论文目录 | |
| 致谢 | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-14页 |
| 1 昆虫病原真菌抗逆机制与小GTP酶的研究现状 | 第14-24页 |
| 1.1 胁迫损伤与抗逆机制 | 第14-17页 |
| 1.1.1 高温 | 第14-15页 |
| 1.1.2 阳光紫外辐射 | 第15页 |
| 1.1.3 农用化合物 | 第15-16页 |
| 1.1.4 氧化胁迫 | 第16-17页 |
| 1.2 小GTP酶概述 | 第17-23页 |
| 1.2.1 结构、分类及活化机理 | 第17-18页 |
| 1.2.2 Ras家族的功能 | 第18-19页 |
| 1.2.3 Rho家族的功能 | 第19-21页 |
| 1.2.4 小G蛋白Miro | 第21-23页 |
| 1.3 展望 | 第23-24页 |
| 2 球孢白僵菌Miro调控的线粒体动态与生防潜能之关联 | 第24-39页 |
| 2.1 材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 菌株及培养基 | 第25页 |
| 2.1.2 试剂和试剂盒 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 真菌DNA和RNA提取 | 第26-27页 |
| 2.2.2 bMiro的结构、系统聚类及转录表达特征的分析 | 第27页 |
| 2.2.3 bMiro的亚细胞定位 | 第27-28页 |
| 2.2.4 bmiro敲除及回补株的构建 | 第28-29页 |
| 2.2.5 胞内ATP含量及线粒体总量测定 | 第29页 |
| 2.2.6 线粒体形态、分布及流动性的显微观察 | 第29-30页 |
| 2.2.7 细胞对金属离子胁迫的应答 | 第30页 |
| 2.2.8 生防潜能相关表型的评价 | 第30-31页 |
| 2.2.9 数据统计分析 | 第31页 |
| 2.3 结果 | 第31-36页 |
| 2.3.1 bMiro的结构与转录表达特征 | 第31-33页 |
| 2.3.2 bMiro的亚细胞定位 | 第33页 |
| 2.3.3 bmiro缺失改变胞内线粒体分布并降低线粒体总量及ATP含量 | 第33-34页 |
| 2.3.4 bmiro缺失降低胞内线粒体流动性及金属离子敏感性 | 第34-36页 |
| 2.3.5 bmiro缺失对生防潜能相关表型的影响 | 第36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-39页 |
| 3 球孢白僵菌Ras3经HOG通路调控产孢、抗逆力及毒力 | 第39-53页 |
| 3.1 材料 | 第40页 |
| 3.1.1 菌株及培养基 | 第40页 |
| 3.1.2 试剂和试剂盒 | 第40页 |
| 3.2 方法 | 第40-43页 |
| 3.2.1 Ras3序列结构与系统聚类分析 | 第40页 |
| 3.2.2 Ras3的亚细胞定位 | 第40页 |
| 3.2.3 ras3敲除及回补菌株的构建和鉴定 | 第40-41页 |
| 3.2.4 菌落生长,分生孢子产量及孢子萌发速率测定 | 第41页 |
| 3.2.5 药物与环境胁迫应答 | 第41页 |
| 3.2.6 相关基因转录水平分析 | 第41-42页 |
| 3.2.7 超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)总酶活检测 | 第42-43页 |
| 3.2.8 菌株毒力的生物测定 | 第43页 |
| 3.2.9 Western杂交 | 第43页 |
| 3.2.10 数据统计分析 | 第43页 |
| 3.3 结果 | 第43-50页 |
| 3.3.1 球孢白僵菌Ras3的结构特征、转录表达及亚细胞定位 | 第44-46页 |
| 3.3.2 ras3缺失对ras1和ras2转录模式的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.3 Ras3对生物防治潜能的贡献 | 第47-48页 |
| 3.3.4 Ras3参与调控的胁迫应答 | 第48页 |
| 3.3.5 Ras3调控胁迫应答的机理 | 第48-50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-53页 |
| 4 球孢白僵菌Rho家族小G蛋白的功能解析 | 第53-67页 |
| 4.1 材料 | 第54页 |
| 4.1.1 菌株及培养基 | 第54页 |
| 4.1.2 试剂和试剂盒 | 第54页 |
| 4.2 方法 | 第54-57页 |
| 4.2.1 球孢白僵菌Rho家族小G蛋白的结构特征、转录表达及聚类分析 | 第54-55页 |
| 4.2.2 各Rho基因突变菌株的构建和鉴定 | 第55页 |
| 4.2.3 生防潜能相关表型的评价 | 第55-57页 |
| 4.2.4 数据统计分析 | 第57页 |
| 4.3 结果 | 第57-65页 |
| 4.3.1 球孢白僵菌Rho家族小G蛋白的基本特征 | 第57-60页 |
| 4.3.2 各rho缺失或点突变对球孢白僵菌生长和菌丝形态的影响 | 第60-61页 |
| 4.3.3 各rho缺失或点突变对球孢白僵菌产孢、孢子性状及毒力的影响 | 第61-63页 |
| 4.3.4 各rAo缺失或点突变株对金属离子及化学胁迫的敏感性变化 | 第63-65页 |
| 4.4 讨论 | 第65-67页 |
| 5 结语 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-83页 |
| Summary | 第83-86页 |
| 附录：攻读博士学位期间主要成果 | 第86页 |
