论文目录 | |
摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-14页 |
缩略语 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-45页 |
1 小麦抗赤霉病研究进展 | 第15-27页 |
1.1 小麦赤霉病的发生及危害 | 第15-16页 |
1.2 禾谷镰刀菌及其毒素研究 | 第16-21页 |
1.2.1 禾谷镰刀菌的分类及特征 | 第16-18页 |
1.2.2 禾谷镰刀菌的侵染过程 | 第18-19页 |
1.2.3 禾谷镰刀菌的毒素类型及其在赤霉菌侵染中的作用 | 第19-21页 |
1.3 小麦赤霉病抗性机制研究进展 | 第21-27页 |
1.3.1 小麦赤霉病的抗性类型 | 第21-22页 |
1.3.2 小麦赤霉病的抗源筛选与种质创新 | 第22-23页 |
1.3.3 小麦赤霉病的抗性遗传研究 | 第23-24页 |
1.3.4 小麦赤霉病相关的抗病信号途径研究 | 第24-27页 |
2 基因芯片技术及其应用 | 第27-32页 |
2.1 基因芯片的概念 | 第27页 |
2.2 基因芯片的发展历程 | 第27-28页 |
2.3 基因芯片的类型 | 第28页 |
2.4 基因芯片的制备 | 第28-29页 |
2.4.1 芯片制备 | 第28-29页 |
2.4.2 样品制备 | 第29页 |
2.4.3 生物分子杂交反应 | 第29页 |
2.4.4 信号检测 | 第29页 |
2.5 基因芯片的数据分析 | 第29-30页 |
2.6 基因芯片在植物研究中的应用 | 第30-32页 |
2.6.1 基因组测序 | 第30页 |
2.6.2 基因差异表达及新基因的发现 | 第30-31页 |
2.6.3 基因多态性分析及突变性检测 | 第31页 |
2.6.4 植物抗逆研究 | 第31页 |
2.6.5 转基因农产品检测和植物检疫 | 第31-32页 |
2.7 基因芯片存在的问题 | 第32页 |
3 植物非特异性脂转移蛋白的研究进展 | 第32-42页 |
3.1 非特异性脂转移蛋白的发现 | 第32-33页 |
3.2 非特异性脂转移蛋白的结构和分类 | 第33-35页 |
3.3 非特异性脂转移蛋白的生物学功能 | 第35-42页 |
3.3.1 非特异性脂转移蛋白的脂转移活性 | 第35页 |
3.3.2 非特异性脂转移蛋白在生殖发育中的功能 | 第35-36页 |
3.3.3 非特异性脂转移蛋白在抗逆反应中的功能 | 第36页 |
3.3.4 非特异性脂转移蛋白在抗病反应中的功能及作用机制 | 第36-42页 |
本研究的目的和意义 | 第42-43页 |
本研究技术路线 | 第43-45页 |
第二章 基于基因芯片杂交的望水白抗赤霉病表达谱分析 | 第45-85页 |
1 引言 | 第45-46页 |
2 材料和方法 | 第46-55页 |
2.1 试验材料 | 第46-47页 |
2.1.1 植物材料 | 第46-47页 |
2.1.2 Affymetrix小麦基因组表达谱芯片2.0 | 第47页 |
2.1.3 赤霉菌菌株 | 第47页 |
2.2 试验方法 | 第47-55页 |
2.2.1 芯片杂交探针制备和芯片杂交、数据扫描和数据处理 | 第47-52页 |
2.2.2 实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR) | 第52-54页 |
2.2.3 引物设计 | 第54页 |
2.2.4 本研究生物信息学分析所用到的网站网址 | 第54-55页 |
3 结果与分析 | 第55-81页 |
3.1 望水白和NAUH117受赤霉菌诱导的基因表达谱分析 | 第55-71页 |
3.1.1 望水白和NAUH117穗部组织受赤霉菌诱导表达谱分析 | 第55-56页 |
3.1.2 差异表达基因的聚类分析 | 第56-57页 |
