论文目录 | |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-33页 |
| 1 真菌毒素概述 | 第17-21页 |
| 1.1 黄曲霉毒素B_1 | 第17-18页 |
| 1.2 赭曲霉毒素A | 第18-19页 |
| 1.3 伏马毒素B_1 | 第19页 |
| 1.4 玉米赤霉烯酮 | 第19-20页 |
| 1.5 真菌毒素的污染情况和限量标准 | 第20-21页 |
| 2 真菌毒素检测技术研究进展 | 第21-30页 |
| 2.1 生物鉴定法 | 第21页 |
| 2.2 化学分析法 | 第21-22页 |
| 2.3 仪器分析法 | 第22-23页 |
| 2.4 免疫分析法 | 第23-30页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第30-33页 |
| 第二部分 试验研究 | 第33-133页 |
| 第一章 赭曲霉毒素A单克隆抗体的鉴定及间接竞争ELISA检测技术 | 第35-55页 |
| 1 材料与方法 | 第36-42页 |
| 1.1 材料 | 第36-37页 |
| 1.2 偶联抗原的制备 | 第37-38页 |
| 1.3 单克隆抗体的制备与纯化 | 第38-39页 |
| 1.4 单克隆抗体免疫学性质鉴定 | 第39-40页 |
| 1.5 间接竞争ELISA检测方法条件优化 | 第40-41页 |
| 1.6 间接竞争ELISA与商品化试剂盒比较 | 第41-42页 |
| 2 结果 | 第42-52页 |
| 2.1 偶联抗原的鉴定 | 第42-43页 |
| 2.2 单克隆抗体亚型和效价 | 第43-44页 |
| 2.3 单克隆抗体相关免疫学性质鉴定 | 第44-46页 |
| 2.4 间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第46-51页 |
| 2.5 与商品化试剂盒的比较 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| 3.1 毒素小分子偶联抗原的制备 | 第52-53页 |
| 3.2 单克隆抗体的免疫学性质 | 第53页 |
| 3.3 间接竞争ELISA检测方法 | 第53-55页 |
| 第二章 基于免疫磁珠和生物素-链霉亲和素的玉米赤霉烯酮新型酶联免疫检测技术及初步应用 | 第55-71页 |
| 1 材料与方法 | 第56-63页 |
| 1.1 材料 | 第56-57页 |
| 1.2 单克隆抗体的制备与纯化 | 第57页 |
| 1.3 偶联抗原的制备 | 第57-58页 |
| 1.4 生物素标记偶联抗原的制备 | 第58-59页 |
| 1.5 磁珠抗体复合物的制备 | 第59-60页 |
| 1.6 新型酶联免疫检测方法的优化 | 第60-62页 |
| 1.7 新型酶联免疫检测方法与LC-MS/MS对实际样本的检测 | 第62-63页 |
| 2 结果 | 第63-68页 |
| 2.1 偶联抗原的鉴定 | 第63-64页 |
| 2.2 生物素标记偶联抗原的鉴定 | 第64页 |
| 2.3 磁珠抗体复合物的鉴定 | 第64-65页 |
| 2.4 新型酶联免疫检测方法最佳条件的确定 | 第65页 |
| 2.5 新型酶联免疫检测方法标准曲线 | 第65-66页 |
| 2.6 交叉反应性分析 | 第66页 |
| 2.7 基质影响的消除 | 第66-67页 |
| 2.8 加标回收试验和回收率测定 | 第67页 |
| 2.9 新型酶联免疫检测方法和LC-MS/MS相关性分析 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-71页 |
| 3.1 磁珠和生物素链-霉亲和素系统在免疫学检测中的应用 | 第68-69页 |
| 3.2 与其他方法的比较 | 第69-71页 |
| 第三章 赭曲霉毒素A磁珠-电化学免疫传感检测技术及初步应用 | 第71-85页 |
| 1 材料与方法 | 第72-75页 |
| 1.1 材料 | 第72页 |
| 1.2 磁珠抗体和磁珠抗原复合物的制备 | 第72-73页 |
| 1.3 辣根过氧化物酶标记物的制备 | 第73-74页 |
| 1.4 以磁珠为固相载体的竞争反应模式优化 | 第74页 |
| 1.5 对苯二酚和对苯醌在丝网印刷电极上的电化学行为 | 第74页 |
| 1.6 电化学检测最佳底物浓度的优化 | 第74-75页 |
| 1.7 磁珠电化学免疫传感器的制备 | 第75页 |
| 2 结果 | 第75-83页 |
| 2.1 辣根过氧化物酶标记物的鉴定 | 第75-77页 |
| 2.2 以磁珠为固相载体的最佳竞争反应模式确定 | 第77-79页 |
| 2.3 对苯二酚与对苯醌的电化学性质 | 第79-80页 |
| 2.4 电化学底物中双氧水和对苯二酚最佳浓度 | 第80-81页 |
| 2.5 磁珠-电化学免疫传感检测法标准曲线 | 第81-82页 |
