺失对胞内SOD及Trx总酶活的影响 | 第69-72页 |
| 3.3.5 各trx的缺失对胞内谷胱甘肽状态的影响 | 第72-73页 |
| 3.3.6 各trx的缺失对生防潜能的影响 | 第73-75页 |
| 3.4 讨论 | 第75-78页 |
| 4 球孢白僵菌硫氧还蛋白酶还原酶的功能解析 | 第78-100页 |
| 4.1 材料 | 第79页 |
| 4.1.1 菌株和培养条件 | 第79页 |
| 4.1.2 试剂和试剂盒 | 第79页 |
| 4.2 方法 | 第79-84页 |
| 4.2.1 真菌核酸的提取 | 第79页 |
| 4.2.2 球孢白僵菌Trr的基因克隆及序列分析 | 第79-80页 |
| 4.2.3 Trr1/2的亚细胞定位 | 第80页 |
| 4.2.4 trr1和trr2突变株的构建与鉴定 | 第80-81页 |
| 4.2.5 trr转录动态及Atrr/trx转录变化的分析 | 第81-82页 |
| 4.2.6 SOD、CAT、POD及Trx总酶活的测定 | 第82-83页 |
| 4.2.7 胞内谷胱甘肽含量的测定 | 第83页 |
| 4.2.8 半胱氨酸营养缺陷的检测 | 第83页 |
| 4.2.9 分生孢子产量及其特征的分析 | 第83页 |
| 4.2.10 抗逆力测定 | 第83-84页 |
| 4.2.11 分生孢子毒力的生物测定 | 第84页 |
| 4.2.12 数据处理与分析 | 第84页 |
| 4.3 结果与分析 | 第84-95页 |
| 4.3.1 球孢白僵菌TRR的基本特征 | 第84-87页 |
| 4.3.2 trr缺失及其缺失背景下超表达trx_i对Trx总酶活的影响 | 第87-89页 |
| 4.3.3 突变株Trx、SOD、CAT及POD总酶活的变化 | 第89-90页 |
| 4.3.4 突变株GSH/GSSG比值的变化 | 第90-91页 |
| 4.3.5 突变株半胱氨酸营养缺陷的变化 | 第91-92页 |
| 4.3.6 突变株对氧化胁迫的敏感性变化 | 第92-93页 |
| 4.3.7 突变株生防潜能的变化 | 第93-95页 |
| 4.4 讨论 | 第95-100页 |
| 5 球孢白僵菌内吞标志位点蛋白PIL1及LSP1的功能解析 | 第100-117页 |
| 5.1 材料 | 第101页 |
| 5.1.1 菌株和培养条件 | 第101页 |
| 5.1.2 试剂和试剂盒 | 第101页 |
| 5.2 方法 | 第101-106页 |
| 5.2.1 真菌核酸的提取 | 第101页 |
| 5.2.2 球孢白僵菌Pil1及Lsp1的序列分析 | 第101-102页 |
| 5.2.3 球孢白僵菌pil1及lsp1缺失突变株的构建与鉴定 | 第102-103页 |
| 5.2.4 Pil1和Lsp1的亚细胞定位 | 第103页 |
| 5.2.5 细胞自噬相关基因转录水平的测定 | 第103-104页 |
| 5.2.6 菌丝细胞自噬体的检测 | 第104-105页 |
| 5.2.7 碳源利用率测定 | 第105页 |
| 5.2.8 胁迫敏感性的测定 | 第105-106页 |
| 5.2.9 分生孢子产量及萌发速率的检测 | 第106页 |
| 5.2.10 分生孢子毒力的生物测定 | 第106页 |
| 5.2.11 数据处理与分析 | 第106页 |
| 5.3 结果与分析 | 第106-114页 |
| 5.3.1 球孢白僵菌Pil1和Lsp1的结构特征 | 第106页 |
| 5.3.2 球孢白僵菌Pil1和Lsp1的亚细胞定位 | 第106-108页 |
| 5.3.3 pil1/lsp1缺失对胞壁结构、多胁迫应答及碳源利用的影响 | 第108-111页 |
| 5.3.4 pil1/lsp1缺失导致细胞自噬异常 | 第111-113页 |
| 5.3.5 pil1和lsp1缺失对球孢白僵菌生防潜能的影响 | 第113-114页 |
| 5.4 讨论 | 第114-117页 |
| 6 结语 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-134页 |
| SUMMARY | 第134-138页 |
| 附录：攻读博士学位期间的主要成果 | 第138页 |