3.1.3 差异表达基因的功能注释 | 第57-61页 |
3.1.4 差异表达基因的代谢通路分析 | 第61-66页 |
3.1.5 差异表达基因的qRT-PCR分析 | 第66-69页 |
3.1.6 差异表达基因的染色体电子定位 | 第69-71页 |
3.2 望水白受赤霉菌和DON诱导的基因表达谱分析 | 第71-81页 |
3.2.1 望水白穗部组织受赤霉菌和DON诱导表达谱分析 | 第71页 |
3.2.2 差异表达基因的聚类分析 | 第71-72页 |
3.2.3 差异表达基因的功能注释 | 第72-76页 |
3.2.4 差异表达基因的代谢通路分析 | 第76-79页 |
3.2.5 差异表达基因的染色体电子定位 | 第79-81页 |
4 讨论 | 第81-85页 |
第三章 望水白中一个非特异性脂转移蛋白基因的克隆和功能鉴定 | 第85-121页 |
1 引言 | 第85-86页 |
2 材料和方法 | 第86-100页 |
2.1 试验材料 | 第86-87页 |
2.1.1 植物材料 | 第86页 |
2.1.2 用于表达谱分析的植物材料处理方法和取样方案 | 第86-87页 |
2.1.3 赤霉菌菌株 | 第87页 |
2.1.4 其它菌株和载体 | 第87页 |
2.2 试验方法 | 第87-100页 |
2.2.1 植物基因组DNA的提取 | 第87-89页 |
2.2.2 PCR反应 | 第89页 |
2.2.3 PCR扩增产物的检测 | 第89-90页 |
2.2.4 PCR扩增产物的染色 | 第90页 |
2.2.5 PCR产物的回收及克隆 | 第90-93页 |
2.2.6 目的基因与GFP融合蛋白表达载体的构建 | 第93-95页 |
2.2.7 基因枪法转化小麦叶片和洋葱表皮细胞 | 第95-96页 |
2.2.8 基因的遗传转化 | 第96-99页 |
2.2.9 引物设计 | 第99-100页 |
2.2.10 本研究生物信息学分析所用到的网站网址 | 第100页 |
3 结果与分析 | 第100-118页 |
3.1 非特异性脂转移蛋白基因的克隆和序列分析 | 第100-101页 |
3.2 TaLTP-B基因的生物信息学分析 | 第101-107页 |
3.2.1 ORF及编码氨基酸序列分析 | 第101-102页 |
3.2.2 TaLTP-B蛋白质的基本性质 | 第102页 |
3.2.3 TaLTP-B的信号肽预测 | 第102-103页 |
3.2.4 TaLTP-B蛋白质磷酸化分析 | 第103-104页 |
3.2.5 TaLTP-B蛋白质的疏水性分析 | 第104页 |
3.2.6 TaLTP-B的系统进化关系分析 | 第104-107页 |
3.3 TaLTP-B基因的染色体定位 | 第107页 |
3.4 TaLTP-B基因的表达特征分析 | 第107-110页 |
3.5 TaLTP-B的亚细胞定位分析 | 第110-112页 |
3.5.1 利用生物信息学分析预测TaLTP-B的亚细胞定位 | 第110页 |
3.5.2 TaLTP-B-GFP在洋葱表皮细胞及小麦叶片中的亚细胞定位 | 第110-112页 |
3.6 TaLTP-B基因的遗传转化及功能鉴定 | 第112-118页 |
3.6.1 转TaLTP-B基因超量表达载体的构建 | 第112-113页 |
3.6.2 阳性扬麦158转TaLTP-B基因植株的获得及表达分析 | 第113-114页 |
3.6.3 TaLTP-B基因转扬麦158 T_0代转基因植株的赤霉病抗性鉴定 | 第114-116页 |
3.6.4 转基因植株的白粉病抗性鉴定 | 第116-118页 |
4 讨论 | 第118-121页 |
全文结论 | 第121-123页 |
创新点 | 第123-125页 |
参考文献 | 第125-141页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第141-143页 |
致谢 | 第143页 |