| 2.6 加标回收试验和回收率测定 | 第82页 |
| 2.7 磁珠-电化学免疫传感器和LC-MS/MS的比较 | 第82-83页 |
| 3 讨论 | 第83-85页 |
| 3.1 电化学免疫传感器在食品安全检测领域的应用 | 第83-84页 |
| 3.2 磁珠-电化学免疫传感器的的优势 | 第84-85页 |
| 第四章 赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮二联胶体金试纸条的制备及初步应用 | 第85-117页 |
| 1 材料与方法 | 第86-95页 |
| 1.1 材料 | 第86-87页 |
| 1.2 胶体金颗粒的制备 | 第87页 |
| 1.3 胶体金标记抗体最佳pH的确定 | 第87-88页 |
| 1.4 胶体金标记抗体最佳浓度的确定 | 第88页 |
| 1.5 金标抗体的制备 | 第88-89页 |
| 1.6 金标抗体保存液的优化 | 第89页 |
| 1.7 胶体金免疫层析试纸条包被抗原的选择 | 第89页 |
| 1.8 胶体金免疫层析试纸条组成材料的优化 | 第89-90页 |
| 1.9 胶体金免疫层析相关条件的优化 | 第90-91页 |
| 1.10 金标抗体与包被抗原浓度的优化 | 第91页 |
| 1.11 二联定性胶体金免疫层析试纸条的制备 | 第91-93页 |
| 1.12 单一定量胶体金免疫层析试纸条的制备 | 第93-94页 |
| 1.13 二联定量胶体金免疫层析试纸条的制备 | 第94-95页 |
| 1.14 样本萃取与加标试验 | 第95页 |
| 1.15 胶体金免疫层析试纸条与LC-MS/MS比较试验 | 第95页 |
| 2 结果 | 第95-114页 |
| 2.1 胶体金溶液的鉴定 | 第95-96页 |
| 2.2 胶体金与单克隆抗体最佳结合pH | 第96-97页 |
| 2.3 单克隆抗体最佳标记量 | 第97-98页 |
| 2.4 金标抗体的鉴定结果 | 第98页 |
| 2.5 金标抗体保存液的确定 | 第98-99页 |
| 2.6 胶体金免疫层析试纸条包被抗原 | 第99页 |
| 2.7 胶体金免疫层析试纸条组成材料 | 第99-100页 |
| 2.8 免疫层析相关条件的确定 | 第100页 |
| 2.9 二联定性胶体金免疫层析试纸条检测特异性与检测限 | 第100-103页 |
| 2.10 二联定性胶体金免疫层析试纸条与LC-MS/MS比较 | 第103-108页 |
| 2.11 二联定量胶体金免疫层析试纸条的检测效果 | 第108-111页 |
| 2.12 二联定量胶体金试纸条与LC-MS/MS的比较 | 第111-114页 |
| 3 讨论 | 第114-117页 |
| 3.1 二联胶体金免疫层析试纸条的制备 | 第114-115页 |
| 3.2 二联胶体金免疫层析试纸条的优势 | 第115页 |
| 3.3 二联胶体金免疫层析试纸条的应用前景 | 第115-117页 |
| 第五章 真菌毒素四联定量抗体芯片检测技术及其初步应用 | 第117-133页 |
| 1 材料与方法 | 第118-125页 |
| 1.1 材料 | 第118页 |
| 1.2 黄曲霉毒素B_1偶联抗原的制备 | 第118-119页 |
| 1.3 伏马毒素B_1偶联抗原的制备 | 第119-120页 |
| 1.4 生物素标记偶联抗原的制备 | 第120页 |
| 1.5 真菌毒素单一抗体芯片检测模式的优化 | 第120-122页 |
| 1.6 多重检测模式下四种真菌毒素交叉反应性的测定 | 第122-123页 |
| 1.7 真菌毒素抗体芯片多重检测模式的优化 | 第123-124页 |
| 1.8 抗体芯片检测法在玉米样本中的初步应用 | 第124-125页 |
| 2 结果 | 第125-131页 |
| 2.1 黄曲霉毒素B_1和伏马毒素B_1偶联抗原的鉴定 | 第125页 |
| 2.2 生物素标记偶联抗原的鉴定 | 第125-127页 |
| 2.3 真菌毒素单一抗体芯片检测方法的建立 | 第127页 |
| 2.4 多重检测模式下四种真菌交叉反应性 | 第127-128页 |
| 2.5 四种真菌毒素同时检测标准曲线的绘制 | 第128-130页 |
| 2.6 在玉米样本中的检测效果 | 第130-131页 |
| 3 讨论 | 第131-133页 |
| 3.1 芯片检测方法的应用 | 第131页 |
| 3.2 抗原和抗体对芯片法检测效果的影响 | 第131页 |
| 3.3 抗体芯片高通量多重检测模式 | 第131-132页 |
| 3.4 本研究建立的抗体芯片法优势 | 第132-133页 |
| 全文总结 | 第133-135页 |
| 创新点 | 第135-137页 |
| 参考文献 | 第137-153页 |
| 主要名词缩写 | 第153-155页 |
| 作者简介 | 第155-157页 |
| 攻读博士学位期间科研成果 | 第157-159页 |
| 致谢 | 第159页 |
