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基于分子删除策略的新型安全转基因水稻培育技术

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基于分子删除策略的新型安全转基因水稻培育技术
论文目录
 
主要缩略词第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-14页
第一章 引言第14-31页
  1.1 立论依据第14-15页
  1.2 文献综述第15-31页
    1.2.1 转基因水稻第15-23页
    1.2.3 位点特异性重组系统第23-31页
第二章 阻断激活验证水稻胚乳高效特异性删除系统的有效性第31-56页
前言第31-32页
  2.1 材料第32-33页
    2.1.1 植物材料第32页
    2.1.2 菌株和质粒第32页
    2.1.3 主要化学试剂第32-33页
    2.1.4 主要仪器设备第33页
    2.1.5 主要缓冲液及培养基配方第33页
  2.2 方法第33-42页
    2.2.1 实验设计第33-34页
    2.2.2 水稻遗传表达载体的构建第34-39页
    2.2.3 水稻转化用农杆菌菌株的获得第39-40页
    2.2.4 水稻的遗传转化第40页
    2.2.5 转基因水稻的潮霉素抗性筛选第40页
    2.2.6 转基因水稻的PCR检测第40-41页
    2.2.7 转基因水稻GUS组织化学染色第41页
    2.2.8 转基因水稻的Southern杂交第41页
    2.2.9 转基因水稻的胚乳特异性删除之遗传分析第41-42页
  2.3 结果与分析第42-55页
    2.3.1 载体构建第42-44页
    2.3.2 水稻的遗传转化与转基因鉴定第44-47页
    2.3.3 胚乳特异性删除的验证第47-51页
    2.3.4 水稻胚乳特异性删除的遗传分析第51-55页
  2.4 小结第55-56页
第三章 胚乳特异删除外源基因培育安全转基因水稻方法的建立第56-82页
前言第56-57页
  3.1 材料第57页
  3.2 方法第57-62页
    3.2.1 实验设计第57页
    3.2.2 水稻遗传表达载体的构建第57-59页
    3.2.3 水稻的遗传转化第59页
    3.2.4 转基因水稻的潮霉素抗性筛选第59页
    3.2.5 转基因水稻的PCR检测第59页
    3.2.6 转基因水稻GUS组织化学染色第59页
    3.2.7 转基因水稻GUS酶活测定第59-62页
    3.2.8 转基因水稻的Southern杂交第62页
    3.2.9 转基因水稻株系的遗传分析第62页
  3.3 结果与分析第62-81页
    3.3.1 表达载体p1300-LF-AGCSGS和p1300-AGS的获得第62-63页
    3.3.2 水稻的遗传转化与转基因鉴定第63-65页
    3.3.3 胚乳特异性删除的验证第65-74页
    3.3.4 水稻胚乳特异性删除的遗传分析第74-81页
  3.4 小结第81-82页
第四章 杂交途径培育新型安全转基因水稻方法的建立第82-95页
前言第82-83页
  4.1 材料第83页
  4.2 方法第83-86页
    4.2.1 实验设计第83页
    4.2.2 水稻遗传表达载体的构建第83-84页
    4.2.3 水稻的遗传转化第84-85页
    4.2.4 转基因水稻的PCR检测第85-86页
    4.2.5 转基因水稻的有性杂交第86页
    4.2.6 转基因水稻及其杂交后代的GUS组织化学染色分析第86页
  4.3 结果与分析第86-94页
    4.3.1 载体构建第86-89页
    4.3.2 水稻的遗传转化与转基因水稻鉴定第89-91页
    4.3.3 转基因水稻的有性杂交第91页
    4.3.4 转基因水稻杂交后代的分析第91-94页
  4.4 小结第94-95页
第五章 讨论、主要结论及创新点第95-103页
  5.1 讨论第95-100页
  5.2 主要结论第100-102页
    5.2.1 阻断激活验证水稻胚乳高效特异性删除系统的有效性第100-101页
    5.2.2 胚乳特异删除外源基因培育安全转基因水稻方法的建立第101页
    5.2.3 杂交途径培育新型安全转基因水稻方法的建立第101-102页
  5.3 本论文的创新点第102-103页
参考文献(References)第103-112页
附录一 主要缓冲液及培养基配方第112-115页
附录二 水稻的遗传转化第115-117页
附录三 转基因水稻的潮霉素抗性筛选第117-118页
附录四 PCR扩增的引物与反应条件第118-120页
附录五 Southern杂交第120-122页
附录六 在学期间发表的文章及专利申请第122-123页
致谢第123页

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