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棉花GhCIPK6基因的克隆及其在非生物胁迫响应中的功能鉴定

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棉花GhCIPK6基因的克隆及其在非生物胁迫响应中的功能鉴定
论文目录
 
摘要第1-10页
Abstract第10-14页
缩略语表第14-15页
1 文献综述第15-40页
  1.1 植物抵抗非生物逆境分子生物学研究进展第15-16页
  1.2 植物中参与逆境胁迫响应的主要信号传导路径第16-22页
    1.2.1 ABA信号路径第17-19页
    1.2.2 Ca~(2+)信号路径第19-22页
  1.3 CBL-CIPK复合体参与植物的抗逆反应第22-38页
    1.3.1 CBL-CIPK复合体第22-26页
    1.3.2 CBL-CIPK信号网络的比较基因组分析第26-27页
    1.3.3 CBL-CIPK信号网络的定位和靶标第27-30页
    1.3.4 CBL-CIPK复合体的功能第30-38页
    1.3.5 CIPK6蛋白激酶研究进展第38页
  1.4 本课题研究的目的、意义第38-40页
2 材料与方法第40-56页
  2.1 实验材料第40-41页
    2.1.1 植物材料第40页
    2.1.2 实验所用到的菌株、质粒和感受态细胞第40-41页
  2.2 实验方法第41-51页
    2.2.1 植物核酸抽提技术第41-42页
    2.2.2 cDNA制备第42页
    2.2.3 GhCIPK6的cDNA及基因组全长的获得第42-44页
    2.2.4 基因生物信息学分析第44页
    2.2.5 GhCIPK6启动子序列克隆及顺式作用元件分析第44页
    2.2.6 Southern杂交分析第44页
    2.2.7 RT-PCR和q RT-PCR基因的表达分析第44-45页
    2.2.8 载体的构建第45-47页
    2.2.9 植物遗传转化第47-48页
    2.2.10 原生质体瞬时表达第48-50页
    2.2.11 转基因材料的筛选与鉴定第50页
    2.2.12 GUS染色分析第50页
    2.2.13 拟南芥胁迫处理实验第50-51页
    2.2.14 转基因棉花花器官性状调查第51页
    2.2.15 转基因植株激素含量测定第51页
  2.3 实验中所用的引物第51-56页
3 结果与分析第56-84页
  3.1 棉花GhCIPK6基因的克隆与生物信息学分析第56-59页
  3.2 GhCIPK6的拷贝数分析第59-60页
  3.3 GhCIPK6组织表达模式及非生物逆境和ABA响应的表达分析第60-62页
  3.4 GhCIPK6的亚细胞定位分析第62-63页
  3.5 GhCIPK6的启动子分析第63-66页
    3.5.1 GhCIPK6启动子序列分析第63-65页
    3.5.2 GhCIPK6启动子组织表达模式第65-66页
  3.6 遗传转化载体的构建第66-67页
    3.6.1 超表达载体的构建第67页
    3.6.2 RNAi载体的构建第67页
  3.7 拟南芥中异源表达GhCIPK6的功能验证第67-74页
    3.7.1 拟南芥的转化和筛选第67页
    3.7.2 GhCIPK6超量表达拟南芥转基因种子逆境条件的萌发分析第67-69页
    3.7.3 GhCIPK6超量表达转基因拟南芥ABA敏感性分析第69-71页
    3.7.4 土培条件下GhCIPK6超量表达拟南芥植株抗旱性分析第71-72页
    3.7.5 逆境相关基因的表达分析第72-74页
  3.8 GhCIPK6转基因棉花的遗传转化和功能验证第74-84页
    3.8.1 棉花遗传转化和转基因植株的阳性检测第74-75页
    3.8.2 转基因植株的拷贝数和表达量检测第75-76页
    3.8.3 棉花GhCIPK6超表达表现高温不育第76-79页
    3.8.4 GhCIPK6超表达促进棉蕾和胚珠发育第79-81页
    3.8.5 转基因棉花叶片和花药在田间不同温度下的激素变化分析第81-84页
4 讨论第84-93页
  4.1 GhCIPK6属于一类与CBL互作的蛋白激酶,参与逆境响应第84-85页
  4.2 GhCIPK6在花药中特异表达,可能参与生殖系统功能第85-86页
  4.3 GhCIPK6超表达可能通过AtCBL1/AtCBL4-GhCIPK6调控增加抗旱性第86-87页
  4.4 GhCIPK6介导拟南芥抗盐性和抗旱性的交叉第87-88页
  4.5 GhCIPK6介导的非生物胁迫和ABA信号路径的交叉第88-89页
  4.6 GhCIPK6超表达造成高温敏感雄性不育第89-93页
参考文献第93-106页
附录第106-111页
攻读学位期间已发表和待发表论文第111-112页
致谢第112-113页

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