论文目录 | |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
缩略词 | 第16-17页 |
前言 | 第17-19页 |
第一章 文献综述 | 第19-33页 |
1.1 植物遗传转化概述 | 第19-20页 |
1.1.1 植物遗传转化 | 第19-20页 |
1.1.2 植物遗传转化的优势 | 第20页 |
1.2 植物遗传转化方法 | 第20-23页 |
1.2.1 农杆菌介导法 | 第20-21页 |
1.2.2 基因枪法 | 第21页 |
1.2.3 超声波介导法 | 第21-22页 |
1.2.4 显微注射法 | 第22页 |
1.2.5 化学药剂诱导法 | 第22页 |
1.2.6 花粉管通道法 | 第22-23页 |
1.2.7 电激法 | 第23页 |
1.3 游离小孢子培养技术研究进展 | 第23-27页 |
1.3.1 影响大白菜游离小孢子胚状体发生因素 | 第24-26页 |
1.3.2 其他特殊处理 | 第26-27页 |
1.3.3 大白菜游离小孢子培养技术的优势与利用 | 第27页 |
1.4 细胞穿透肽简介 | 第27-30页 |
1.4.1 细胞穿透肽的发现 | 第27-28页 |
1.4.2 细胞穿透肽的运转优势 | 第28页 |
1.4.3 细胞穿透肽穿透机制 | 第28-29页 |
1.4.4 细胞穿透肽的应用 | 第29-30页 |
1.5 细胞穿透肽从动物细胞到植物细胞过渡 | 第30-31页 |
1.6 本研究目的及意义 | 第31-33页 |
第二章 表达载体pBI121和pBI221-GFP转化、鉴定及目的片段获得 | 第33-42页 |
2.1 材料与方法 | 第33-38页 |
2.1.1 菌株与质粒载体 | 第33页 |
2.1.2 试验用品 | 第33页 |
2.1.3 试验方法 | 第33-38页 |
2.2 结果与分析 | 第38-41页 |
2.2.1 菌液PCR扩增产物检测结果 | 第38-39页 |
2.2.2 质粒pBI121和pBI121-GFP提取 | 第39-40页 |
2.2.3 载体质粒pBI121和pBI221-GFP酶切鉴定结果 | 第40页 |
2.2.4 目的片段回收 | 第40-41页 |
2.3 小结 | 第41-42页 |
第三章 CPP介导大白菜小孢子转染 | 第42-49页 |
3.1 材料与方法 | 第42-44页 |
3.1.1 植物材料 | 第42页 |
3.1.2 质粒载体 | 第42页 |
3.1.3 实验药品 | 第42页 |
3.1.4 试验方法 | 第42-44页 |
3.2 结果与分析 | 第44-48页 |
3.2.1 Lipofectamine~(TM)2000对大白菜游离小孢子胚胎发生的影响 | 第44-45页 |
3.2.2 DNAcargos复合物的检测 | 第45页 |
3.2.3 DNAcargos复合物添加对小孢子胚胎发生的影响 | 第45-46页 |
3.2.4 热激时间对添加DNAcargos复合物后小孢子胚胎发生的影响 | 第46页 |
3.2.5 更换和添加培养基对添加DNAcargos复合物后小孢子胚胎发生的影响 | 第46-47页 |
3.2.6 植株再生过程 | 第47-48页 |
3.3 小结 | 第48-49页 |
第四章 转化植株的鉴定 | 第49-66页 |
4.1 材料与方法 | 第49-57页 |
4.1.1 植物材料 | 第49页 |
4.1.2 试剂 | 第49页 |
4.1.3 引物 | 第49页 |
4.1.4 实验仪器 | 第49-50页 |
4.1.5 试验方法 | 第50-57页 |
4.2 结果与分析 | 第57-64页 |
4.2.1 大白菜基因组DNA提取 | 第57-58页 |
4.2.2 PCR扩增鉴定转化植株 | 第58-59页 |
4.2.3 总RNA提取与反转录PCR | 第59-60页 |
4.2.4 GUS组织化学染色结果 | 第60-61页 |
4.2.5 GFP的鉴定 | 第61-62页 |
4.2.6 转化植株Southern Blot检测结果 | 第62-64页 |
4.2.7 转化植株倍性鉴定 | 第64页 |
4.3 小结 | 第64-66页 |
讨论 | 第66-72页 |
结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-90页 |
附录 | 第90-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第99页 |