论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-32页 |
| 1.1 植物病原卵菌 | 第12-17页 |
| 1.1.1 卵菌病害 | 第12-14页 |
| 1.1.2 卵菌与真菌的区别 | 第14-15页 |
| 1.1.3 卵菌研究概况 | 第15-17页 |
| 1.2 植物防御系统 | 第17-22页 |
| 1.2.1 组成型抗性 | 第17-18页 |
| 1.2.2 诱导抗病性 | 第18-22页 |
| 1.3 植物激素在抗病反应中的作用 | 第22-26页 |
| 1.3.1 水杨酸信号通路 | 第22-24页 |
| 1.3.2 茉莉酸信号通路 | 第24页 |
| 1.3.3 一氧化氮 | 第24-25页 |
| 1.3.4 其他激素 | 第25-26页 |
| 1.4 植物-病原互作体系 | 第26-30页 |
| 1.4.1 植物-病毒亲和互作 | 第27页 |
| 1.4.2 植物-细菌亲和互作 | 第27-28页 |
| 1.4.3 植物-真菌亲和互作 | 第28-29页 |
| 1.4.4 拟南芥-卵菌亲和互作 | 第29-30页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第30-32页 |
| 第二章 RTP1负调控拟南芥对寄生疫霉菌的抗性 | 第32-62页 |
| 2.1 试验材料 | 第32-33页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第32页 |
| 2.1.2 菌株材料 | 第32页 |
| 2.1.3 质粒载体 | 第32-33页 |
| 2.1.4 试剂与仪器 | 第33页 |
| 2.2 试验方法 | 第33-40页 |
| 2.2.1 拟南芥培养 | 第33页 |
| 2.2.2 植物表达载体构建 | 第33-35页 |
| 2.2.3 农杆菌转化 | 第35-36页 |
| 2.2.4 拟南芥转化及筛选 | 第36页 |
| 2.2.5 拟南芥基因组DNA的提取 | 第36页 |
| 2.2.6 拟南芥叶片RNA的提取 | 第36-37页 |
| 2.2.7 反转录PCR及实时定量PCR | 第37页 |
| 2.2.8 Western blot检测转化子中蛋白表达 | 第37-38页 |
| 2.2.9 Northern blot检测转化子中siRNA的表达 | 第38页 |
| 2.2.10 病原菌培养及接种方法 | 第38-40页 |
| 2.2.11 组织染色 | 第40页 |
| 2.2.12 植物瞬时表达 | 第40页 |
| 2.3 结果与分析 | 第40-58页 |
| 2.3.1 rtp1突变体的鉴定 | 第40-43页 |
| 2.3.2 rtp1-1对寄生疫霉菌根部侵染抗性分析 | 第43-44页 |
| 2.3.3 RTP1基因表达时空特异性 | 第44-45页 |
| 2.3.4 RTP1对寄生疫霉菌侵染的响应 | 第45页 |
| 2.3.5 RTP1编码内质网定位的蛋白 | 第45-47页 |
| 2.3.6 RTP1互补、过表达转化子的筛选及鉴定 | 第47-48页 |
| 2.3.7 RTP1基因沉默转化子的筛选及鉴定 | 第48页 |
| 2.3.8 RTP1负调控植物对寄生疫霉菌的抗性 | 第48-49页 |
| 2.3.9 rtp1-1以局部的细胞死亡抑制疫霉菌侵染 | 第49-51页 |
| 2.3.10 rtp1-1植物中活性氧水平分析 | 第51-52页 |
| 2.3.11 rtp1-1受疫霉菌侵染后PR1反应更快 | 第52-53页 |
| 2.3.12 rtp1-1对丁香假单胞菌抗性增强 | 第53-56页 |
| 2.3.13 rtp1-1对拟南芥白粉菌的抗性增强 | 第56-57页 |
| 2.3.14 rtp1-1对番茄灰霉病菌的抗性测试 | 第57-58页 |
| 2.4 讨论 | 第58-62页 |
| 2.4.1 RTP1属于MtN21家族成员 | 第58-59页 |
| 2.4.2 rtp1-1表现了对活体寄生型病原菌的广谱抗性 | 第59-60页 |
| 2.4.3 RTP1负调控活性氧迸发和细胞坏死 | 第60-62页 |
| 第三章 RTP2参与寄生疫霉菌抗性调控 | 第62-84页 |
| 3.1 试验材料 | 第62页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第62页 |
| 3.1.2 菌株材料 | 第62页 |
| 3.1.3 质粒载体 | 第62页 |
| 3.1.4 试剂与仪器 | 第62页 |
| 3.2 试验方法 | 第62-66页 |
| 3.2.1 植物培养与接种 | 第62页 |
| 3.2.2 Southern杂交 | 第62-63页 |
| 3.2.3 TAIL-PCR | 第63页 |
| 3.2.4 植物表达载体构建 | 第63-64页 |
| 3.2.5 农杆菌转化 | 第64页 |
| 3.2.6 拟南芥转化及转化子鉴定 | 第64页 |
| 3.2.7 氮源处理 | 第64-65页 |
| 3.2.8 拟南芥RNA提取 | 第65页 |
| 3.2.9 反转录PCR及实时定量PCR | 第65页 |
| 3.2.10 植物组织染色 | 第65页 |
| 3.2.11 蛋白定位研究 | 第65-66页 |
| 3.3 结果与分析 | 第66-80页 |
| 3.3.1 rtp2突变体的鉴定 | 第66-67页 |
| 3.3.2 rtp2失活基因的鉴定 | 第67-69页 |
| 3.3.3 RTP2编码一个细胞膜蛋白 | 第69-70页 |
| 3.3.4 RTP2基因表达模式 | 第70页 |
| 3.3.5 T-DNA插入突变体的鉴定 | 第70-72页 |
| 3.3.6 RTP2转基因植物的筛选与鉴定 | 第72-73页 |
| 3.3.7 rtp2呈现对丁香假单胞菌的抗性 | 第73-75页 |
| 3.3.8 rtp2对番茄灰霉菌的反应 | 第75-76页 |
| 3.3.9 氮源缺乏影响RTP2表达 | 第76-79页 |
| 3.3.10 一氧化氮参与寄生疫霉菌抗性反应 | 第79-80页 |
| 3.4 讨论 | 第80-84页 |
| 第四章 结论与展望 | 第84-86页 |
| 4.1 结论 | 第84页 |
| 4.2 创新点 | 第84-85页 |
| 4.3 研究展望 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-100页 |
| 致谢 | 第100-102页 |
| 作者简介 | 第102页 |
