论文目录 | |
| 英文缩略语对照表 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 第1章 文献综述 | 第16-40页 |
| 1. 脊椎动物性别决定和分化研究进展 | 第17-23页 |
| 2. SF-1 在脊椎动物中的研究现状 | 第23-36页 |
| 2.1 SF-1 的表达与功能 | 第24-31页 |
| 2.2 SF-1 调控基因表达作用的在体研究 | 第31-32页 |
| 2.3 基于小鼠敲除模型研究SF-1 在分化和发育中的作用 | 第32-34页 |
| 2.4 SF-1 与人类疾病 | 第34-35页 |
| 2.5 SF-1 在硬骨鱼类的克隆及表达研究 | 第35-36页 |
| 3. 科学问题的提出及本研究的目的意义 | 第36-40页 |
| 第2章 罗非鱼Sf-1 多克隆抗体制备及表达研究 | 第40-54页 |
| 1.引言 | 第40-41页 |
| 2. 材料与方法 | 第41-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第41页 |
| 2.2 主要试剂 | 第41-42页 |
| 2.3 实验方法 | 第42-46页 |
| 3 结果 | 第46-50页 |
| 3.1 转录组分析sf-1 在尼罗罗非鱼性腺中的表达 | 第46-47页 |
| 3.2 qRT-PCR检测sf-1 在Foxl2敲除罗非鱼性腺中的表达 | 第47页 |
| 3.3 Sf-1 重组蛋白的SDS-PAGE检测 | 第47-48页 |
| 3.4 Western blot检测Sf-1 在性腺中的表达 | 第48-49页 |
| 3.5 Sf-1 在罗非鱼精巢与卵巢中的细胞定位 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-54页 |
| 4.1 Sf-1 在卵巢表达的下调主要是由于Foxl2的转录抑制作用 | 第51页 |
| 4.2 Sf-1 在鱼类性腺中也表达于主要的类固醇生成细胞 | 第51-54页 |
| 第3章 利用CRISPR/CAS9基因敲除技术研究SF-1 功能 | 第54-70页 |
| 1 引言 | 第54-55页 |
| 2 材料和方法 | 第55-59页 |
| 2.1 实验动物 | 第55页 |
| 2.2 主要试剂和载体 | 第55页 |
| 2.3 实验方法 | 第55-59页 |
| 3 结果 | 第59-67页 |
| 3.1 CRISPR/Cas9成功敲除罗非鱼sf-1 基因 | 第59-62页 |
| 3.2 Sf-1 突变对罗非鱼性腺发育的影响 | 第62-64页 |
| 3.3 Sf-1 突变位点2与位点1表型一致 | 第64-65页 |
| 3.4 Sf-1 突变对罗非鱼雌雄激素生成的影响 | 第65-66页 |
| 3.5 Sf-1 突变对罗非鱼生长的影响 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-70页 |
| 4.1 Sf-1 也是鱼类调控类固醇生成的主要转录因子 | 第67页 |
| 4.2 Sf-1 突变会导致性腺发育缺陷及突变鱼肥满度增加 | 第67-70页 |
| 第4章 甲基睾酮与雌二醇回救SF-1 突变的性腺发育缺陷 | 第70-78页 |
| 1 引言 | 第70-71页 |
| 2 材料和方法 | 第71-72页 |
| 2.1 实验动物 | 第71页 |
| 2.2 主要试剂 | 第71页 |
| 2.3 实验方法 | 第71-72页 |
| 3 结果 | 第72-76页 |
| 3.1 低浓度E2与MT均部分回救Sf-1 突变性腺表型 | 第72-73页 |
| 3.2 高浓度E2部分、MT完全回救Sf-1 突变性腺表型 | 第73-74页 |
| 3.3 Sf-1 突变和MT回救处理对雄性通路基因表达的影响 | 第74-76页 |
| 3.4 MT回救处理对Cyp11b2表达的影响 | 第76页 |
| 4 讨论 | 第76-78页 |
| 4.1 MT单独处理完全回救精巢发育缺陷的表型 | 第76-77页 |
| 4.2 E2单独处理只能部分回救卵巢发育缺陷的表型 | 第77-78页 |
| 第5章 SF-1 杂合突变导致由雌向雄的性逆转 | 第78-92页 |
| 1 引言 | 第78-79页 |
| 2 材料和方法 | 第79-81页 |
| 2.1 主要试剂 | 第79页 |
| 2.2 Sf-1 突变F1代杂合子的建立 | 第79页 |
| 2.3 实验方法 | 第79-81页 |
| 3 结果 | 第81-89页 |
| 3.1 Sf-1 杂合突变形成一个截断的蛋白 | 第81-84页 |
| 3.2 Sf-1 杂合突变导致由雌向雄的性逆转 | 第84-85页 |
| 3.3 Sf-1 突变鱼的性腺成熟系数（GSI）显著降低 | 第85-86页 |
| 3.4 Sf-1 杂合突变XX鱼性腺类固醇生成模式与正常XY鱼相似 | 第86-88页 |
| 3.5 Sf-1 纯合突变存活曲线 | 第88-89页 |
| 4 讨论 | 第89-92页 |
| 4.1 Sf-1 突变在罗非鱼导致由雌向雄的性逆转 | 第89-90页 |
| 4.2 Sf-1 纯合突变可能致死 | 第90-92页 |
| 结论 | 第92-94页 |
| 本研究的主要创新点 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-116页 |
| 致谢 | 第116-118页 |
| 在读期间发表论文 | 第118页 |
| 在读期间参加科研情况 | 第118页 |
